科研产出
扶正解毒颗粒对鸡安全性和影响大肠杆菌抗药性的研究
《家禽科学 》 2022
摘要：将1日龄健康雏鸡80只,随机分为四组,每组20只.其中1~3组为试验组,分别在饮水中全程添加推荐剂量1倍(4 g/L)、3倍(12 g/L)和5倍(20 g/L)的扶正解毒颗粒;4组为不用药对照组.试验期8周,每天观察并记录各组鸡的临床体征,每周末称重1次,8周末试验结束时心脏采血测定各组鸡的血液生理生化指标,剖检鸡只,通过组织切片观察各脏器有无变化.从试验组2(即3倍推荐用药剂量组)和不用药对照组鸡只肠道中采集内容物分离大肠杆菌,进行抗药性分析.结果显示,各组试验鸡的行为、采食、粪便性状与空白对照组相比,均未见异常变化.1倍剂量组和3倍剂量组试验鸡的体重均显著高于不用药对照组(P<0.05或P<0.01)和5倍剂量组(P<0.05或P<0.01);而1倍剂量组和3倍剂量组间在各日龄段均无显著差异(P>0.05).试验各组和不用药对照组鸡只血液生理生化指标红细胞数、血红蛋白、白细胞数、淋巴细胞比例均无显著性差异(P>0.05).试验各组脏器颜色、形状、大小、位置等均未见异常变化.显微镜观察组织切片,细胞符合正常组织形态和结构特点.大肠杆菌对8种药物的MIC值均未有显著差异(P>0.05).以上结果表明,扶正解毒颗粒对靶动物鸡无明显不良影响,对大肠杆菌抗药性水平影响不显著.
关键词： 扶正解毒颗粒 鸡 血液 生理指标 大肠杆菌 抗药性
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山东省动物源多重高抗大肠杆菌的抗药基因和毒力基因分析
《家禽科学 》 2022
摘要：为了解和掌握山东省动物源大肠杆菌的多重抗药现象,并分析多重高抗菌株中抗药基因和毒力基因的分布和共存情况,从山东省兽医抗药性监测网(Veterinary antibiotic monitoring resistance system,Varms)菌种库中选取动物源大肠杆菌,用琼脂稀释法进行10种抗菌药物的药敏试验,对5重以上的多重抗药性菌株进行抗药谱分析,并选择多重高抗菌株进行MLST分型,采用PCR方法对常见的21种抗药基因和15种毒力基因进行分析.结果显示,5重以上抗药菌株占20%左右,9~10重抗药且最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)远远高于R值的多重高抗菌株32株中,均检测到含有7~13个抗药基因和0~6个毒力基因共存,其中高检出率的β-内酰胺类、喹诺酮类和氯霉素类的抗药基因均为质粒介导;毒力基因以fimC、sitA、iucD和hlyF为主要毒力因子,检出率为40%~90%.兼具抗药性和毒力的菌株造成严重的公共卫生威胁和巨大的食品安全潜在危害.
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禽类三种常见病原菌快速检测体系的建立及应用
《山东农业科学 》 2021
摘要：鸭疫里默氏杆菌、大肠杆菌和沙门氏菌是禽类3种常见的革兰氏阴性致病菌。为实现3种病原菌的快速检测,选择各自的保守基因ompA、phoA和fimW,建立并优化了同时鉴定3种病原菌的多重PCR方法。3个引物对的最佳终浓度分别为0.60、0.28、0.20μmol/L,最佳退火温度为57℃;该方法能从其他7种临床常见病原菌中特异性区分出鸭疫里默氏杆菌、大肠杆菌和沙门氏菌;在DNA水平和菌水平的最低检测限分别达到1 pg/μL和104 cfu/mL。本试验建立的多重PCR方法特异性和敏感性好,检测成本低、效率高,适用于禽类常见3种临床重要病原菌单一或混合感染的快速诊断及流行病学调查。
关键词： 鸭疫里默氏杆菌 大肠杆菌 沙门氏菌 多重PCR 快速检测
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山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析
《中国畜牧兽医 》 2021 北大核心
摘要：试验旨在了解山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的污染状况及耐药情况。选择山东省3个地区的规模化奶牛场共采集227份牛奶样品,采用细菌学方法对大肠杆菌进行分离鉴定,用微量肉汤稀释法检测分离菌对11种常规抗菌药物的敏感性,采用PCR方法对常见的13种耐药基因、8种毒力基因和Ⅰ类整合子基因盒结构进行分析。结果显示,从227份牛奶样品中共分离出71株大肠杆菌;大肠杆菌对1种及1种以上抗菌药耐药的菌株达到77.5%,多重耐药率为15.5%,其中对多黏菌素耐药率为52.2%,对阿莫西林-克拉维酸耐药率为39.4%,而所有菌株均对新霉素表现为敏感。PCR检测耐药基因、毒力基因和Ⅰ类整合子结果显示,β-内酰胺类耐药基因中blaTEM基因携带率为100%,其中全部为blaTEM-1基因,blaCTX-M基因携带率为32.4%,其中主要为blaCTX-M-15基因,没有检测到blaSHV、blaOXA基因;多黏菌素的耐药基因mcr-1携带率为29.6%;喹诺酮类耐药基因中aac（6’）-Ⅰb-cr基因携带率为29.6%,qnrB基因携带率为20.8%,没有检测到qnrA和qnrC耐药基因;对8种毒力基因检测分析结果显示,仅Hly毒力基因没有被检出,Ecs3703、Irp2基因的检出率较高,分别为90.1%和63.4%,71株大肠杆菌中共有11株携带Ⅰ类整合子,检出率为15.5%,11株大肠杆菌携带6种耐药基因盒结构,最主要的耐药基因盒排列为dfr17-aadA5。本研究结果表明,山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的耐药现象严重,携带毒力基因Ecs3703、Irp2的大肠杆菌可能是引起奶牛乳房炎的致病菌,Ⅰ类整合子的检测在细菌耐药性与基因携带率方面发挥着关键作用,可为临床预防和治疗奶牛乳房炎大肠杆菌病提供理论依据。
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山东省肉鸡养殖场大肠杆菌的分离鉴定及抗药性监测
《山东农业科学 》 2021
摘要：近年来,由于抗菌药物广泛应用于动物和人类疾病的治疗和预防,导致各种细菌对抗生素的抗性急剧增加,尤其是大肠杆菌的多重耐药性。为了解山东省肉鸡养殖场大肠杆菌的抗药性情况,本研究于2018—2019年从山东省3个规模化养鸡场采集123份新鲜粪便样品,对其进行大肠杆菌的分离和鉴定,并利用微量肉汤稀释法对大肠杆菌分离株进行药敏试验。结果显示,从123份新鲜粪便样品中共分离到123株大肠杆菌;全部分离株对多西环素耐药,对美罗培南敏感。大肠杆菌多重耐药率为99.2%,对9种抗生素耐药的菌株多达34株。本研究结果可为养鸡场中抗生素的规范使用提供理论依据。
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一例由疫苗接种引起的商品肉鸡多病原混合感染
《家禽科学 》 2021
摘要：为确诊山东某商品肉鸡群发病的原因,采集病死鸡的喉头、气管等组织,分别进行核酸和病原分离鉴定。结果显示,传染性喉气管炎病毒（ILTV）、传染性支气管炎病毒（IBV）和禽腺病毒4型（FAd V-4）等特异性PCR均呈阳性,而新城疫病毒（NDV）、低致病性禽流感H9N2等均为阴性。测序结果表明,ILTV分离株（PY）与疫苗株（K317）ICP4基因的核苷酸同源性为100%;而IBV分离株（PY）与疫苗株H120、4/91 N基因的同源性分别为86.4%、86.6%,显示出较大的差异。CAM途径接种鸡胚分离出腺病毒,且对SPF鸡胚具有一定的致病性。同时,从病鸡肝脏中分离到大肠杆菌,药敏试验证实对多粘菌素B、健牧茶多酚、阿莫西林棒酸、头孢噻肟敏感,采用敏感药物治疗后取得一定的临床治疗效果。综上所述,该病是一起由疫苗接种应激而引起的多病原混合感染。
关键词： 传染性喉气管炎病毒 禽腺病毒4型 传染性支气管炎病毒 大肠杆菌 混合感染
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奶牛乳房炎病畜生鲜乳中大肠杆菌污染状况及耐药性分析
《山东农业科学 》 2020
摘要：为了解奶牛乳房炎病畜生鲜乳中大肠杆菌污染状况及耐药性,于2019年从潍坊、青岛采集牛乳房炎病畜生鲜乳样品共计98份,对其中常见大肠杆菌的污染状况进行分析。结果表明,98份奶牛乳房炎病畜生鲜乳样品中,42份检出大肠杆菌,检出率为42.9%。对检出的大肠杆菌菌株进行10种抗生素的药敏试验,结果表明,检出的大肠杆菌对氨苄西林、多西环素、四环素有较高的耐药性,且多数为多重耐药菌株。综上,牛乳房炎病畜生鲜乳中大肠杆菌污染较为严重,建议相关部门进一步加强牛乳房炎病畜生鲜乳的监管,采取针对性风险监测措施。
关键词： 奶牛乳房炎病畜 生鲜乳 大肠杆菌 污染状况 耐药性
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畜禽粪污中金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌的LAMP检测及其耐药性分析
《中国畜牧兽医 》 2020 北大核心
摘要：为深入了解畜禽粪污中金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌的流行及耐药状况,采用建立的畜禽粪便中金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌的环介导等温扩增技术(LAMP)检测方法对山东省内牛粪污、猪粪、鸡粪、鸭粪中的金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌进行检测,进而对检测阳性样品进行分离,并对药敏试验中多重耐药性菌株进行耐药基因预测.结果表明,LAMP方法检测畜禽粪污中金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌与国家标准方法检测结果符合率为100%,重复性好,特异性高.从80份畜禽粪污样品中分离到的3株金黄色葡萄球菌均对青霉素耐药;34株大肠埃希氏菌对氟苯尼考、利福平的耐药比例高于50%,高于25%以上的还有氨苄西林、四环素、多西环素、磺胺异噁唑、头孢噻吩和头孢噻呋;耐药基因预测结果显示,鸡粪、鸭粪、牛粪和猪粪中的4株大肠埃希氏菌分别携带10、8、20和15种耐药基因;鸡粪中的1株金黄色葡萄球菌携带11种耐药基因.说明山东地区畜禽粪污中金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌耐药状况严峻,菌株普遍多重耐药,且携带多种耐药基因.
关键词： 畜禽粪污 LAMP 金黄色葡萄球菌 大肠埃希氏菌 药敏试验 耐药基因
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常见消毒剂消毒效果评价
《家禽科学 》 2020
摘要：为评价规模化养殖场常用消毒剂的消毒效果,用规模化养殖场分离鉴定的三株细菌(大肠杆菌、沙门氏菌和葡萄球菌)作为标准菌株,用菌悬混合液定量杀菌法分别对13种消毒剂的杀菌效果进行比较.在相同实验室条件下,将大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌分别与消毒剂按不同稀释比例混匀后作用15 min,培养并计数杀菌后的菌落总数.结果显示:A、B、I比例为1∶2000;C、D比例为1∶1000;H比例为1∶800;G比例为1∶600;E、F、L、M浓度为0.3%(其中L和M以碘含量计);J浓度为0.05%;K浓度为0.02%;以上浓度均可达到100%杀菌效果.
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