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保加利亚乳杆菌N-乙酰胞壁质酶的原核表达和鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 张玉玉 1 ; 苏文政 1 ; 马建军 1 ; 黄保华 1 ; 蒋慧 1 ; 吴家强 1 ; 王可 1 ;

作者机构： 1.山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室;山东省食品药品检验研究院

关键词： 保加利亚乳杆菌;N-乙酰胞壁质酶;原核表达;鉴定

期刊名称： 山东农业科学

ISSN： 1001-4942

年卷期： 2018 年 05 期

页码： 14-17

摘要： 为研究保加利亚乳杆菌(LB)N-乙酰胞壁质酶(Mur)的分子生物学特性,根据已发表的保加利亚乳杆菌核苷酸序列,设计并合成一对特异性引物,PCR扩增LB MN株不含跨膜区域序列的mur基因,片段回收后克隆至pMD19-T载体并进行鉴定,再将其亚克隆于原核表达载体pET-30a(+)中构建重组表达质粒pET-30a(+)-mur,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达。SDS-PAGE和Western blot分析显示重组Mur蛋白分子量约为21 kD,能在大肠杆菌中高效表达。

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