科研产出
鸭瘟病毒基因组的提取和限制性酶切分析
《中国家禽 》 2007 北大核心
摘要：利用高渗缓冲液裂解感染鸭瘟病毒的鸭胚成纤维细胞,加入核酸酶消化细胞DNA,再抽提病毒DNA的方法提取鸭瘟病毒基因组,结果证明,这种方法可以最大限度地消除细胞DNA的污染,得到纯净的病毒基因组DNA。用10种限制性内切酶对鸭瘟病毒疫苗株和分离株的基因组进行酶切分析,酶切产物电泳结果表明,SmaⅠ、SalⅠ、PstⅠ、NotⅠ、HindⅢ、EcoRⅤ和BamHⅠ7种限制酶产生酶切图谱二者几乎完全一致,EcoRⅠ和SacⅠ仅有个别条带不同,BglⅡ产生的条带迁移率差别较大,但条带数量相同。
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小麦醇溶蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的改进及应用
《山东农业科学 》 2007
摘要：在国际种子检验协会(ISTA)及国家农作物种子检验规程(GB/T3543—1995)颁布的小麦种子醇溶蛋白PAGE电泳技术鉴定品种的标准程序基础上,对溶液的配制、凝胶浓度、电泳方式等影响电泳效果的主要因素进行了研究和改良,使其操作更加简单快捷、凝胶质量好、剥胶容易、分辨率高,比原方法更具可操作性。
关键词： 醇溶蛋白 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) 小麦 纯度
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几种提纯鸭病毒性肝炎血清免疫球蛋白G方法的比较
《山东农业科学 》 2007
摘要：用辛酸-硫酸铵法、硫酸铵法、硫酸钠法和聚乙二醇沉淀法分别提纯鸭抗DHV血清中免疫球蛋白G(IgG),经SDS-PAGE电泳、蛋白含量及生物活性测定分析表明,先用辛酸澄清,再用50%饱和硫酸铵粗提,最后用35%饱和硫酸铵重复两次提取的IgG纯度和生物活性均较其它方法高。此法操作简便,便于推广应用。
关键词： 鸭病毒性肝炎 免疫球蛋白G(IgG) 纯化方法
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鸡α-干扰素在毕赤酵母中的分泌表达、纯化及其抗病毒活性测定
《山东农业科学 》 2006
摘要：本试验将已构建的鸡α-干扰素重组酵母表达质粒pPIC-ChIFNα克隆至Pichia pastorisGS115基因组中,从阳性转化子中筛选出2株能高效表达鸡α-干扰素的重组酵母菌株,并对表达产物进行了纯化和抗病毒活性的测定。结果表明,Pichia pastoris表达的重组ChIFNα具有较高的抗病毒活性,其活性单位为570×104U/ml,结合蛋白定量计算其比活性为2 980×104U/mg。
关键词： 鸡α-干扰素成熟蛋白 Pichiapastoris 基因表达 分离纯化 抗病毒活性
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美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位基因表达及其产物的纯化
《动物医学进展 》 2006
摘要：对原核中以包涵体形式高效表达的美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位区段进行了变性、复性与纯化研究。将美洲型PRRSV重组质粒pGEX-6P-1-N转化入E.coliBL21(DE3)细胞中,成功表达了重组蛋白GST-N,超声裂解复性后目的蛋白经GSTrap FF纯化试剂盒纯化后,纯度可达90%以上。将欧洲型PRRSV重组质粒PQE30-N转化入E.coliM15细胞中表达了重组蛋白His-N。超声裂解后目的蛋白经HisTrapHP蛋白纯化试剂盒纯化后,纯度可达95%以上。Western blot结果表明,两种蛋白分别被美洲型和欧洲型PRRSV阳性血清识别。纯化出的大量美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位区段,为PRRSV的鉴别诊断提供了抗原基础。
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒 美洲型 欧洲型 N蛋白抗原多肽 原核表达 纯化
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