科研产出
硒化壳寡糖对雏鸡生长性能与免疫功能的影响
《中国畜牧杂志 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：试验旨在研究硒化壳寡糖对雏鸡生长与免疫功能的影响。选取1日龄海兰褐蛋雏鸡160只，预饲7 d后随机分为4组，每组4个重复，每个重复10只。对照组饲喂基础日粮，壳寡糖组在基础日粮中添加57 mg/kg壳寡糖，亚硒酸钠组在基础日粮中以亚硒酸钠形式添加0.15 mg/kg硒，硒化壳寡糖组在基础日粮中以硒化壳寡糖形式添加0.15 mg/kg硒和57 mg/kg壳寡糖，试验期42 d。结果显示：硒化壳寡糖组21 d时鸡平均日增重、免疫球蛋白（Ig）A、IgG、IgM、肠道分泌型免疫球蛋白A（sIgA）、白细胞介素（IL）-2、IL-10、干扰素-γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、禽流感病毒抗体（AIV-Ab）、新城疫病毒抗体（NDV-Ab）、传染性支气管炎病毒抗体（IBV-Ab）、传染性法氏囊病毒抗体（IBDV-Ab）水平和42 d时鸡体重、平均日增重、sIgA、IgA、IgM、IL-4、IFN-γ、TNF-α、IBDV-Ab、NDV-Ab水平高于对照组和壳寡糖组（P＜0.05）。硒化壳寡糖组21 d时IgG、sIgA、IL-10、IFN-γ、AIV-Ab水平和42 d时sIgA、IgA、IL-4、IFN-γ、TNF-α水平高于亚硒酸钠组（P＜0.05）。由此可见，硒化壳寡糖能促进蛋雏鸡的生长，改善免疫功能，其效果优于壳寡糖和亚硒酸钠。
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H9N2亚型禽流感病毒冷适应株的培育及SPF鸡胚感染后的免疫应答分析
《中国预防兽医学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：H9N2亚型禽流感病毒(H9N2 AIV)冷适应疫苗可以弥补灭活疫苗临床保护效果的不足。为明确宿主对冷适应疫苗的免疫应答效应,本研究将H9N2 AIV(A/chicken/Shandong/903/2013,CK/903/2013)接种10日龄SPF鸡胚连续降温传代,获得在25℃能够稳定复制的冷适应株Ca30。实验结果显示:Ca30株具备冷适应性和温度敏感性,在传代过程中病毒HA蛋白出现多个位点的氨基酸突变,在25℃传代20次后已经获得稳定的氨基酸突变。动物感染试验结果显示,以10~(6.0)EID_(50)的剂量鼻腔感染1周龄SPF鸡,Ca30株仅在喉气管中低水平复制,病毒接种后第3周SPF鸡血清针对Ca30株、异源病毒株1167的血凝抑制效价均达到最高,分别为8.2 log2和5.8log2,接种后第4周针对母本病毒CK/903/2013的血凝抑制效价达到最高值7.6 log2。qPCR检测结果显示,Ca30在25℃时能够在鸡胚肺脏、肝脏和心脏中复制,对肺脏的亲和力最强。利用qPCR检测冷适应株Ca30接种鸡胚后各脏器细胞因子的转录水平,结果显示,Ca30株感染鸡胚后,引起鸡胚肺脏中IL-1β、IL-6、IL-12、IL-8、OAS和MDA5转录水平上调,上调4.18～16.47倍;感染后8 h引起鸡胚心脏中IL-1β、IL-6、IL-12、IL-8、OAS和MDA5的转录水平上调,之后降低甚至下调;72 h时引起鸡胚肝脏中IL-1β、IL-6、IL-8和OAS转录水平上调,上调4.28～6.53倍;在鸡胚脑组织中,各类细胞因子的转录水平变化无明显的规律。本研究培育了一株H9N2 AIV冷适应毒株Ca30,为深入研究冷适应弱毒疫苗的免疫保护机制提供了素材。
关键词： H9N2亚型禽流感病毒 冷适应疫苗 细胞因子 荧光定量RT-PCR
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北五味子多糖的分离纯化及其对鸡外周血淋巴细胞的影响
《山东农业科学 》 2019
摘要：本研究在传统水提醇沉法基础上辅以酶消化法提取北五味子多糖,并用离子凝胶柱层析法对其进一步纯化,分离得到三种分子量的多糖组分(SCP-Ⅰ、SCP-Ⅱ和SCP-Ⅲ)。为分析多糖三种组分对鸡外周血淋巴细胞的作用,首先用高浓度(最高10 mg/mL)的三种多糖组分作用于淋巴细胞,结果显示≤1 mg/mL的多糖对细胞没有显著的毒性作用。以不同浓度的三种SCP组分(0、12.5、25.0、50.0、100.0、200.0、400.0、800.0、1 600.0μg/mL)作用于淋巴细胞,发现SCP-Ⅲ对细胞因子IL-2、IL-6和IFN-γ的分泌具有显著的增强作用,但最佳作用浓度不同,SCP-Ⅰ和SCP-Ⅱ对这三种细胞因子的作用效果不显著。本研究为北五味子多糖的精制和应用奠定了理论基础。
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不同毒力和剂量的新城疫病毒感染鸡胚后固有免疫相关分子mRNA转录水平的变化
《畜牧兽医学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：新城疫是由新城疫病毒引起的一种重要的禽类传染病,给全球养禽业造成严重的经济损失。为更好地了解固有免疫应答在新城疫病毒致病机制中所起的作用,笔者分别以不同剂量的基因VII型新城疫病毒强毒株和LaSota弱毒株感染SPF鸡胚,使用荧光定量PCR方法检测和分析感染早期的病毒增殖和固有免疫相关分子转录水平的动态变化。结果表明,强、弱毒株均可有效地激活鸡胚固有免疫信号通路,导致包括细胞模式识别受体、干扰素、白细胞介素和抗病毒蛋白等基因转录水平的变化。同一病毒以高剂量感染,较之低剂量感染后的增殖速度快,固有免疫相关基因表达上调的峰值出现得也较早。强毒株相比弱毒株诱导鸡体产生了更高水平的干扰素和白细胞介素,与强毒感染导致鸡体严重的临床症状和病理损伤相一致。总之,本研究发现,新城疫病毒感染后鸡胚固有免疫应答的速度和水平因病毒毒力和感染剂量的不同而异。基因VII型新城疫病毒可诱导强烈的细胞固有免疫炎性反应,可能是它对鸡致病性高的重要原因。
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仔猪外周血中内参基因的筛选及细胞因子和受体的表达水平
《中国农业科学 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：【目的】中国地方猪种在抗病性和免疫力方面优于国外猪种,但是对中外猪种抗病力差异的遗传基础和免疫机理却了解甚少。有推测不同品种猪对疾病的抵抗力不同可能在细胞因子和受体的表达水平上有所反映。本研究以抗病力强的大蒲莲和抗病力相对较弱的长白猪的断奶仔猪为研究对象,对6个具有重要功能的细胞因子(促炎症细胞因子(IL8和TNFα),抗炎症细胞因子(IL10),干扰素调节因子(IRF3)和干扰素(IFNA和IFNG))和1个最具代表性的模式识别受体(TLR4)基因在大蒲莲和长白仔猪群体外周血液中的基因表达量进行检测,并对各基因进行品种和母猪效应分析,为了解中外不同猪种的免疫水平奠定基础。【方法】采集大蒲莲(104头)和长白(171头)35日龄仔猪的外周血,提取总RNA,逆转录为c DNA后,利用荧光定量PCR法,首先对6个常用的候选内参基因(ACTB、GAPDH、B2M、TBP、RPL4和PPIA)利用ge Norm软件进行稳定性评价分析,筛选仔猪外周血RNA基因定量分析中稳定表达的内参基因,然后利用该内参基因进行校正,对上述细胞因子和模式识别受体基因在大蒲莲和长白仔猪群体外周血中的表达量进行定量,并利用最小二乘法对细胞因子和受体在大蒲莲和长白仔猪群体中的表达量进行品种和母猪效应分析。【结果】研究结果归纳为4个方面:1.外周血样品中内参基因稳定性值M从大到小依次为:ACTB(0.595)>GAPDH(0.571)>PPIA(0.469)>RPL4(0.466)>TBP(0.461)>B2M(0.440),选择表达稳定性最高的基因B2M作为内参基因对细胞因子和受体基因的表达量进行校正。2.检测的6个细胞因子的基因表达量存在很大的差异,各细胞因子基因表达量ΔCt最大值和最小值之间差值分别为9.23—14.25和5.83—8.73;受体TLR4的ΔCt值的最大和最小值之间相差相对较小,大蒲莲和长白仔猪分别为5.03和3.82。3.大蒲莲和长白两品种间相比较,细胞因子在长白猪群体中的表达量平均值均高于大蒲莲群体,而受体TLR4的基因表达量在长白猪群体中的表达量低于大蒲莲群体;而且,大蒲莲群体内个体间细胞因子和受体表达量变异系数(平均31.43%)要大于长白群体(平均19.10%),这与大蒲莲选育程度低,群体内个体间的差异程度要大相一致。4.品种效应分析表明除IL10外,其他6个目的基因的ΔCt值品种间差异达显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)水平。母猪效应分析表明母猪对各细胞因子和受体的影响均达到了极显著水平(P<0.01)。【结论】成功筛选了外周血基因表达分析中稳定表达的内参基因(B2M),对常规饲养管理下大蒲莲和长白仔猪外周血中的主要细胞因子和受体基因的表达进行群体水平分析。本研究结果为了解中外不同猪种的种质特性和抗病品种的选育提供了基础数据。
关键词： 细胞因子 模式识别受体 基因表达 大蒲莲 长白 仔猪
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聚肌胞免疫刺激下仔猪外周血单核细胞的基因表达分析
《遗传 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：聚肌胞(Poly I:C)是一种天然双链RNA(Double strand RNA,dsRNA)的拟似物,能够模拟病毒感染后所形成的dsRNA及刺激机体产生抗病毒免疫反应。文章以抗病力存在差异的大蒲莲和长白仔猪为研究对象,分离外周血单核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC),在20μg/m L的Poly I:C的免疫刺激下体外培养24 h,对影响免疫应答过程中的7个细胞因子(IRF3、IL6、IL8、IL10、TNFα、IFNγ和IFNα)和3个模式识别受体(TLR3、TLR4和RIG1)利用实时荧光定量PCR检测Poly I:C免疫刺激组相对于对照组的基因表达变化倍数。结果表明:检测的大部分细胞因子和受体(6个)表达量变化倍数很大,其中3种白细胞介素IL6、IL8和IL10免疫刺激变化倍数最大,平均变化倍数分别为20.71、10.87和5.18倍。对不同个体和品种间的比较发现,不仅大蒲莲和长白两品种间(大蒲莲猪的变化倍数平均高于长白猪)而且同品种的3头全同胞仔猪间对Poly I:C免疫刺激的应答也存在较大的变化。文章利用Poly I:C体外模拟dsRNA对PBMC的感染,为下一步筛选仔猪对Poly I:C刺激的免疫应答基因及鉴定大蒲莲猪特殊的抗性基因奠定了基础。
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蓝莓多酚对巨噬细胞IL-1β、IL-6基因表达的影响
《核农学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：本试验通过测定EPP和NEPP对IL-1β和IL-6mRNA表达的影响,确定蓝莓可萃取多酚(EPP)及不可萃取多酚(NEPP)是否具有抗炎作用。结果表明,蓝莓中EPP和NEPP均能抑制细胞中IL-1β、IL-6 mRNA的表达,EPP的抑制效果要优于NEPP。当培养时间为48 h时,EPP和NEPP的添加浓度为10~200μg·mL-1对IL-1β和IL-6 mRNA抑制作用明显。当EPP的添加浓度为100μg·mL-1时,在12~48 h培养时间内,对IL-1β和IL-6 mRNA抑制作用明显;而100μg·mL-1NEPP处理组中,在48h时对IL-1β和IL-6 mRNA抑制效果明显。这表明从蓝莓中的NEPP同EPP一样可通过抑制IL-1β、IL-6 mRNA的表达表现出明显的抗炎作用,对今后蓝莓在医药保健方面研究奠定基础,不可萃取多酚的研究为多酚研究提供了新的方向。
关键词： 蓝莓 可萃取多酚 不可萃取多酚 巨噬细胞 细胞因子
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妊娠期激素对Th1和Th2细胞因子的调控
《动物医学进展 》 2006
摘要：妊娠是一个复杂的生理过程,受到神经、免疫和内分泌的共同调节。作为半自体抗原的胎儿不被母体排斥是子宫局部免疫水平调节的结果。其中激素对辅助性淋巴细胞(Th)发生、分化的调节作用愈来愈受到重视。辅助T淋巴细胞能分化为不同的亚型(Th1和Th2),孕酮可促进Th2型细胞因子(IL-4,IL-5)的产生,有利于妊娠的正常发生;松弛肽促进Th1型细胞因子(IFN-γ)的产生,对妊娠有害。在母胎界面存在激素-细胞因子网络,淋巴细胞产生的细胞因子还能够影响其他细胞因子的产生。由Th2样细胞产生的,对胚泡着床具有非常重要作用的白血病抑制因子(LIF),其表达受Th1细胞诱导因子的下调,如IL-12,IFN-α,IFN-γ,受IL-4和孕酮(诱导T淋巴细胞向Th2细胞分化)的上调。激素通过调控淋巴细胞分泌的细胞因子来调控免疫系统,保持一个动态的平衡,有利于维持妊娠。
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