科研产出
花生壳黄酮的提取纯化工艺
《中国油料作物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：本文采用酶法预处理结合超声波辅助提取的方式,最大程度地提高了花生壳总黄酮的得率,并优化大孔树脂纯化工艺,提高了有效成分的纯度。花生壳黄酮的最佳提取工艺为:花生壳粉与水混合,半纤维素酶与木聚糖酶按1:1（m/m）复配,用量0.25‰,50℃酶解30 min后,按料液比1:20（m/V）加入乙醇至终浓度60%,于功率1000 W,55℃超声波辅助提取60 min,花生壳总黄酮的得率约为2.5%。选用D101型大孔树脂,上样缓冲液为pH 5.0的60%乙醇溶液,洗脱液为pH 10.0的70%乙醇溶液,上样与洗脱流速为0.75 BV/h和1.5 BV/h。纯化后的花生壳总黄酮和木犀草素的纯度分别为10.54%和5.85%,提高了90%和120%。
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中长链结构脂质MLCT的研究进展
《食品工业科技 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：结构脂质(Structured lipids,Sls)是一种天然油脂的改性产品,因其具有快速供能、降低血清胆固醇含量、缓解肥胖症等特殊的生理功能和营养价值,被广泛应用于食品加工、临床营养、医药等领域.本文综述了结构脂质的概念及合成方法,并介绍了结构脂质的分离纯化方法(低温溶剂结晶法、柱层析法、超临界CO2 萃取法、尿素包合法、分子蒸馏法)和体内代谢途径,以及结构脂质的生理功能包括抗肥胖、降血脂、改善胰岛素抵抗等,对结构脂质的研发前景进行展望,以期为进一步研究结构脂的高效合成及工业化生产提供参考.
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大白菜杂交新组合ZF006未成熟杂交种纯度分子标记快速鉴定
《山东农业科学 》 2020
摘要：为在大白菜种子收获前提早鉴定杂交种纯度,使新组合顺利进行品种登记、新品种种子提早上市销售,本研究以新组合ZF006及其双亲为试材,对ZF006杂交种试配阶段双亲二级侧枝上近、中及远端3个部位的未成熟种子进行了离体诱导和单棵幼苗DNA提取。同时,采用20对均匀分布于大白菜基因组的InDel标记对双亲进行多态性引物的筛选,共筛选到8对双亲间有多态性的引物,选择其中4对共显性且条带清晰的InDel引物用于杂交种纯度鉴定。结果表明:双亲二级侧枝上不同部位的未成熟杂交种离体诱导萌发率有较大差异,近端和中端的种子离体诱导萌发率较高,远端的种子离体诱导萌发率较低;亲本P_1的二级侧枝近、中及远端未成熟种子的杂交率分别是87. 96%、97. 45%和94. 44%,而亲本P_2的则明显低于P_1对应部位的种子,分别是71. 53%、90. 37%和90. 00%,总体上,P_1收获的种子杂交率为92. 49%,而亲本P_2的为80. 52%,双亲混收的杂交率则为86. 54%。综上结果,单收和混收杂交种的纯度均未达到98%的国家标准,提示新组合ZF006双亲有必要在自交不亲和性方面继续加以改进。而本研究构建的未成熟大白菜杂交种纯度快速鉴定技术,对大白菜种业企业降低成本、加速资金周转以及提高经营效益具有重要的实践指导意义。
关键词： 大白菜 杂交组合 未成熟种子 纯度 分子标记 快速鉴定
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大孔树脂分离纯化碱蓬中甜菜红素的研究
《山东农业科学 》 2019
摘要：以新鲜盐地碱蓬为材料,采用水提法得甜菜红素提取液,以吸附率、解吸率、吸附量为考察指标,分别考察了XAD-7、AB-8、D101三种大孔吸附树脂对甜菜红素的吸附与解吸性能,筛选出AB-8为最适分离纯化盐地碱蓬中甜菜红素的大孔树脂。结合静态与动态试验,得出AB-8大孔树脂分离纯化甜菜红素的最佳工艺条件:将新鲜碱蓬与去离子水按质量比1∶1打浆过滤,重复浸提2次,混合甜菜红素水提液进行澄清后,可在室温下直接上柱吸附,以2 mL/min的上样流速进行吸附,上样体积为65 mL。吸附饱和后,用乙醇浓度为60%的洗脱液以2 mL/min的速度进行洗脱解吸,洗脱液用量165 mL,在此条件下甜菜红素的得率为0.85%。
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猪圆环病毒2型Cap蛋白原核表达载体的构建、表达及蛋白纯化
《黑龙江畜牧兽医 》 2019 北大核心
摘要：为了表达并纯化猪圆环病毒2型(Porcine circovirus 2,PCV-2)Cap蛋白,试验将ORF2基因的密码子改造为大肠杆菌嗜好的密码子,但编码的氨基酸序列不变。合成优化后将ORF2基因全部基因序列,克隆于pET-30a原核表达载体并转化至大肠杆菌BL21中,经PCR和测序鉴定阳性克隆后,采用IPTG诱导表达目的蛋白。优化蛋白表达条件,采用Ni-NTA亲和层析胶纯化目的蛋白。结果表明:基因序列合成正确,无点突变。重组质粒成功转化入大肠杆菌BL21中,经诱导表达出现约37 ku的蛋白条带,与预期分子量大小一致。优化表达条件后,加入终浓度为1.2 mmol/L IPTG诱导6 h,表达产物含量最高。经Western-blot检测,能被PCV-2抗体阳性血清结合。说明成功构建了PCV-2 Cap蛋白的原核表达质粒pET-30a-ORF2,优化了表达条件并纯化出目的蛋白。
关键词： 猪圆环病毒2型 Cap蛋白 ORF2 原核表达 优化条件 纯化
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北五味子多糖的分离纯化及其对鸡外周血淋巴细胞的影响
《山东农业科学 》 2019
摘要：本研究在传统水提醇沉法基础上辅以酶消化法提取北五味子多糖,并用离子凝胶柱层析法对其进一步纯化,分离得到三种分子量的多糖组分(SCP-Ⅰ、SCP-Ⅱ和SCP-Ⅲ)。为分析多糖三种组分对鸡外周血淋巴细胞的作用,首先用高浓度(最高10 mg/mL)的三种多糖组分作用于淋巴细胞,结果显示≤1 mg/mL的多糖对细胞没有显著的毒性作用。以不同浓度的三种SCP组分(0、12.5、25.0、50.0、100.0、200.0、400.0、800.0、1 600.0μg/mL)作用于淋巴细胞,发现SCP-Ⅲ对细胞因子IL-2、IL-6和IFN-γ的分泌具有显著的增强作用,但最佳作用浓度不同,SCP-Ⅰ和SCP-Ⅱ对这三种细胞因子的作用效果不显著。本研究为北五味子多糖的精制和应用奠定了理论基础。
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超声波辅助酶法提取毛木耳多糖工艺条件优化
《食品研究与开发 》 2019 北大核心
摘要：以山东省鱼台县毛木耳为原料,采用超声波辅助酶法进行毛木耳多糖的提取工艺优化。首先采用单因素试验的方法研究液料比、超声波时间、超声波功率、复合酶(复合蛋白酶与纤维素酶质量比为1∶1)、酶解温度4个单因素对毛木耳多糖提取效果的影响。在单因素试验结果的的基础上,进行响应面法试验。依据响应面试验结果分析确定最优超声波辅助酶提取多糖工艺条件为:液料比40∶1(mL/g)、超声波时间31 min、超声波功率160 W、复合酶酶解温度为64℃,在此条件下多糖提取率为14.41%。
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利用隐性性状及其分子标记快速选择大白菜育种纯系
《山东农业科学 》 2019
摘要：加快纯系选育速度、缩短育种进程,是大白菜新品种选育的重要目标。本试验利用大白菜桔红色、无表皮毛、亮绿秆三个隐性性状及其分子标记辅助大白菜优良纯系选择,开展加快大白菜育种效率的研究。结果表明:该分子标记属于基因本身外显子区段的InDel或SNP标记,选择效率高(100%),可使大白菜优良纯系培育时间缩短3年,与常规育种相结合形成的育种技术体系,可实现桔红心、无表皮毛、亮绿秆优质大白菜新品种选育的精准分子设计。本研究结果直接来源于大白菜育种实践,具有重要的理论和实践价值。
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