文献类型： 中文期刊
作者： 丛晓燕 1 ; 李俊 2 ; 吴家强 2 ; 张祯涛 3 ; 赵鸿雁 1 ; 曹帅 1 ; 王文志 2 ; 王金宝 2 ;
作者机构： 1.莱阳农学院动物科技学院
2.山东省农科院畜牧兽医研究所
3.山东省畜牧兽医总站
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;美洲型;欧洲型;N蛋白抗原多肽;原核表达;纯化
期刊名称： 动物医学进展
ISSN： 1007-5038
年卷期： 2006 年 27 卷 11 期
页码： 80-84
摘要： 对原核中以包涵体形式高效表达的美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位区段进行了变性、复性与纯化研究。将美洲型PRRSV重组质粒pGEX-6P-1-N转化入E.coliBL21(DE3)细胞中,成功表达了重组蛋白GST-N,超声裂解复性后目的蛋白经GSTrap FF纯化试剂盒纯化后,纯度可达90%以上。将欧洲型PRRSV重组质粒PQE30-N转化入E.coliM15细胞中表达了重组蛋白His-N。超声裂解后目的蛋白经HisTrapHP蛋白纯化试剂盒纯化后,纯度可达95%以上。Western blot结果表明,两种蛋白分别被美洲型和欧洲型PRRSV阳性血清识别。纯化出的大量美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位区段,为PRRSV的鉴别诊断提供了抗原基础。
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