文献类型： 中文期刊

作者： 辛旭 ¹ ; 吴香菊 ² ; 齐静 ² ; 王永志 ³ ; 李相安 ⁴ ; 杜正国 ⁵ ; 单虎 ¹ ; 杜以军 ² ;

作者机构： 1.青岛农业大学动物医学院

2.山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室

3.济南护理职业学院

4.青岛农业大学海都学院

5.沂水县畜牧局姚店子畜牧兽医工作站

关键词： 口蹄疫病毒;3B蛋白;原核表达;蛋白纯化;多克隆抗体

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN：

年卷期： 2021 年 003 期

页码： 109-114

收录情况： 北大核心

摘要： 为了深入研究口蹄疫病毒3B蛋白的结构及功能,本研究原核表达了3B蛋白并制备了针对3B蛋白的多克隆抗体。试验采用PCR方法扩增了口蹄疫病毒3B蛋白基因,并将其克隆到pET28a载体上,构建了重组质粒pET28a-3B,将其转化到大肠杆菌BL21感受态细胞中进行诱导表达。经过Ni-NTA琼脂糖亲和层析法初步纯化及Millipore超滤浓缩进一步纯化,将其免疫试验动物新西兰大白兔后制备出了抗3B蛋白的多克隆抗体。通过ELISA检测了该多抗的效价,Western blot试验检测了其反应性,通过间接免疫荧光（IFA）和Western blot试验检测了该多抗的应用性。结果表明:该抗体的效价为1∶512 000,反应性良好;IFA试验和Western blot试验中可以检测到过表达后定位于细胞核和细胞质中的3B蛋白,也可以检测到在真核细胞中过表达的3B蛋白。说明本研究制备的口蹄疫病毒3B蛋白多克隆抗体可以作为开展该病毒相关研究的重要材料。