科研产出
羊栖菜多糖抗A型塞内卡病毒感染PK-15细胞活性和机制探究
《山东农业科学 》 2024
摘要：研究羊栖菜多糖抗A型塞内卡病毒（Senecavirus A,SVA）感染PK-15细胞的活性及机制。首先采用水提法提取羊栖菜粗多糖，然后用不同孔径超滤膜将粗多糖分为不同分子量段；通过荧光定量PCR测定不同分子量粗多糖抗SVA活性，采用水提醇沉法将抗SVA活性最高分子量段的粗多糖进行纯化并测定其细胞毒性及抗SVA活性；通过在SVA感染周期不同阶段给药研究纯化多糖的抗SVA机制。结果表明，分子量越大的粗多糖抗SVA活性越强；多糖浓度和SVA浓度均与抗SVA活性呈现量效关系，纯化后的多糖对SVA（MOI=0.1）感染PK-15细胞的治疗指数为412,1 mg/mL的多糖对SVA(MOI=10-1～10~4)感染PK-15细胞病毒载量的抑制率在90%～99.999%之间；不同给药时间试验结果表明，多糖能在SVA吸附或穿入细胞以及病毒复制过程发挥抗病毒作用，其中抑制SVA吸附或穿入的活性最强。本研究分离纯化得到的羊栖菜多糖有很强的抗SVA活性，可为后续抗SVA药物的研发提供参考。
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不同盐度和氮磷浓度条件下海马齿对水体氮磷的吸收效果及其生长响应
《海洋湖沼通报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：耐盐植物在海水养殖尾水处理和海水农业中具有重要作用。为了探究海马齿的耐盐能力和氮磷净化能力，本研究开展了海马齿盐度和氮磷处理的室内水培实验。盐度实验分别在盐度为0、10、20、30和35的霍格兰营养液中进行，氮磷实验分别在N:0（P:0.5）mg/L、N:1（P:0.1）mg/L、N:5（P:0.5）mg/L、N:20（P:2）mg/L和N:50（P:5）mg/L的人工海水中培养，周期为20 d。结果显示：1)在中、低盐度（0～20）条件下，海马齿对氮、磷的吸收效果明显，而在高盐度（30～35）条件下，其对氮磷的吸收作用明显弱于中低盐度组（P＜0.05）。2)海马齿Na+含量随盐度的升高而不断增加，而K+含量则随着盐度的增加呈现下降的趋势；氮磷浓度对海马齿Na+、K+含量的影响不明显。3)在氮磷实验浓度范围内，海马齿都能正常生长并显示了较高的氮磷吸收能力，明显降低了水体中的氮磷浓度。表明海马齿有较强的耐盐能力，并能有效净化富营养化水体，可用于海水养殖尾水净化，改善养殖环境。
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玫瑰花渣中黄酮的提取与纯化工艺研究
《中国果菜 》 2024
摘要：玫瑰花含有多糖、黄酮、花青素等多种生物活性物质,应用价值高.本研究以提取精油后的玫瑰花渣为原料,研究玫瑰花渣中黄酮的提取、纯化工艺.结果表明,玫瑰花渣中黄酮最佳提取工艺为乙醇浓度70%、料液比1∶20,提取温度75 ℃,提取时间2 h,在该工艺条件下,提取液中黄酮的提取率为49.75%;最适合玫瑰黄酮纯化的树脂为AB-8树脂,优化了吸附和解吸工艺,吸附时进样流速为3 BV/h,进样浓度为3 mg/mL,水洗体积为3 BV;解吸剂为60%乙醇,解吸流速为2 BV/h,解吸液浓缩干燥后黄酮纯度达80%以上.
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基于干种子DNA的洋葱杂交种纯度分子标记快速鉴定
《山东农业科学 》 2023 北大核心
摘要：为了寻找一种从洋葱种子中快速提取高质量DNA的方法,并能满足大量准确鉴定洋葱杂交种纯度的要求,本研究首先对全式金PlantZol试剂盒、天根快捷型植物基因组DNA提取系统、TPS法和CTAB法提取的洋葱种子DNA质量进行比较,筛选出最佳提取方法,并对不同发芽天数的种子及提取有效DNA的种子数量进行优化筛选,然后利用SCAR分子标记对洋葱杂交种的纯度进行鉴定,进一步验证洋葱种子DNA的提取质量.结果表明,天根快捷型植物基因组DNA提取系统未能成功得到洋葱干种子基因组总DNA;CTAB法提取的基因组总DNA带型整齐一致、单一明亮,条带无拖尾和降解现象,也没有明显的RNA和蛋白污染;洋葱干种子以 1粒和发芽3d提取的DNA更加完整,纯度更高.以CTAB法提取的1粒洋葱干种子基因组总DNA为模板,对杂交种Ms位点的基因型进行SCAR标记鉴定,PCR扩增条带清晰明亮,根据条带的迁移位置可以清楚区分洋葱不同细胞核基因型之间的差异.综上,本研究确定了CTAB法为洋葱干种子基因组总DNA提取的最佳方法,1 粒洋葱干种子获得的有效DNA完全可以满足杂交种分子标记鉴定的要求,实现洋葱杂交种纯度的早期鉴定.
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DSC法测定四氯虫酰胺的含量
《农药 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：[目的]采用DSC法,建立快速简便测定四氯虫酰胺含量的方法.[方法]利用差式扫描量热仪DSC3,以1.0℃/min的升温速率,扫描区间170~220℃,气氛为氮气,干燥气体流速为50 mL/min.[结果]DSC法测定四氯虫酰胺的纯度与液相色谱法测定值相近,测得四氯虫酰胺标样的含量分别为99.79%(DSC)和99.66%(HPLC).[结论]差示扫描量热法可用于四氯虫酰胺的含量测定,该方法具有快速、简便、准确的优点.
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超临界CO2萃取制备腰果仁油工艺优化及其脂肪酸成分分析
《食品研究与开发 》 2023 北大核心
摘要：以腰果仁为原料,采用超临界CO2萃取技术萃取腰果仁油,研究萃取温度、萃取压强、萃取时间、C02流量对腰果仁油得率的影响,通过响应面法优化最佳提取工艺条件,采用气相色谱甲酯法对腰果仁油的脂肪酸成分进行分析.结果表明,超临界CO2萃取腰果仁油的最佳条件为萃取温度45℃、萃取压强40 MPa、CO2流量4.2 L/min、萃取时间1.6h,该条件下腰果仁油得率为46.41%,与模型预测结果接近.气相色谱甲酯法对脂肪酸成分分析表明,腰果仁油含有12种脂肪酸成分,其中含量较高的4种脂肪酸成分分别为油酸58.42%、亚油酸18.75%、棕榈酸11.160%、硬脂酸9.890%,不饱和脂肪酸含量达78.21%.
关键词： 腰果仁 超临界CO2萃取 腰果仁油 提取 脂肪酸成分
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辣椒油树脂的纯化工艺及成分分析
《山东农业科学 》 2022 北大核心
摘要：以辣椒品种H21为原料,提取辣椒油树脂粗品并进行纯化,通过单因素试验探究95%食用乙醇用量、萃取温度和萃取次数对纯化结果的影响,并通过正交法优化纯化工艺参数.结果表明,辣椒油树脂的最佳纯化工艺为:萃取温度50℃、95%食用乙醇用量(料液比)1:3、萃取3次;纯化辣椒油树脂得率为85.75%,辣椒素含量为39.9147 g/kg,产品颜色较浅、透亮,流动性好.纯化前后辣椒油树脂成分及理化指标对比分析表明,纯化后的辣椒油树脂不饱和脂肪酸含量增高,色价为43±1.24,总酚含量14.84±0.38 mg/g,过氧化值0.96 g/kg,皂化值180.79±1.35 mg/g,酸价1.81±0.04 mg/g,碘价1270±14.3 g/kg,均符合食品安全国家标准.本研究结果为辣椒及辣椒油树脂的综合利用奠定了基础.
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口蹄疫病毒3B蛋白的表达纯化及其多克隆抗体的制备
《畜牧与兽医 》 2021 北大核心
摘要：为了深入研究口蹄疫病毒3B蛋白的结构及功能,本研究原核表达了3B蛋白并制备了针对3B蛋白的多克隆抗体。试验采用PCR方法扩增了口蹄疫病毒3B蛋白基因,并将其克隆到pET28a载体上,构建了重组质粒pET28a-3B,将其转化到大肠杆菌BL21感受态细胞中进行诱导表达。经过Ni-NTA琼脂糖亲和层析法初步纯化及Millipore超滤浓缩进一步纯化,将其免疫试验动物新西兰大白兔后制备出了抗3B蛋白的多克隆抗体。通过ELISA检测了该多抗的效价,Western blot试验检测了其反应性,通过间接免疫荧光（IFA）和Western blot试验检测了该多抗的应用性。结果表明:该抗体的效价为1∶512 000,反应性良好;IFA试验和Western blot试验中可以检测到过表达后定位于细胞核和细胞质中的3B蛋白,也可以检测到在真核细胞中过表达的3B蛋白。说明本研究制备的口蹄疫病毒3B蛋白多克隆抗体可以作为开展该病毒相关研究的重要材料。
关键词： 口蹄疫病毒 3B蛋白 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体
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小麦TaSIM蛋白的原核表达与纯化及Western blotting检测
《分子植物育种 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为了获得TaSIM （Salinity-induced R2R3-MYB）基因的纯化蛋白,以便研究TaSIM转录因子的DNA结合特异性。本研究以含有pET28a-TaSIM原核表达载体的大肠杆菌BL21为材料,用0.5 mmol/L IPTG,在37℃诱导TaSIM融合蛋白表达2 h,收集上清液,采用Ni-NTA柱纯化含有His标签的TaSIM融合蛋白,SDS-PAGE电泳检测结果表明获得了分子量大小约为33 kD的TaSIM融合蛋白。采用Western blotting检测TaSIM融合蛋白的表达,以鼠抗血清和辣根过氧化酶标记的山羊抗小鼠Ig G为抗体,结果表明TaSIM融合蛋白能够和抗体特异结合,说明诱导的蛋白是TaSIM融合蛋白。研究结果为进一步利用凝胶阻滞方法检验TaSIM蛋白与顺式作用元件的结合提供实验基础。
关键词： 小麦（Triticum aestivum） TaSIM 蛋白纯化 Western杂交
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