科研产出
洋葱种子消毒和无菌苗培养新方法
《生物技术通报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为了获得简便、高效、低污染的洋葱种子消毒及无菌苗培养方法，通过控制植物组培抗菌剂（PPM）的pH值、消毒浸泡时间及培养浓度，对洋葱种子消毒及无菌苗培养进行研究。结果表明，PPM（20 mL/L,pH 2）浸种24-48 h消毒效果可以达到10%NaClO消毒10 min水平，且不影响种子发芽，8 d发芽势超过90%。污染微生物分析鉴定了4种真菌（Alternaria alternata、Fusarium proliferatum、Fusarium oxysporum、Stemphylium vesicarium）和2种细菌（Phytobacter diazotrophicus、Atlantibacter hermannii）可以通过洋葱种子进行传播，抑菌试验明确了PPM可有效的抑制污染微生物的生长。培养基中添加PPM可以有效的降低污染率，高浓度PPM（1-9 mL/L）可以抑制洋葱幼苗的生长，而低浓度PPM（0-0.5 mL/L）对洋葱幼苗生长无明显抑制作用。探索开发了一套操作简便无需繁琐冲洗的洋葱种子消毒以及高发芽率、低污染率无菌苗培养方法。
关键词： 洋葱 种子 消毒 无菌苗 植物组培抗菌剂（PPM）
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洋葱黄酮醇合成酶基因的克隆与表达分析
《山东农业科学 》 2022 北大核心
摘要：黄酮醇合成酶(flavonol synthase,FLS)是植物黄酮醇生物合成途径中的关键酶.本研究克隆了洋葱黄酮醇合成酶基因AcFLS,其编码序列长度为927 bp,编码309个氨基酸.AcFLS蛋白为亲水性胞质不稳定蛋白,二级结构以无规则卷曲和α-螺旋为主,属于α-同戊二酸和二价铁离子依赖型加氧酶家族.AcFLS的氨基酸序列与洋葱、虎眼万年青、石刁柏FLs蛋白的同源性分别为91.34%、76.42%、74.63%.实时定量PCR结果显示,AcFLS基因在洋葱中的表达具有组织特异性,表现为叶鞘中表达量最高,叶片次之,根中极少表达;在鳞茎膨大过程中AcFLS基因的表达量呈先升高后降低的趋势,在膨大盛期达到最高值;但AcFLS基因在紫皮、黄皮洋葱中的表达水平并无显著差异.该研究为进一步探明洋葱鳞茎颜色产生的机理奠定了基础.
关键词： 洋葱 黄酮醇合成酶 基因克隆 生物信息学分析 表达分析
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洋葱鳞茎颜色遗传与分子调控机制研究进展
《山东农业科学 》 2021
摘要：洋葱鳞茎是一种具有不同皮色的营养器官,是人类摄取类黄酮的重要食物来源之一。鳞茎颜色是洋葱育种的重要农艺性状,类黄酮化合物的种类和积累水平导致洋葱鳞茎形成了多种颜色表型。类黄酮化合物是植物的次生代谢产物,在植物体内具有重要生理学意义,具有广泛的生物活性和重要的药用价值。洋葱类黄酮生物合成途径的相关结构基因及其调控基因已经逐步被揭示,本文基于此对洋葱鳞茎颜色的遗传模式、类黄酮生物合成途径的重要结构基因和调控基因及相关的分子标记进行概述,为洋葱鳞茎颜色遗传与分子调控机制的深入研究提供参考。
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洋葱雄性不育恢复位点Ms座位的SSR标记开发及其应用
《中国农学通报 》 2020
摘要：本研究旨在开发稳定可靠的洋葱育性位点分子标记,并将其应用于育种实践,筛选育种系,从而缩短育种周期,节省育种成本,加速洋葱杂交种的培育进程。以洋葱育性恢复Ms座位的AFLP序列为基础,采用序列比对分析、PCR检测和表型分析等方法,开发、鉴定、应用了WH-SSR-1分子标记。结果表明:WH-SSR-1标记与Ms位点紧密连锁,Ms位点基因型为纯合显性MsMs时,有1条102 bp的扩增带;纯合隐性msms时,有1条99 bp的扩增带;杂合Msms时,有102 bp和99 bp两条扩增带。32份洋葱材料的验证结果证实了Ms座位的标记类型与基因型完全相符。随后从4个OP群体中直接获得了2个配套的不育系与保持系,‘吊玉’和‘天正红玉’因未检测到保持株或不育株,无法简单实现配套。WH-SSR-1标记与Ms位点紧密连锁,能够将其用于育种系筛选的育种实践,从OP群体中直接选择保持株和不育株,同时实现两系配套。
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洋葱通用型愈伤组织诱导的建立
《中国农学通报 》 2020 CSCD
摘要：为研究洋葱愈伤诱导体系建立问题,对洋葱种子幼苗、鳞茎盘、幼嫩花序不同组织进行愈伤诱导,同时对愈伤组织进行继代培养和发芽诱导筛选.结果表明,12份洋葱种子材料未诱导出愈伤组织,12份洋葱球的鳞茎盘只有'早春黄3号(不育系)'诱导出愈伤组织;22份洋葱花序在黑暗条件进行愈伤诱导,诱导率为100%,说明洋葱不同组织对愈伤的诱导发生存在差异,洋葱幼嫩花序培养基诱导率100%,说明洋葱最佳诱导愈伤的组织为幼嫩花序.对不同材料愈伤进行继代培养,'早春黄3号(不育系)'和'黄金大玉葱'愈伤生长最快;利用液体培养基进行继代培养,能够快速、高效扩繁愈伤组织.选用27份不同梯度组合的培养基对愈伤组织进行出苗诱导,在光照条件下,开始会有绿色组织形成,全部诱导出根,均未诱导出苗.石蜡切片观察外植体诱导愈伤和继代培养愈伤无差异,再生培养基诱导后有根形态形成.说明不同成分的培养基诱导洋葱愈伤组织,其内部促进生根的激素增加,导致根的诱导发生.通用型洋葱愈伤组织的诱导形成,为不同基因型的洋葱诱导出苗、生根奠定材料基础,对洋葱基因编辑等技术应用具有促进作用.
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洋葱雄性不育分子标记在单倍体鉴定中的应用
《生物技术通报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为有效鉴定和利用洋葱单倍体,以3个洋葱杂交种的未受精花蕾为外植体,通过离体雌核发育途径诱导产生再生植株.利用流式细胞仪对再生植株的倍性进行鉴定,利用DNF-566、RNS-357和AcSKP1标记对再生植株进行纯合性检测.结果表明,源于"阿盾"和"地球"的再生植株在Ms位点的基因型均为纯合的.源于"大宝"的16株再生植株中,有13株在Ms位点的基因型是纯合的,3株是杂合的.说明纯合植株是由大孢子母细胞发育而来,杂合植株可能是由子房壁或其他体细胞发育而来的二倍体.共获得7株二倍体,其中4株为双单倍体.获得的双单倍体,可进一步作为杂交种选育的亲本材料.洋葱Ms位点的分子标记可以作为一种有效的分子标记手段用于洋葱单倍体再生植株与供体杂交种亲本的同源性分析,与流式细胞仪结合起来可以快速准确鉴定双单倍体.
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洋葱S型细胞质雄性不育相关基因的挖掘及分子标记开发
《园艺学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：以洋葱(Allium cepa L.)S型细胞质雄性不育系和保持系材料为试材,对洋葱线粒体全基因组中的58个开放阅读框(ORF)进行差异表达分析,发现了一个表达差异片段orf393。采用实时荧光定量PCR技术,利用洋葱S型细胞质雄性不育系和保持系的根,叶片,花茎以及花粉母细胞、四分体、单核花粉粒、成熟花粉粒等4个发育时期的花蕾对orf393进行时空表达分析。结果表明:orf393在洋葱S型细胞质雄性不育系的根、叶片、花茎和4个发育时期的花蕾中均有表达,尤其是在四分体时期花蕾中表达量最高,之后恢复到营养生长时期的表达水平,但在保持系中未见其表达,这表明orf393是组成型表达,可能与洋葱的花粉发育存在某种关联。利用orf393在S型细胞质雄性不育系和保持系之间的序列差异,开发了一个稳定可靠的鉴别洋葱细胞质类型的SCAR分子标记GXX393。
关键词： 洋葱 细胞质雄性不育 orf393 基因表达 分子标记
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洋葱AcPME基因的克隆及序列分析
《山东农业科学 》 2017
摘要：以洋葱花蕾为试材,通过RACE试验获得了Ac PME基因的全长c DNA序列,Gen Bank登录号为JF913196.1。该基因DNA序列包含2 786个碱基,4个外显子,3个内含子,c DNA序列长度为2 228 bp,编码序列长度为2 001 bp,编码666个氨基酸。生物信息学分析显示Ac PME蛋白存在明显的信号肽和跨膜区域(SP/TM)、PMEI结构域和PME结构域,在PME家族分类中属于第Ⅰ类,即含有一个长的N末端前区域(PRO-region)。氨基酸同源比对与系统进化分析表明,Ac PME蛋白与水稻、玉米、高粱等单子叶植物的同源蛋白具有较高的一致性。三维结构模式图显示该蛋白具有一个明显的凹沟,4个果胶结合位点氨基酸残基(T423、Q453、R565和W567),2个活性位点氨基酸残基(D476和D497)。本研究为洋葱Ac PME基因的结构域蛋白互作及功能研究奠定了基础。
关键词： 洋葱 果胶甲酯酶(PME) 克隆 序列分析
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洋葱细胞质雄性不育基因分子标记研究进展
《中国蔬菜 》 2015 北大核心
摘要：洋葱是典型的异花授粉蔬菜作物,利用雄性不育系是进行洋葱杂交种选育的重要手段。传统的测交方法鉴定洋葱雄性不育基因型需要4~8a时间,通过开发洋葱细胞质雄性不育基因分子标记可以大大提高保持系选择效率,有助于揭示雄性不育作用机理。本文介绍了洋葱细胞质雄性不育的几种类型,对控制洋葱育性的细胞质与细胞核基因分子标记的研究进展进行了综述,讨论了分子标记技术的现状及存在的问题,并对应用前景进行了展望。
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洋葱细胞质雄性不育基因分子标记的开发
《山东农业科学 》 2015
摘要：根据细香葱orf A501开发的特异引物,以洋葱细胞质雄性不育系为试材进行PCR扩增,对获得的片段进行回收测序,根据测序结果设计引物进行染色体步移,获得部分侧翼序列,开发了鉴定洋葱细胞质基因型的SCAR标记,命名为OC2175。该标记在洋葱不育系中扩增出一条2 175 bp的特异条带和1 053 bp的条带,而保持系中仅扩增出1 053 bp的条带。对17组不同遗传背景的不育系及其相应的保持系进行验证,该SCAR标记的鉴定结果与田间表型判断结果完全吻合。
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