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山东省副猪嗜血杆菌分子流行病学调查及其外膜蛋白P2基因的表达纯化

文献类型: 中文期刊

作者: 杨杰 1 ; 李建达 1 ; 曾昊 1 ; 任素芳 1 ; 郭立辉 1 ; 孙文博 1 ; 陈智 1 ; 丛晓燕 1 ; 于江 1 ; 吴家强 1 ;

作者机构: 1.山东省农业科学院畜牧兽医研究所;山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室;山东师范大学生命科学学院

关键词: 副猪嗜血杆菌;流行病学;ompP2基因;表达;纯化

期刊名称: 中国动物传染病学报

ISSN: 1674-6422

年卷期: 2018 年 05 期

页码: 40-47

收录情况: 北大核心

摘要: 根据副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)外膜蛋白(outer membrane proteins,Omp)P2基因序列(GenBank登录号:FJ685754.1)设计引物,对2015~2016年在山东省不同地区采集的225份病料进行PCR扩增和遗传演化分析,结果发现2015年和2016年Hps检出阳性率分别为7.63%、7.48%,细菌分离确定225份样品中17份为阳性;Hps菌株之间的氨基酸同源性在86.7%~99.7%,同源性较高的蛋白具有交叉反应性。构建Hps omp P2基因原核表达载体,确定OmpP2蛋白的最佳诱导温度,通过亲和层析Ni-IDA树脂纯化,获得高纯度的OmpP2蛋白,Western blot确定纯化的OmpP2蛋白与不同血清型的Hps阳性血清均存在良好的反应原性。本研究为进一步探索Hps OmpP2的生物学特性及对副猪嗜血杆菌病的血清学诊断、亚单位疫苗的开发奠定了基础。

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