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水稻类受体蛋白激酶FTPK1的原核表达及其活性检测

文献类型： 中文期刊

作者： 李颖秀 1 ; 李臻 1 ; 潘教文 1 ; 王庆国 1 ; 刘炜 1 ;

作者机构： 1.山东师范大学生命科学学院;山东省农业科学院生物技术研究中心/山东省作物遗传改良与生理生态重点实验室

关键词： 水稻;类受体蛋白激酶;FTPK1;原核表达;蛋白纯化;激酶活力检测

期刊名称： 山东农业科学

ISSN： 1001-4942

年卷期： 2018 年 05 期

页码： 7-13

摘要： 类受体蛋白激酶(receptor-like kinase,RLKs)是植物信号分子的受体,它能够通过胞内激酶域对底物进行磷酸化或去磷酸化,从而对下游靶基因的转录及表达进行调控,参与胞内信号转导,在植物生长发育及环境应答过程中发挥作用。本研究以水稻"中花11"cDNA为模板,通过PCR技术获得类受体蛋白激酶基因FTPK1的全长序列,进一步构建原核表达载体p ET-28a-FTPK1后,经1 mmol/L IPTG诱导12 h,获得88k D的诱导表达蛋白条带,显示FTPK1可在大肠杆菌中诱导表达。表达产物经Ni柱纯化及透析后,获得纯化的融合蛋白。FTPK1激酶活力检测显示,其可磷酸化蛋白底物His和MBP,具有一定的磷酸化活性。本研究为进一步制备FTPK1特异性抗体,深入解析其理化特性及生物学功能奠定了基础。

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