科研产出
金针菇多糖制备过程中体外抗氧化活性研究
《食品研究与开发 》 2018 北大核心
摘要：采用热水浸提、乙醇沉淀、Sevage法除蛋白的方法对金针菇多糖进行提取及纯化,依次得到不同纯度的粗多糖,分别为金针菇多糖1(Flammulina velutipes polysaccharide1,FVP1)、金针菇多糖2(Flammulina velutipes polysaccharide2,FVP2)、金针菇多糖3(Flammulina velutipes polysaccharide3,FVP3),研究纯化过程中金针菇多糖的含量及抗氧化活性变化。采用苯酚硫酸法和3,5-二硝基水杨酸法(3,5-dinitrosalicylic acid,DNS)分别测定提取物中的总糖及还原糖含量,以总抗氧化能力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力及抑制羟基自由基能力为检测指标,对纯化过程中金针菇粗多糖的抗氧化能力进行评价。结果表明:FVP1、FVP2、FVP3中多糖的含量分别为10.35%、19.48%、55.21%;得率分别为54.9%、9.26%、1.52%。以上3种不同纯度金针菇粗多糖在0.5 mg/mL~2.0 mg/mL的浓度范围内抗氧化活性能力大小依次为:抑制羟基自由基能力>清除DPPH自由基能力>总抗氧化能力。FVP1、FVP2、FVP3抗氧化能力均随着浓度升高而增强,抗氧化能力的大小依次为FVP1>FVP2>FVP3,这表明分离纯化工艺有降低金针菇多糖体外抗氧化能力的趋势。
关键词： 金针菇多糖 分离纯化 总抗氧化能力 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼 抑制羟基自由基能力
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银杏花粉黄酮组分分离纯化及其清除DPPH自由基能力
《农业工程学报 》 2018 EI 北大核心 CSCD
摘要：为了分离纯化银杏花粉中具有潜在抗氧化活性的黄酮组分及研究其潜在抗氧化活性,该文对银杏花粉的总黄酮进行提取和分步萃取,采用1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH)自由基清除率检测和组分分析锁定待纯化萃取相。通过DPPH-HPLC-PAD技术筛选目标清除自由基组分,并采用制备型液相色谱技术分离纯化这些组分,然后采用紫外可见吸收光谱、质谱、核磁共振氢谱、碳谱等技术进行结构鉴定,最后通过测定DPPH自由基清除率初步研究其潜在抗氧化活性。结果显示,银杏花粉粗提物具有清除DPPH自由基活性,对DPPH的半抑制率(IC50值)为1.32 mg/m L,乙酸乙酯相和正丁醇相的IC50值为0.46、0.84 mg/m L,分别是粗提物的34.85%和63.64%。可见,乙酸乙酯相的清除DPPH活性最高。进一步研究显示,乙酸乙酯相富集了6种主要银杏花粉黄酮,而且均具有清除DPPH活性。经纯化和结构鉴定分别为山奈酚-3,4’-双-O-β-D-葡萄糖苷(1)、山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖基-7-O-α-L-鼠李糖苷(2)、山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(3)、山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(4)、柚皮素(5)和山奈酚(6)。其清除DPPH自由基的活性由高到低依次为:化合物6>化合物2>化合物3>化合物4>化合物1>化合物5。其中山奈酚清除DPPH的IC50值为0.017 mg/m L,与维生素C及芦丁相比没有显著性差异(P>0.05)。上述研究为银杏花粉功能成分的深入研究奠定了基础。
关键词： 纯化 农产品 加工 银杏花粉 黄酮 DPPH自由基 抗氧化
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山东省副猪嗜血杆菌分子流行病学调查及其外膜蛋白P2基因的表达纯化
《中国动物传染病学报 》 2018 北大核心
摘要：根据副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)外膜蛋白(outer membrane proteins,Omp)P2基因序列(GenBank登录号:FJ685754.1)设计引物,对2015～2016年在山东省不同地区采集的225份病料进行PCR扩增和遗传演化分析,结果发现2015年和2016年Hps检出阳性率分别为7.63%、7.48%,细菌分离确定225份样品中17份为阳性;Hps菌株之间的氨基酸同源性在86.7%～99.7%,同源性较高的蛋白具有交叉反应性。构建Hps omp P2基因原核表达载体,确定OmpP2蛋白的最佳诱导温度,通过亲和层析Ni-IDA树脂纯化,获得高纯度的OmpP2蛋白,Western blot确定纯化的OmpP2蛋白与不同血清型的Hps阳性血清均存在良好的反应原性。本研究为进一步探索Hps OmpP2的生物学特性及对副猪嗜血杆菌病的血清学诊断、亚单位疫苗的开发奠定了基础。
关键词： 副猪嗜血杆菌 流行病学 ompP2基因 表达 纯化
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超声波辅助提取金针菇、香菇菇柄中氨基酸的研究
《中国调味品 》 2018 北大核心
摘要：采用超声波辅助提取金针菇、香菇菇柄中的游离氨基酸,研究了超声功率、料液比、超声时间等单因素对提取游离氨基酸的影响,通过正交实验研究了超声波辅助提取的最佳条件。结果表明,各因素对提取金针菇菇柄中游离氨基酸的影响大小依次为料液比>超声时间>超声功率,最佳提取条件为超声功率350 W、料液比1∶20、超声时间3min,在此条件下提取金针菇菇柄中游离氨基酸含量为7.42mg/g;对提取香菇菇柄中游离氨基酸的影响大小依次为料液比>超声功率>超声时间。最佳提取条件为超声功率450W、料液比1∶40、超声时间3min,在此条件下提取香菇菇柄中游离氨基酸含量为4.15mg/g。
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微波辅助提取金针菇、香菇菇柄中氨基酸的研究
《食品工业 》 2018 北大核心
摘要：为充分利用金针菇、香菇加工、食用过程中产生的副产物,以金针菇、香菇菇柄为原料,通过微波辅助提取其中的游离氨基酸。研究了微波功率、料液比、微波时间等单因素对提取游离氨基酸的影响,通过正交试验研究了微波辅助提取的最佳条件。结果表明,影响金针菇菇柄游离氨基酸提取的各因素的主次顺序为微波功率>料液比>处理时间,最佳提取条件为微波功率150 W、料液比1︰20(g/m L)、微波时间3 min,在此条件下金针菇菇柄中游离氨基氮提取率为8.38 mg/g。影响香菇菇柄游离氨基酸提取的各因素的主次顺序为微波功率>料液比>处理时间。最佳提取条件为微波功率150 W、料液比1︰40(g/m L)、微波时间3 min,在此条件下香菇菇柄中游离氨基氮提取率为4.60 mg/g。
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柞蚕雄蛾浓缩液脱脂工艺改进与检测
《中国蚕业 》 2017
摘要：为有效降低柞蚕雄蛾提取液中的脂肪含量,对柞蚕雄蛾浓缩液提取工艺进行了改进,通过三步脱脂工艺在提取过程中对柞蚕雄蛾浓缩液的脂肪进行分步去除。结果表明:以新鲜柞蚕雄蛾为材料,用乙醇浓度为95%的食用酒精,对蚕蛾粉碎浸泡60 h后离心去除脂肪,经低温浓缩至原体积的1/8后再离心去除脂肪,然后复加乙醇浓度为95%的食用酒精至提取液乙醇浓度为20%后于-18℃条件下冷冻8 h,再4 000 r/min离心15 min去除脂肪,所得浓缩液中脂肪含量可降低至0.084%,显著低于工艺改进前(P<0.05)。工艺改进后,浓缩液中有效成分含量也得到显著提高(P<0.05)。
关键词： 柞蚕雄蛾 浓缩液 可溶性固形物含量 提取 脱脂工艺 脂肪含量
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烟粉虱MED隐种气味结合蛋白基因BtabOBP2和BtabOBP4的cDNA克隆及原核表达
《环境昆虫学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：采用RT-PCR和RACE技术成功克隆烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)气味结合蛋白(odorant binding protein,OBP)基因BtabOBP2和BtabOBP4的cDNA全长。BtabOBP2(Gen Bank登录号:AIS71883)和BtabOBP4(Gen Bank登录号:AIS71884)的cDNA序列全长分别为1107 bp和874 bp,完整开放阅读框(ORF)分别为744 bp和429 bp,分别编码247和142氨基酸,BtabOBP4有6个保守的半胱氨酸,属于典型OBP,而BtabOBP2除了具有典型OBP的6个半胱氨酸,增加了3个保守的半胱氨酸,属于Plus-C OBP。将得到的BtabOBP2和BtabOBP4重组到原核表达载体pET30a(+),转化入BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞,用IPTG诱导融合蛋白表达。采用亲和层析和凝胶过滤层析纯化融合蛋白,并进行Western blot分析。结果显示,BtabOBP2和BtabOBP4融合蛋白在大肠杆菌中均有可溶性表达,Western blot结果证实所表达的融合蛋白确实为目的蛋白。BtabOBP2融合蛋白在SDS-PAGE中的表观分子量比预测的分子量大了6.53 k Da,用重组肠激酶切掉6×His标签后,目的蛋白的表观分子量与预测分子量相近,偏差降低,说明6×His标签是造成融合蛋白表观分子量偏差的原因。本研究明确了烟粉虱气味结合蛋白基因BtabOBP2和BtabOBP4的核苷酸、氨基酸序列特征,并成功进行了原核表达和纯化,为进一步研究这两个OBP基因的分子结构和功能奠定了基础。
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利用16S rDNA克隆文库研究猪场污水微藻净化后菌群的变化
《山东农业科学 》 2017
摘要：为促进猪场污水治理,研究微藻净化对猪场污水菌群的影响,将小球藻接种于含60%沼液与40%水的猪场污水进行批式模式培养,循环三次后将小球藻液离心,检测猪场污水、小球藻液以及离心后上清液中的水质指标及菌群变化情况。菌群采用16S rDNA克隆文库方法检测。结果显示,和猪场污水相比,小球藻液及上清液中的化学耗氧量(COD)、总氮、氨氮、总磷、铜、锌等含量极显著降低(P<0.01)。除未知菌群外,猪场污水中的主要菌群为Firmicutes群和Bellilinea群,含量分别为12.25%和11.22%;小球藻液中主要菌群为小球藻和Cytophaga群,含量分别为42.42%和12.12%;上清液中的主要菌群为Dyadobacter、Cytophaga、Algoriphagus群和Pedobacter群,含量分别为25.00%、14.00%、11.00%和10.00%。猪场污水和小球藻液中未发现共存的微生物,小球藻液与上清液中皆含有Cytophaga群和Dyadobacter、Pseudomonas、Flavobacterium、Algoriphagus、Flexibacter群。表明接种小球藻可以净化猪场污水中的氨氮、总磷以及重金属,改变污水中的菌群,污水净化可能是小球藻和其共存菌共同作用的结果。
关键词： 小球藻 猪场污水 16S rDNA克隆文库 净化 菌群
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乳铁蛋白分离纯化技术研究进展
《中国乳品工业 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：对乳铁蛋白的分离纯化方法进行了归纳和总结,并介绍了近年来涌现出来的新技术、新方法,以期为低成本、高效率的乳铁蛋白工业化生产工艺开发提供参考。
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高F值玉米寡肽-锌螯合物的纯化及结构解析
《泰山学院学报 》 2017
摘要：研究高F值玉米寡肽-锌螯合物的分离纯化及结构.利用膜分离系统、葡聚糖凝胶G-15和C-18反相高效液相对高F值玉米寡肽-锌螯合物进行分离纯化,运用紫外吸收光谱、电喷雾电离质谱争红外吸收光谱研究螯合物的结构.紫外全波长扫描结果显示,硫酸锌的最大吸收波长在192nm,高F值玉米寡肤的最大吸收波长在220nm,高F值玉米寡肽-锌螯合物的最大吸收波长在209nm;经过分离纯化高F值玉米寡肽-锌螯合物,得到组分P-Zn3a和P-Zn3b;采用MALDI-TOE/TOF MS/MS对组分进行测序,氨基酸序列为甘氨酸-缬氨酸-亮氨酸(异亮氨酸)(Gly-Val-Leu(Ⅱe))和甲硫氨酸-亮氨酸(异亮氨酸)(MetLeu(Ⅱe));红外光谱结构表征显示玉米寡肽与锌离子螯合机制为:与Zn~+发生螯合的位置可能是-NH-C=O上的-NH,-COOH上的-OH和末端-NH2.由此可初步推断,高F值玉米寡肽与锌发生了螯合并产生了一种新型的螯合物.
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