科研产出
山东地区鸡沙门氏菌耐药性分析
《家禽科学 》 2023
摘要：沙门氏菌是一种寄生在人和动物小肠内的革兰氏阴性直杆菌,可引起急性或慢性人兽共患传染病.本试验通过对山东地区7个地级市共69个养鸡场进行随机采样,利用PCR扩增沙门氏菌目的基因和血清凝集试验的方法对沙门氏菌进行鉴定.结果显示,从山东省各地级市养鸡场采集的2050份样品中共检测出沙门氏菌阳性样品18份,分离菌鉴定均为鸡白痢沙门氏菌,并对阳性菌株进行培养纯化,利用K-B纸片法检测沙门氏菌对氨苄西林、西诺沙星、磺胺异噁唑等11种药物的敏感性.本研究可供山东地区养殖场参考,对沙门氏菌的防控和治疗具有重大意义.
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山东省肉鸡养殖场大肠杆菌的分离鉴定及抗药性监测
《山东农业科学 》 2021
摘要：近年来,由于抗菌药物广泛应用于动物和人类疾病的治疗和预防,导致各种细菌对抗生素的抗性急剧增加,尤其是大肠杆菌的多重耐药性。为了解山东省肉鸡养殖场大肠杆菌的抗药性情况,本研究于2018—2019年从山东省3个规模化养鸡场采集123份新鲜粪便样品,对其进行大肠杆菌的分离和鉴定,并利用微量肉汤稀释法对大肠杆菌分离株进行药敏试验。结果显示,从123份新鲜粪便样品中共分离到123株大肠杆菌;全部分离株对多西环素耐药,对美罗培南敏感。大肠杆菌多重耐药率为99.2%,对9种抗生素耐药的菌株多达34株。本研究结果可为养鸡场中抗生素的规范使用提供理论依据。
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畜禽粪污中金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌的LAMP检测及其耐药性分析
《中国畜牧兽医 》 2020 北大核心
摘要：为深入了解畜禽粪污中金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌的流行及耐药状况,采用建立的畜禽粪便中金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌的环介导等温扩增技术(LAMP)检测方法对山东省内牛粪污、猪粪、鸡粪、鸭粪中的金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌进行检测,进而对检测阳性样品进行分离,并对药敏试验中多重耐药性菌株进行耐药基因预测.结果表明,LAMP方法检测畜禽粪污中金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌与国家标准方法检测结果符合率为100%,重复性好,特异性高.从80份畜禽粪污样品中分离到的3株金黄色葡萄球菌均对青霉素耐药;34株大肠埃希氏菌对氟苯尼考、利福平的耐药比例高于50%,高于25%以上的还有氨苄西林、四环素、多西环素、磺胺异噁唑、头孢噻吩和头孢噻呋;耐药基因预测结果显示,鸡粪、鸭粪、牛粪和猪粪中的4株大肠埃希氏菌分别携带10、8、20和15种耐药基因;鸡粪中的1株金黄色葡萄球菌携带11种耐药基因.说明山东地区畜禽粪污中金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌耐药状况严峻,菌株普遍多重耐药,且携带多种耐药基因.
关键词： 畜禽粪污 LAMP 金黄色葡萄球菌 大肠埃希氏菌 药敏试验 耐药基因
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山东地区鸡源致病性大肠杆菌的相关基因检测及药敏试验
《家禽科学 》 2019
摘要：为了解近年山东省禽源大肠杆菌的毒力因子及耐药情况,分析潜在的公共安全问题,特将本实验室保存的大肠杆菌标准株与送检的发病(死)鸡中分离的菌株同时进行毒力基因的PCR检测及药敏试验.结果显示:16种常见抗生素中,青霉素G和万古霉素对20株大肠杆菌均无抑制作用,而抑菌效果较好的抗生素主要有阿米卡星、庆大霉素等;其中两株大肠杆菌分离株对上述16种抗生素均不敏感,17株大肠杆菌对超过5种以上抗生素耐药;13株含有5种以上毒力因子基因,占比65%;4株同时含有7种毒力因子基因,占比20%;仅1株不含被检毒力基因.上述结果表明,大肠杆菌耐药形势异常严峻,并且部分菌株具有较强的致病力.本次试验结果同样对保障公共健康、防止耐药菌株通过食物链进入人体造成危害具有借鉴意义.
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山东省及周边地区肉鸭源大肠杆菌流行病学调查及耐药性分析
《山东农业科学 》 2018
摘要：为建立鸭大肠杆菌快速鉴定及药敏检测方法,筛选合适的抗生素,本试验从山东省12个、河北4个及河南4个地区养殖场或养殖小区采集到447份疑似感染鸭大肠杆菌的肉鸭肝脏和脑部组织病料,共分离到300株大肠杆菌,分离率为67.11%。利用大肠杆菌phoA基因为目的基因,建立了PCR快速鉴定鸭源大肠杆菌的方法。该PCR检测方法可快速鉴定鸭源大肠杆菌,鉴定效率显著提高。根据美国临床和实验室标准协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)标准及琼脂稀释法药敏试验原理,建立了96点接种药敏检测盒快速检测方法,结果表明:硫酸多粘菌素、甲磺酸培氟沙星抑菌率相对较高;卡那霉素、氨苄西林、氟苯尼考抑菌率相对较低。根据药敏检测结果可快速筛选适用的敏感药物和剂量,并交替轮流使用抗生素。
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96点阵琼脂稀释法与微量肉汤稀释法药敏试验结果的对比
《中国抗生素杂志 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：目的为了验证96点阵琼脂稀释法进行药敏试验的可靠性和有效性,与国际通用的微量肉汤稀释法进行对比。方法用微量肉汤稀释法和96点阵琼脂稀释法分别对质控菌株E.coli ATCC25922、临床分离E.coli进行4种不同药物(头孢噻呋、庆大霉素、氟苯尼考和多西环素)的药敏试验,并经过多次重复和对比。结果这两种检测方法所测定的菌株的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)完全相同者占30%~50%,相差1个梯度占80%,3个梯度以内的吻合率高达96%以上,96点阵琼脂稀释法具有很好的重复性和稳定性。结论 96点阵琼脂稀释法与微量肉汤稀释法两种方法测定的MIC没有显著差异,可共用一个质控标准。96点阵琼脂稀释法的标准化和规范化,有利于高通量药敏检测的进行,推动建立完善的抗药性监测技术体系。
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肉鸡产业链主要抗药性菌株的分离鉴定与抗药性分析
《山东农业科学 》 2018
摘要：为分析肉鸡产业链各环节主要抗药性菌株的流行状况,保证食源性公共卫生安全,本试验采集肉鸡养殖、屠宰及加工各环节的样本108份,通过6种不同含药物培养基初步筛选抗药性菌株,经VITEK2自动微生物鉴定和自动药敏检测,并与微量肉汤稀释法药敏试验进行比较。结果表明,从肉鸡产业链各环节共鉴定获得664株细菌,其中前三位的优势细菌为大肠杆菌375株(56.5%)、肺炎克雷伯菌110株(16.6%)和奇异变形杆菌79株(11.9%)。微量肉汤稀释法药敏试验结果显示,大肠杆菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌对阿莫西林/克拉维酸、多西环素抗药率都在90%以上,对环丙沙星和丁胺卡那霉素抗药率在34.6%~87.0%之间,对美罗培南敏感。三种抗药菌显示多重抗药性特征,集中在三、四重抗药水平。VITEK2自动药敏试验结果显示,大肠杆菌对氨苄西林、头孢唑啉抗药率分别是98.3%、92.6%;全部对厄他培南、亚胺培南敏感。肺炎克雷伯菌对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦抗药率分别是97.3%、89.1%;大部分对厄他培南和亚胺培南敏感,肺炎克雷伯菌的抗药性水平普遍稍高于大肠杆菌,二者呈正相关性。微量肉汤稀释法和VITEK2自动药敏试验两种方法重叠使用了环丙沙星和丁胺卡那霉素,检测结果差异不显著。肉鸡产业链各环节大肠杆菌的抗药性显著高于EUCAST数据库的结果,建议相关部门应加强细菌抗药性监测,并逐步降低抗药性,保障食品安全和公共卫生。
关键词： 肉鸡 抗药性 大肠杆菌 肺炎克雷伯菌 鉴定 药敏试验
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动态分析抗菌作用的新方法
《中国科学:生命科学 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：最低抑菌浓度(MIC)是表征抗菌药物对细菌生长抑制最终效应的常规方法,不能描述抑菌作用的时间过程,药敏试验也不适用于高抗药性水平菌株的治疗方案确定.因此本文提出了一个普适性的新药敏试验方法.不同接种量的质控菌株Escherichia coli ATCC 25922和临床高抗药性水平菌株E.coli BBZ在不同系列浓度的6种抗菌药物(环丙沙星、氨苄西林、头孢噻呋、阿米卡星、硫酸黏菌素和多西环素)作用下,37℃下培养1200 min,连续检测时间序列点的光密度值A600作为反应变量,以相对抑菌效应(RIE=((a.b)/a)×100%)表征抑制效应,进而用等效线图表征药物浓度和时间协同抑制效应的动态过程,量化了浓度依赖型和时间依赖型,细化不同菌株对药物敏感性的差别.由此得到,达到最大抑制效应时,需要的最低药物浓度和时间,以及增大药物浓度或延长反应时间对抑制效应的影响,这正是临床用药最需要的信息.此外,大接种量下最大抑菌效应很低,表明不适合治疗.本方法为防治高抗药性菌株感染提供了药敏试验方法,也有益于促进新药研发药敏检测方法的改进.最后提出适于临床应用的、快速定性显示药物敏感性的方法的建议.
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