科研产出
超声波辅助酸提法提取桃子中的果胶及性质研究
《食品工业 》 2019 北大核心
摘要：以桃子为原料,采用超声波辅助酸提法提取果胶,分别探讨了料液比、pH、提取温度、提取时间等因素对桃子中果胶提取的影响,并对提取的果胶进行理化性质的测定及组分的研究。在单因素的基础上,通过正交试验得到的最佳参数组合为料液比1∶20 g/mL、pH 2.0、提取温度80℃、提取时间120 min、浓缩比1/3,在此条件下,果胶提取率为7.28%,半乳糖醛酸含量为71.62%,酯化度为33.33%。高效液相色谱法检测到果胶中共含有10种单糖成分,主要成分是阿拉伯糖、半乳糖和半乳糖醛酸,其中阿拉伯糖的含量最高,占43.35%,且初步判定果胶为RG-Ⅰ型。
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口蹄疫病毒3C蛋白多克隆抗体的制备与鉴定
《畜牧与兽医 》 2019 北大核心
摘要：扩增口蹄疫病毒(FMDV) 3C蛋白编码基因,将其克隆到原核表达载体,并转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达; 3C重组蛋白纯化后免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,通过ELISA和Western blot检测多克隆抗体的效价和特异性,并将该抗体通过间接免疫荧光(IFA)和Western blot应用于3C的检测。ELISA结果显示,制备的3C蛋白多克隆抗体效价达1∶256 000; IFA结果显示,该抗体能够检测到3C蛋白在细胞中的定位; Western blot结果显示,该多克隆抗体能够检测到在细胞中过表达的3C蛋白。本研究制备的FMDV 3C蛋白多克隆抗体为FMDV及其3C蛋白的相关研究提供了重要的物质基础。
关键词： FMDV 3C蛋白 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体
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副猪嗜血杆菌脂多糖的提取、鉴定及初步应用
《中国动物检疫 》 2018
摘要：为建立一种有效提取高纯度副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)的方法,进一步阐明HPS的致病机制,通过热酚水法提取LPS,浓缩后,采用酶解法和超离法纯化提取物,分别用硫酸-苯酚法、BCA法、紫外分光光度法,测定LPS提取物中多糖、蛋白及核酸的含量,通过SDSPAGE电泳银染方法鉴定提取物。将提取的LPS作用于猪肺泡巨噬细胞,通过荧光定量方法检测IL-1β的表达量差异。结果显示:纯化的LPS平均产率为2.56%;LPS提取物中不含还原性单糖,多糖含量为3.27%,蛋白含量为0.77%,核酸含量为0.90%;提取的LPS能够引起猪肺泡巨噬细胞IL-1β表达量显著上调。因此,通过该方法提取纯化的LPS可以用于HPS与宿主细胞间作用机制的研究。
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山东省副猪嗜血杆菌分子流行病学调查及其外膜蛋白P2基因的表达纯化
《中国动物传染病学报 》 2018
摘要：根据副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)外膜蛋白(outer membrane proteins,Omp)P2基因序列(GenBank登录号:FJ685754.1)设计引物,对2015~2016年在山东省不同地区采集的225份病料进行PCR扩增和遗传演化分析,结果发现2015年和2016年Hps检出阳性率分别为7.63%、7.48%,细菌分离确定225份样品中17份为阳性;Hps菌株之间的氨基酸同源性在86.7%~99.7%,同源性较高的蛋白具有交叉反应性.构建Hps ompP2基因原核表达载体,确定OmpP2蛋白的最佳诱导温度,通过亲和层析Ni-IDA树脂纯化,获得高纯度的OmpP2蛋白,Western blot确定纯化的OmpP2蛋白与不同血清型的Hps阳性血清均存在良好的反应原性.本研究为进一步探索Hps OmpP2的生物学特性及对副猪嗜血杆菌病的血清学诊断、亚单位疫苗的开发奠定了基础.
关键词： 副猪嗜血杆菌 流行病学 ompP2基因 表达 纯化
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栀子黄色素提取精制工艺的优化
《山东农业科学 》 2018
摘要：桅子是一种具有重要药理作用的常用传统中药,并被卫计委列为首批既是食品又是药品中药名录。桅子中黄色素含量较高,水溶性好,无毒性,国内外已将其广泛应用为食品添加剂和工业染料,但目前桅子黄生产工艺复杂,产品得率和色价均比较低。为综合开发高品质的栀子黄色素,本研究采用单因素及正交试验确定了栀子黄色素的最佳浸提条件:提取时间3 h,提取温度50℃,料液比1∶8;通过考察5种不同类型大孔树脂对桅子黄色素的静态吸附性能,最终确定HP2MGL为最佳精制材料,采用梯度洗脱法定量洗脱,最终产品色价由最初的68.79增至340.00,得率为2.2%,达到了精制的目的。该研究为工业化提取和精制桅子黄色素提供了理论基础。
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产壳聚糖酶菌株ncps116发酵条件优化及其酶学性质
《化工进展 》 2018 EI 北大核心 CSCD
摘要：通过形态学观察、生理生化实验及16S r DNA序列分析鉴定产壳聚糖酶菌株ncps116为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)。通过单因素和正交实验对该菌株发酵产酶条件进行了优化。结果表明其最适产酶条件为:粉末壳聚糖15g/L,硫酸铵30g/L,初始p H 6.0,温度32℃,发酵时间72h,500m L三角瓶装液量120m L,接种量4%,在此条件下该菌株产壳聚糖酶活力达43.89U/m L。经硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析对菌株发酵液中的壳聚糖酶进行了纯化,并对其酶学性质进行了初步研究。结果表明,壳聚糖酶经SDS-PAGE分析,其分子量为4.37万。该酶酶促反应最适p H和最适反应温度分别为5.6和50℃,在低于40℃、p H 3.6~5.6范围内较为稳定,5mmol/L的Mn~(2+)对该酶酶活力有明显的增强作用,Cu~(2+)、Ni~(2+)、Fe~(3+)、Ag~+对该酶酶活力有不同程度的抑制作用。壳聚糖酶酶促反应的米氏常数(K_m)为11.10mg/m L,最大反应速率(V_(max))为1.38μmol/(min·m L),对底物表现出较强的专一性。此外,该酶能够抑制黑曲霉(Aspergillus niger)菌丝的生长。
关键词： 壳聚糖酶 发酵条件优化 分离纯化 酶学性质 蜡状芽孢杆菌
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调配白兰地的关键技术与工艺优化
《中外葡萄与葡萄酒 》 2018
摘要：本文介绍了调配白兰地的关键技术及工艺优化处理。首先对糖蜜酒精、玉米酒精和木薯酒精三种食品级酒精进行净化处理,然后与葡萄蒸馏酒精混合,再加入橡木浸提液、白兰地香精等制成调配白兰地。结果发现,玉米酒精的酒精度降至60%vol,用0.1%活性炭处理后调配的白兰地效果最好,产品酒质纯净、柔顺;糖蜜酒精次之,而木薯酒精表现较差。对比不同香料组合和橡木片浸提液用量发现,以金牌马爹利白兰地、轩诗尼干邑白兰地和人头马标准白兰地香料组合较好,橡木片适宜用量为0.4%,以此工艺研发出的调配白兰地表现香气细腻、协调,酒体较醇和,口味甘冽,风格独特。
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水稻类受体蛋白激酶FTPK1的原核表达及其活性检测
《山东农业科学 》 2018
摘要：类受体蛋白激酶(receptor-like kinase,RLKs)是植物信号分子的受体,它能够通过胞内激酶域对底物进行磷酸化或去磷酸化,从而对下游靶基因的转录及表达进行调控,参与胞内信号转导,在植物生长发育及环境应答过程中发挥作用。本研究以水稻"中花11"cDNA为模板,通过PCR技术获得类受体蛋白激酶基因FTPK1的全长序列,进一步构建原核表达载体p ET-28a-FTPK1后,经1 mmol/L IPTG诱导12 h,获得88k D的诱导表达蛋白条带,显示FTPK1可在大肠杆菌中诱导表达。表达产物经Ni柱纯化及透析后,获得纯化的融合蛋白。FTPK1激酶活力检测显示,其可磷酸化蛋白底物His和MBP,具有一定的磷酸化活性。本研究为进一步制备FTPK1特异性抗体,深入解析其理化特性及生物学功能奠定了基础。
关键词： 水稻 类受体蛋白激酶 FTPK1 原核表达 蛋白纯化 激酶活力检测
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