科研产出
黄曲霉毒素B_1降解菌株的筛选及鉴定研究
《食品研究与开发 》 2018 北大核心
摘要:黄曲霉毒素B_1(aflatoxin B_1,AFB_1)污染花生、玉米等农产品和食品,具有极强的毒性和致癌性。采用香豆素为唯一碳源从海水中分离降解AFB_1菌株,其中菌株M8能降解71.8%的AFB_1。通过上清液、菌悬液、胞内液降解AFB_1分析,初步判断菌株M8分泌至胞外的活性物质主导AFB_1的生物降解作用。通过菌株形态特征、生理生化特征和16S rRNA基因系统发育学分析,鉴定菌株M8属于假单胞菌属,命名为Pseudomonas sp. M8。从海水中分离菌株M8丰富了降解AFB_1降解微生物资源,为研究其作用机理和应用于黄曲霉毒素的脱毒奠定了基础。
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副猪嗜血杆菌脂多糖的提取、鉴定及初步应用
《中国动物检疫 》 2018
摘要:为建立一种有效提取高纯度副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)的方法,进一步阐明HPS的致病机制,通过热酚水法提取LPS,浓缩后,采用酶解法和超离法纯化提取物,分别用硫酸-苯酚法、BCA法、紫外分光光度法,测定LPS提取物中多糖、蛋白及核酸的含量,通过SDSPAGE电泳银染方法鉴定提取物。将提取的LPS作用于猪肺泡巨噬细胞,通过荧光定量方法检测IL-1β的表达量差异。结果显示:纯化的LPS平均产率为2.56%;LPS提取物中不含还原性单糖,多糖含量为3.27%,蛋白含量为0.77%,核酸含量为0.90%;提取的LPS能够引起猪肺泡巨噬细胞IL-1β表达量显著上调。因此,通过该方法提取纯化的LPS可以用于HPS与宿主细胞间作用机制的研究。
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保加利亚乳杆菌N-乙酰胞壁质酶的原核表达和鉴定
《山东农业科学 》 2018
摘要:为研究保加利亚乳杆菌(LB)N-乙酰胞壁质酶(Mur)的分子生物学特性,根据已发表的保加利亚乳杆菌核苷酸序列,设计并合成一对特异性引物,PCR扩增LB MN株不含跨膜区域序列的mur基因,片段回收后克隆至pMD19-T载体并进行鉴定,再将其亚克隆于原核表达载体pET-30a(+)中构建重组表达质粒pET-30a(+)-mur,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达。SDS-PAGE和Western blot分析显示重组Mur蛋白分子量约为21 kD,能在大肠杆菌中高效表达。
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降解黄曲霉毒素B_1芽孢杆菌的筛选与鉴定
《山东农业科学 》 2018
摘要:本研究以香豆素为唯一碳源进行黄曲霉毒素B_1(AFB_1)降解菌的筛选,从花生地土壤中分离出高效降解AFB_1的菌株A3042。研究该菌的上清液、菌悬液、胞内液对AFB_1降解特性。结果表明,菌株A3042能高效降解AFB_1,其胞外上清液、菌悬液和胞内液分别降解91. 7%、11. 4%和7. 6%的AFB_1,表明起降解的活性物质主要位于胞外液。综合其形态学特征、生理生化特征和16S rRNA基因分析,鉴定菌株A3042为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus),命名为Bacillus cereus A3042。本研究为食品和饲料中AFB_1的生物降解提供菌种资源。
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芽孢杆菌GSBM05对葡萄白腐病菌的抑菌活性及其鉴定
《中国农学通报 》 2018 CSCD
摘要:旨在从土壤中分离筛选出对葡萄白腐病菌有强烈抑制作用的芽孢杆菌,检测其抑菌活性并进行鉴定。采用稀释平板法从土壤中分离芽孢杆菌,利用对峙培养和菌丝生长速率等方法对抑菌活性较好的芽孢杆菌GSBM05进行初步研究。结果表明,在土壤样品中共分离出40株芽孢杆菌,经初筛、复筛后得到1株具有强烈抑制效果的芽孢杆菌GSBM05。该菌株稀释20倍的无菌发酵液对孢子萌发和菌丝生长抑制率均在90%以上,发酵液不同组分对葡萄离体果实、叶片的防治效果均可达80%以上。该菌株对葡萄白腐病菌等11种植物病原菌具有良好的拮抗作用。通过形态观察、生理生化鉴定以及16S r DNA序列分析,确定该菌株为甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)。实验结果表明,甲基营养型芽孢杆菌GSBM05具有良好的抑菌活性,抑菌谱较广,可为葡萄白腐病生物防治提供新资源。
关键词: 拮抗芽孢杆菌 甲基营养型芽孢杆菌 葡萄白腐病 抑菌活性 鉴定 生物防治
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山东省樱桃主产区果蝇的调查与鉴定
《植物保护学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要:为了解山东省樱桃主产区果蝇的发生情况,本研究选择了山东省主要樱桃产区的7个地点进行调查,并通过形态学特征和分子鉴定法对果蝇的种类进行鉴定。结果发现,山东省樱桃主产区有4种果蝇,通过形态特征与分子鉴定法最终确定4种果蝇,分别为斑翅果蝇Drosophila suzukii、黑腹果蝇D.melanogaster、海德果蝇D.hydei和伊米果蝇D.immigrans。这4种果蝇对樱桃的为害程度与种植地区、果实腐烂程度和樱桃的品种均有关系;莱芜和泰安地区果蝇分别有4种和3种;烟台和威海地区则只有斑翅果蝇和黑腹果蝇2种。烟台地区果蝇为害率最高,且数量最多,其中烟台丁家夼村樱桃为害率高达45.16%,在第2次采集中烟台薛家村每100粒樱桃中斑翅果蝇和黑腹果蝇的数量最多。美早和先锋2个品种樱桃对果蝇的吸引力较强;采摘后期腐烂的果实可吸引大量的果蝇产卵。因此,应对烟台地区进行重点预防、早期防治,并减少美早和先锋品种樱桃在山东省的种植。
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降解黄曲霉毒素B1芽孢杆菌的筛选与鉴定
《山东农业科学 》 2018
摘要:本研究以香豆素为唯一碳源进行黄曲霉毒素B1(AFB1)降解菌的筛选,从花生地土壤中分离出高效降解AFB1的菌株A3042.研究该菌的上清液、菌悬液、胞内液对AFB1降解特性.结果表明,菌株A3042能高效降解AFB1,其胞外上清液、菌悬液和胞内液分别降解91. 7%、11. 4%和7. 6%的AFB1,表明起降解的活性物质主要位于胞外液.综合其形态学特征、生理生化特征和16S rRNA基因分析,鉴定菌株A3042为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus),命名为Bacillus cereus A3042.本研究为食品和饲料中AFB1的生物降解提供菌种资源.
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