科研产出
洋葱粗多糖的纯化工艺研究
《食品工业 》 2015 北大核心
摘要：为探究洋葱多糖纯化的最佳工艺条件,在选择了Sevag法去蛋白及透析去离子工艺后,重点对大孔树脂AB-8脱除洋葱多糖色素的工艺进行了研究。试验结果表明,在静态吸附动力学过程中,在树脂用量为2 g/20 m L提取液,吸附时间为2 h的最佳工艺条件下,大孔树脂吸附洋葱多糖溶液的多糖保留率和色素的清除率均达到80%左右;在动态动力学吸附过程,在上柱液p H 5.0、温度40℃、多糖质量浓度3 000 mg/L的最佳工艺条件下时洋葱多糖提取液的多糖保留率为85%左右,色素脱除率为83%左右。洋葱粗多糖经过Sevag法脱蛋白,大孔树脂脱除多糖色素,透析去离子等纯化工艺后,最终多糖纯度可以达到89.2%左右。
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新型免疫佐剂环二鸟苷酸的制备与纯化
《细胞与分子免疫学杂志 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：目的制备新型免疫佐剂环二鸟苷酸(c-di-GMP)并进行纯化。方法利用前期重组构建并在大肠杆菌中成功表达的霍乱弧菌VCA0956蛋白(含有GGDEF结构域)作为合成酶,在反应体系中采用酶促反应将2分子鸟苷酸GTP催化缩合成一分子c-di-GMP。利用反相液相色谱仪分离纯化粗产物中的c-di-GMP,柱温25℃,流动相为乙腈-10 mmol/L乙酸铵溶液(体积比为5∶95逐渐变为30∶70),流速1 m L/min。结果 c-di-GMP从反应粗产物中被有效的分离纯化,同时,经质谱分析仪分析鉴定,获得高纯度的c-di-GMP。结论成功从酶促反应体系中分离并纯化了c-di-GMP。
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超声联合超微粉碎法提取金针菇多糖新探究
《食品工业 》 2014 北大核心
摘要：为提高金针菇多糖的提取率,采用超微粉碎技术处理金针菇原料,在单因素试验的基础上,选取超微粉碎粒度、超声功率、超声时间进行Box-Behnken中心组合设计,以金针菇多糖提取率为响应值。通过响应面优化,得到最优工艺为:超微粉碎粒度395.71目、超声功率380.03 W、超声时间24.56 min,该试验条件下金针菇多糖提取率为20.76%,经修正后在超微粉碎粒度400目、超声功率380 W、超声时间25 min条件下进行验证,实际提取率为20.52%,实际值接近理论预测值,表明超声联合超微粉碎可以显著提高金针菇多糖的提取率。
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响应面法优化超声波提取蓝莓多酚工艺
《南方农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：【目的】对超声波提取蓝莓工艺进行优化,为其商业化生产提供技术支持。【方法】以蓝莓冻干粉为试验原料,在单因素试验基础上选择乙醇浓度、料液比、超声时间等3个因素进行响应面设计,采用Box-Behnken中心组合试验设计和响应面分析法,建立以蓝莓多酚含量为响应值的二次回归方程。【结果】通过响应面分析建立蓝莓多酚超声萃取回归方程为:y=10.88-0.15x1+0.042x2+0.055x3-0.27x1x2-0.15x1x3-0.090x2x3-0.56x12-0.35x22-0.15x32(x1为乙醇浓度,x2为料液比,x3为超声时间,y为蓝莓多酚萃取率,R2=0.9692),该模型拟合度好;并确定蓝莓多酚萃取的影响因素顺序为:x1>x3>x2;最佳提取工艺条件为:提取次数两次、超声功率400 W、乙醇浓度55%、料液比1∶25、超声时间1.5 h,在此条件下蓝莓多酚含量为11.05 mg/g。【结论】研究建立的模型适合蓝莓多酚超声波提取,可用于实际生产。
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人工湿地植物净化生活污水效果研究
《北方园艺 》 2014 北大核心
摘要：通过模拟垂直流人工湿地污水系统,研究了湿地植物鸢尾(Iris pseudacorus)、菖蒲(Acorus calamus)、茭白(Zizania aquatica)和芦苇(Phragmites australis)对生活污水总氮(TN)、总磷(TP)、氨氮(NH4+-N)、硝氮(NO2--N)、生物耗氧量(BOD5)和化学耗氧量(CODCr)的去除效果。结果表明:4种植物对各种污染物的净化效果存在一定的差异,其净化效果基本表现为鸢尾>菖蒲>芦苇>茭白;4种植物对BOD5、CODCr、TP和TN的去除效果明显高于对NH4+-N和NO2--N的去除效果,鸢尾、菖蒲和芦苇对BOD5、CODCr、TP、TN、NH4+-N和NO2--N去除率明显高于茭白;各种植物的总生物量为555.7~1 899.1g/m2,除了鸢尾地上地下生物量比(A/U)小于1,其它比值均大于1;4种植物地上部分N和P的浓度高于地下部分,平均N、P积累量分别为11.38g/m2和0.98g/m2,地上部分N、P平均积累量分别占61.31%和73.13%。相关性分析表明,湿地植物N、P积累量与浓度和生物量均存在显著线性关系(P<0.05),生物量可作为筛选适合人工湿地植物的指标。
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乌骨鸡Cathelicidins类抗菌肽基因在大肠杆菌中的融合表达与抑菌活性
《浙江农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：Cathelicidins抗菌肽是含高度保守cathelin结构域的一大类抗菌肽,在家禽天然免疫系统中发挥重要作用。通过PCR方法,从含乌骨鸡Cathelicidins抗菌肽基因(CathL-1,-2,-3)cDNA完整序列的质粒pMDCathL中分别扩增Cathelicidins-1,-2,-3成熟肽的编码序列,将其分别克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,构建其重组表达质粒pET30-CathL1S,pET30-CathL2S,pET30-CathL3S,经测序验证的重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株。阳性克隆菌株在37℃,1.0 mmol·L-1IPTG的条件下进行诱导表达。SDS-PAGE和Western-blot分析表明,Cathelicidins成熟肽片段均在大肠杆菌中以融合形式成功表达,表达产物的表观分子量分别为7.0,8.0,7.5 kD。琼脂糖孔穴扩散法检测显示表达产物对多种革兰氏阴性菌和阳性菌均具有很好的抑制活性,其对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、藤黄微球菌(Micrococcus luteus)、大肠杆菌(Escherichia coli)、鸡白痢沙门氏菌C79-13(Salmonella pullorum)、巴氏杆菌、鸭疫里默氏杆菌、绿脓杆菌等供试菌株均有较强的抑制作用,尤其对抗生素耐药菌株有明显的抑制作用。
关键词： 乌骨鸡 Cathelicidins抗菌肽 融合表达 分离纯化 抑菌活性
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降解羽毛的嗜麦芽窄食单胞菌YJ-1角蛋白酶纯化及酶学性质研究
《西南农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：利用硫酸铵分级沉淀和交联葡聚糖G-100凝胶柱纯化了高效降解羽毛的嗜麦芽窄食单胞菌YHYJ-1所产角蛋白酶,纯化的角蛋白酶,经SDS-PAGE蛋白电泳分析,分子量为48.3 kda。结果表明,该酶最适反应温度和最适pH值分别为50℃和9.0,30～40℃具有较好的温度稳定性,60℃酶活下降很快;在pH 7.0～9.5的范围内具有较好的稳定性。金属离子Ni2+、Zn2+对角蛋白酶具有明显抑制作用,Cu2+、Fe2+、Fe3+能完全抑制酶活;1%巯基乙醇对酶具有明显激活作用。EDTA和PMSF对该角蛋白酶几乎完全抑制,可判定该酶是丝氨酸金属蛋白酶,是一种新的蛋白酶。
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