科研产出
山东省肉鸭沙门氏菌的分离鉴定及敏感抗菌药物的筛选
《中国畜牧兽医 》 2014 北大核心
摘要：从山东省各个地区的病死肉鸭采集317份组织样品进行细菌分离,并进行染色镜检和生化鉴定,共分离鉴定出105株沙门氏菌,分离率为33.1%。将临床推荐用药浓度的0.1倍作为抗药性检测浓度L,设置不同药物浓度梯度(1/4L、1/2L、L、2L和4L),进行17种抗生素的药敏试验,根据L药物浓度梯度对分离菌株的抑菌率大于80%的原则进行敏感抗菌药物的筛选。结果表明,沙门氏菌是危害山东省肉鸭养殖的主要病原菌之一,且多重耐药现象较严重,其中氨苄西林、诺氟沙星、卡那霉素、氟苯尼考和培氟沙星等敏感药物可作为临床推荐药物对沙门氏菌进行防控。
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次郞甜柿炭疽病菌的分离鉴定及其rDNA-ITS序列分析
《经济林研究 》 2014
摘要：为了给生产中柿树次郎甜柿炭疽病的诊断及防治提供理论指导,通过组织分离法和单孢分离法从感病次郞甜柿的果实和嫩梢中获得了2个分离物,菌落及孢子形态特征显示该分离物为炭疽菌。以通用引物ITS6和ITS4,通过PCR扩增,获得了rDNA-ITS基因片段。测序结果显示,从柿的果实和嫩梢分离获得的染病次郎甜柿分离物ITS序列完全一致,片段大小为598 bp,该片段与感病浙江无核柿(AY787483)和新西兰分离物(GQ329690)的同源性分别为100%和99.8%。系统进化树分析结果显示,染病次郎甜柿分离物与浙江无核柿(AY787483,AY791890)和新西兰分离物(GQ329687,GQ329688和GQ329690)处在同一分支,据此,将该病原物鉴定为柿树炭疽菌Colletotrichum horii,并将其ITS基因序列提交到GenBank数据库(基因登录号:JQ957543)。
关键词： 次郞甜柿 柿树炭疽病 病原分离 分子鉴定 rDNA-ITS序列分析
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绿头野鸭新型呼肠孤病毒的分离鉴定
《中国家禽 》 2014 北大核心
摘要：本研究从山东临沂地区发生肝脾出血的绿头野鸭中分离到一株病毒,经RT-PCR及序列测定分析,确定为新型鸭呼肠孤病毒(命名为SD12)。该病毒可在鸡胚、鸭胚中繁殖,并导致胚体水肿、出血、死亡,同时可适应鸡胚成纤维细胞(CEF)和鸭胚成纤维细胞(DEF),细胞病变主要表现为多个细胞聚集成团,形成大的合胞体,然后细胞拉网并逐渐脱落。将该病毒分别以脑内接种、颈部皮下接种、口服三种方式接种3日龄健康雏鸭,结果颈部皮下方式雏鸭的发病率和死亡率最高,分别为30%和20%。
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响应面法优化超声波提取蓝莓多酚工艺
《南方农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：【目的】对超声波提取蓝莓工艺进行优化,为其商业化生产提供技术支持。【方法】以蓝莓冻干粉为试验原料,在单因素试验基础上选择乙醇浓度、料液比、超声时间等3个因素进行响应面设计,采用Box-Behnken中心组合试验设计和响应面分析法,建立以蓝莓多酚含量为响应值的二次回归方程。【结果】通过响应面分析建立蓝莓多酚超声萃取回归方程为:y=10.88-0.15x1+0.042x2+0.055x3-0.27x1x2-0.15x1x3-0.090x2x3-0.56x12-0.35x22-0.15x32(x1为乙醇浓度,x2为料液比,x3为超声时间,y为蓝莓多酚萃取率,R2=0.9692),该模型拟合度好;并确定蓝莓多酚萃取的影响因素顺序为:x1>x3>x2;最佳提取工艺条件为:提取次数两次、超声功率400 W、乙醇浓度55%、料液比1∶25、超声时间1.5 h,在此条件下蓝莓多酚含量为11.05 mg/g。【结论】研究建立的模型适合蓝莓多酚超声波提取,可用于实际生产。
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一起鸭甲肝病毒1型和3型混合感染的研究报道
《家禽科学 》 2014
摘要：自山东省某疑似鸭肝炎发病鸭肝脏中分离到两株病毒,命名为TA1和TA2,分离毒分别回归3日龄雏鸭,可复制出鸭肝炎的典型症状和病理变化。利用鸭甲肝病毒1型(DHAV-1)和3型(DHAV-3)特异性引物进行RT-PCR扩增,结果为阳性,经测序证实为DHAV-1和DHAV-3。分别扩增分离毒的VP1基因,经序列测定及遗传进化关系分析发现,分离毒TA1和DHAV-3毒株之间有较高的核苷酸序列相似性,与DHAV-3遗传距离最近,属于基因C型;分离毒TA2和DHAV-1毒株之间有较高的核苷酸序列相似性,与DHAV-1的遗传距离最近,属基因A型。
关键词： 鸭甲肝病毒1型 鸭甲肝病毒3型 分离 RT-PCR 混合感染
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新疆石河子地区隐性乳房炎致病菌调查及分离鉴定
《江苏农业科学 》 2014 北大核心
摘要：针对新疆石河子地区不同牛场(A牛场、B牛场)7—9月奶牛隐性乳房炎的发病情况以及主要致病菌进行调查,采用CMT法和体细胞分析仪(SCC)法相结合,随机抽取122头处于泌乳期的奶牛,对2种检测方法均为阳性的奶牛再进行致病菌的分离与鉴定。结果表明,新疆石河子地区A牛场、B牛场7—9月奶牛隐性乳房炎阳性率分别为86.1%、44.0%,阳性乳区率分别为41%、26%。SCC法检测结果显示,A牛场0~30万个/mL占8.3%,31万~60万个/mL占22.2%,61万~100万个/mL占18.1%,101万~200万个/mL占20.8%,200万以上个/mL占30.6%;B牛场0~30万个/mL占30%,31万~60万个/mL占32%,61万~100万个/mL占12%,101万~200万个/mL占14%,200万个/mL以上占12%。采用CMT和SCC检测仪相结合的方法提高了隐性乳房炎检出率,且隐性乳房炎的检测由定性检测转向了定量检测。由以上结果可见,新疆石河子地区7—9月是奶牛隐性乳房炎的高发季节。
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乌骨鸡Cathelicidins类抗菌肽基因在大肠杆菌中的融合表达与抑菌活性
《浙江农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：Cathelicidins抗菌肽是含高度保守cathelin结构域的一大类抗菌肽,在家禽天然免疫系统中发挥重要作用。通过PCR方法,从含乌骨鸡Cathelicidins抗菌肽基因(CathL-1,-2,-3)cDNA完整序列的质粒pMDCathL中分别扩增Cathelicidins-1,-2,-3成熟肽的编码序列,将其分别克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,构建其重组表达质粒pET30-CathL1S,pET30-CathL2S,pET30-CathL3S,经测序验证的重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株。阳性克隆菌株在37℃,1.0 mmol·L-1IPTG的条件下进行诱导表达。SDS-PAGE和Western-blot分析表明,Cathelicidins成熟肽片段均在大肠杆菌中以融合形式成功表达,表达产物的表观分子量分别为7.0,8.0,7.5 kD。琼脂糖孔穴扩散法检测显示表达产物对多种革兰氏阴性菌和阳性菌均具有很好的抑制活性,其对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、藤黄微球菌(Micrococcus luteus)、大肠杆菌(Escherichia coli)、鸡白痢沙门氏菌C79-13(Salmonella pullorum)、巴氏杆菌、鸭疫里默氏杆菌、绿脓杆菌等供试菌株均有较强的抑制作用,尤其对抗生素耐药菌株有明显的抑制作用。
关键词： 乌骨鸡 Cathelicidins抗菌肽 融合表达 分离纯化 抑菌活性
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七种培养基对黄曲霉分离效果的比较
《核农学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为了筛选出适宜黄曲霉分离的培养基,比较了7种常用于霉菌分离的培养基对10个花生土壤样品的黄曲霉分离效果,这7种培养基为氯硝胺18%甘油培养基(DG18)、高盐察氏培养基(SCDA)、马铃薯琼脂培养基(PDA)、改良的孟加拉红培养基(M-RB)、YES培养基、孟加拉红培养基(RB)、氯硝胺孟加拉红琼脂(DRBC)。研究发现7种培养基对黄曲霉菌培养效果差别很大,培养效果最好的是DG18,黄曲霉的培养数是PDA的7.3倍。同时DG18能很好的抑制毛霉的生长,与DRBC培养基相比,能抑制81%的毛霉菌生长。因此DG18培养基能最大限度的保证黄曲霉的生长分离,同时也能更好地抑制毛霉的生长,更适用于黄曲霉种群、遗传方面的研究应用。
