科研产出
鹅源番鸭呼肠孤病毒的分离鉴定
《中国动物传染病学报 》 2023 北大核心
摘要：近几年，鹅“白点病”频发。本研究从江苏沛县地区肝脏有坏死点的发病鹅中收集肝脏病料，进行病毒分离，通过RT-PCR检测、序列分析进行病毒鉴定，并回归雏鹅进行致病性试验。结果发现：该毒株在鹅胚上生长良好；回归鹅能完全复制出临床中肝脏出现坏死点的病变，并能从实验鹅中重新分离到该病毒；对其主要抗原基因σC进行测序比对和进化树分析发现，其与番鸭呼肠孤病毒基因序列的进化关系较近，同源性为89.6～98.9%。本研究证实了鹅“白点病”的病原为番鸭呼肠孤病毒，为该病的防控奠定了基础。
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苹果主要真菌病害广谱拮抗木霉菌的筛选鉴定及田间防效
《中国生物防治学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为筛选广谱苹果病原真菌拮抗菌，采用平板对峙法、生长速率法，从山东多地果园分离筛选出对4种常见苹果病原真菌具有明显拮抗作用的两株木霉菌YTLY-13和YTLY-36，经其形态特征及翻译延伸因子（translation elongation factor 1,TEF1）序列同源性鉴定，结果表明，两菌株分别为绿木霉Trichoderma virens和哈茨木霉Trichoderma harzianum，对病原菌菌丝生长均有明显抑制作用，抑菌率均在68.45%以上，其中对苹果腐烂病菌的抑菌率相对稍高，达73.92%以上。田间药效结果表明，菌株YTLY-36对4种苹果真菌病害防效显著高于菌株YTLY-13的防效，与代森联、枯草芽胞杆菌防效相当，且生长速度快、发酵简单，具备开发成为果树专用广谱微生物杀菌剂的潜力。
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基于形态和分子数据的山东梨园新成灾害螨柑橘全爪螨的鉴定
《昆虫学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】本研究旨在准确鉴定山东梨园一种新成灾害螨，为其进一步研究和有效防控奠定基础。【方法】采用体视显微镜直接观察雌成螨的形态特征，制作雄成螨的侧面观玻片标本，观察其阳茎形态特征，进行形态鉴定。从单头雌成螨中提取基因组总DNA,以螨类特异性引物扩增线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ（cytochrome oxidase subunitⅠ, COⅠ）基因及核糖体DNA第一内转录间隔区（internal transcribed spacer 1, ITS1）和第二内转录间隔区（internal transcribed spacer 2, ITS2）基因并测序，所得序列在NCBI网站上进行Blastn比对，下载与其一致性高的相关基因序列构建系统发育树和计算遗传距离，进行分子鉴定。【结果】结果表明，梨树上害螨的雌成螨背部有粗大突起，可确定为全爪螨属Panonychus害螨。雄螨阳茎特征与柑橘全爪螨Panonychus citri的很相似，其COⅠ, ITS1和ITS2基因序列均与柑橘全爪螨的相应序列具有很高的同源性（核苷酸序列一致性在99%以上）,基于COⅠ, ITS1和ITS2基因序列计算的其与柑橘全爪螨间的遗传距离均远低于其与全爪螨属其他种间的遗传距离；在基于COⅠ, ITS1和ITS2基因序列构建的系统发育树上，梨树上害螨均分别与柑橘全爪螨以很高的置信度（分别为99%, 99%和100%）聚在同一分支。【结论】形态特征结合分子数据分析可以确定山东梨园中新暴发成灾的害螨为柑橘全爪螨，说明柑橘全爪螨在中国的分布范围北移了，需引起高度重视。
关键词： 柑橘全爪螨 梨园 害螨 鉴定 阳茎 COⅠ ITS1 ITS2
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枯草芽孢杆菌KC1723的鉴定及生物学特征研究
《山东农业科学 》 2023
摘要：本试验从土壤中分离筛选出芽孢杆菌菌株KC1723,并对菌株形态、生理生化特征及16S rDNA序列进行分析。结果显示：菌株KC1723呈杆状，链状排列，产生椭圆形芽孢；生理生化特征与枯草芽孢杆菌一致；16S rDNA序列与枯草芽孢杆菌的同源性为99.39%。因此确定菌株KC1723为枯草芽孢杆菌。菌株KC1723最优生长培养基为LB培养基，最适生长pH值为7.0,对暹罗炭疽菌、平头炭疽菌和链格孢菌有良好的抑制作用。本试验为生防菌的开发应用提供了重要的菌种资源。
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金银花炭疽病病原菌的分离鉴定和qPCR检测
《中药材 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：目的:分离鉴定金银花炭疽病病原菌,并建立该病原菌的实时荧光定量PCR(qPCR)检测体系.方法:采集金银花炭疽病病叶标本,对病原菌进行分离和纯化,利用柯赫氏法则检测病原菌的致病性,通过形态学观察结合分子生物学分析鉴定病原菌;基于病原菌的ITS序列设计特异引物和TaqMan荧光探针,并基于该病原菌特异引物的扩增产物制备重组质粒标准品,利用标准品DNA构建qPCR的标准曲线;并对建立的qPCR方法进行特异性、灵敏度和实际样本验证.结果:明确从金银花炭疽病病叶片中分离纯化的菌株为胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeos-porioides.建立的qPCR快速检测方法能够特异性检测该病原菌,灵敏度高,最低检测限为2.94×102 copies/μL,比常规PCR检测灵敏度提高100倍.实际样本验证结果显示,在20例金银花病叶中,4例为炭疽病阳性,与DNA测序结果相符.结论:本研究明确胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides为金银花炭疽病的病原菌,所建立的qPCR方法能对金银花炭疽病进行快速、准确的检测,可以为该病害的早期防治提供技术支持.
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葡萄根癌病研究进展及防治措施
《中外葡萄与葡萄酒 》 2022 北大核心
摘要：葡萄根癌病由葡萄土壤杆菌(Allorhizobium vitis)引起,主要通过伤口侵染,促使植物细胞产生过量的生长激素,从而形成瘤状物,影响植株的营养吸收,进而降低葡萄产量和品质.本文综述了葡萄根癌病的发病症状、病原菌种类、病原菌的基因组信息及分类地位,比较分析了基于特异性引物建立的葡萄土壤杆菌的PCR、荧光定量PCR、数字微滴PCR、环介导等温扩增技术等分子生物学检测技术的优缺点,阐述了病原菌的发病机制及对该病的综合防治方法,为葡萄根癌病的后期研究及生产防治提供参考.
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全生育期鉴定筛选耐盐碱花生品种
《作物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为改善黄河三角洲滨海盐碱地种植结构,扩大花生种植面积,本研究以22个育成的花生品种(系)为材料,测定了全生育期9个性状指标,利用方差分析、相关分析、聚类分析等进行耐盐碱鉴定及耐盐碱指标筛选.结果表明,盐碱胁迫显著降低花生成苗率,明显抑制花生的生长发育和产量形成,不同品种(系)间在9个鉴定指标上存在较大差异.相对单株产量和相对小区产量均与相对地上部干重、相对主茎高、相对侧枝长呈显著正相关,相对小区产量与相对成苗率、相对地下部干重、相对单株产量显著正相关.全部材料可划分为4个耐盐碱级别,其中高度耐盐碱7份(I级)、较耐盐碱11份(II级)、盐碱胁迫敏感3份(III级)、高度敏感1份(IV级).筛选出花育9307、花育9312、花育9313、6P03、花育9305及花育6303等适于盐碱地种植的高产品种(系).本研究表明,相对地上部干重、相对主茎高、相对成苗率、相对单株产量、相对侧枝长、相对地下部干重可作为简单、直观的花生耐盐碱鉴定指标.
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绍兴一株牛传染性鼻气管炎病毒的分离与鉴定
《畜牧产业 》 2021
摘要：本研究对绍兴某疑似发生流行病牛场的送检样品进行实验室检测,将检测信息反馈给该牛场作为疫病防控依据。样品经接种MDBK细胞、PCR鉴定、序列分析试验。样品接种MDBK细胞出现细胞病变,PCR扩增出Bo HV-1目的条带,序列分析与Bo HV-1参考株相似性为99%,分离株毒价为1×106.187 TCID50/0.1 mL。证明分离获得的毒株为牛传染性鼻气管炎病毒是此次该牛场引发流行病的病原之一,为牛场疫病防控提供科学依据,同时为后续研制IBR相关疫苗提供了毒种准备。
关键词： 牛传染性鼻气管炎病毒 分离 鉴定
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