文献类型： 中文期刊
作者： 胡鹏 1 ; 罗欣 2 ; 杜方岭 1 ;
作者机构： 1.山东省农业科学院原子能研究所
2.山东农业大学食品学院
关键词： 钙激活酶;离子交换色谱;分离纯化
期刊名称： 农产品加工(创新版)
ISSN： 1671-9646
年卷期： 2009 年 10 期
页码： 45-47+61
摘要： 通过DEAE-Sepharose-FF离子交换层析法,对牛背最长肌中钙激活酶(calpain)进行了分离纯化,并确定了最佳分离条件。试验分2个阶段进行离子交换线性梯度洗脱,第1阶段线性梯度为浓度0～215mmol/LNaCl,第2阶段线性梯度为浓度215～500mmol/LNaCl,洗脱流速为2mL/min,并对每一纯化步骤蛋白浓度的变化情况作出了详细的描述和说明;在波长280nm下测定洗脱液的光吸收值,洗脱得到3个蛋白峰,μ-calpain和m-calpain分别在NaCl浓度为130～200mmol/L和230～330mmol/L时被洗脱下来,钙激活酶蛋白抑制剂(calpastatin)在NaCl浓度为25～125mmol/L时被洗脱下来。calpain的分子量约为110kDa,通过对提取液电泳试验表明,检测结果恰好在分子量约为110kDa处有一条清晰的带,说明所得提取物为calpain。
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