科研产出
南极假丝酵母(Candida antarctica)脂肪酶A在毕赤酵母中的表达、纯化及性质
《科技通报 》 2009 北大核心
摘要：将编码南极假丝酵母脂肪酶A的基因进行克隆,与pPIC9K连接构建成重组载体,并将其电转化入毕赤酵母GS115中。通过MD和MM平板及PCR扩增,筛选和鉴定重组子。重组细胞经过120 h培养后,发酵液上清酶活达到13 U/mL。聚丙烯酰胺凝胶电泳显示,重组脂肪酶分子量约为50 kD,比原始脂肪酶略大。粗酶液经中空纤维素膜超滤浓缩、硫酸铵分级沉淀和离子柱交换层析后,得到在SDS-PAGE上显示为单一条带的重组脂肪酶。该酶最适反应温度为75℃,在70℃保持30 min后,仍具90%以上的活性,最适反应pH值为7.0,在pH6.0～8.0的范围内,具有一定的稳定性。
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应用大孔树脂纯化花生壳总黄酮
《食品科学 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：研究大孔树脂纯化花生壳总黄酮的工艺条件,对大孔树脂的种类及其静态吸附、解吸附条件进行初步探讨。通过静态吸附和解吸附的比较,从7种不同型号的大孔吸附树脂中选出AB-8、DM301、NKA-9三种树脂进行静态吸附解吸动力学,发现NKA-9的吸附解吸效果较为稳定,其吸附解吸平衡时间分别为5h和2h。通过单因素试验,NKA-9的最佳吸附条件为35℃、样液pH7.5,样液中花生壳总黄酮初始浓度(0.112±0.02)mg/ml;最佳解吸条件为体积分数90%乙醇作为解吸液、解吸液用量15ml/g湿树脂、解吸液pH8.5。
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花生植株白藜芦醇提取工艺优化
《农业工程学报 》 2009 EI 北大核心 CSCD
摘要：为了提高花生的综合利用价值,开发天然白藜芦醇新原料,对花生中的白藜芦醇提取工艺进行了研究。通过对花生叶、茎、根和壳中白藜芦醇含量的比较,选出含量最高的花生根为提取原料,并从5种提取方法中选出纤维素酶法作为花生根白藜芦醇的提取方法。通过单因素试验和正交试验对酶法提取花生根白藜芦醇酶解工艺进行了优化。结果表明:最佳的酶解条件为酶用量为1.6mg/g,酶解温度为45℃,酶解pH值为4.5,反应时间为60min,底物浓度为15%,在此条件下白藜芦醇的提取率是传统提取工艺的2倍。
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DEAE-Sepharose-FF离子交换层析对牛背最长肌中钙激活酶的纯化研究
《农产品加工(创新版) 》 2009
摘要：通过DEAE-Sepharose-FF离子交换层析法,对牛背最长肌中钙激活酶(calpain)进行了分离纯化,并确定了最佳分离条件。试验分2个阶段进行离子交换线性梯度洗脱,第1阶段线性梯度为浓度0～215mmol/LNaCl,第2阶段线性梯度为浓度215～500mmol/LNaCl,洗脱流速为2mL/min,并对每一纯化步骤蛋白浓度的变化情况作出了详细的描述和说明;在波长280nm下测定洗脱液的光吸收值,洗脱得到3个蛋白峰,μ-calpain和m-calpain分别在NaCl浓度为130～200mmol/L和230～330mmol/L时被洗脱下来,钙激活酶蛋白抑制剂(calpastatin)在NaCl浓度为25～125mmol/L时被洗脱下来。calpain的分子量约为110kDa,通过对提取液电泳试验表明,检测结果恰好在分子量约为110kDa处有一条清晰的带,说明所得提取物为calpain。
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