科研产出
禽类三种常见病原菌快速检测体系的建立及应用
《山东农业科学 》 2021
摘要：鸭疫里默氏杆菌、大肠杆菌和沙门氏菌是禽类3种常见的革兰氏阴性致病菌。为实现3种病原菌的快速检测,选择各自的保守基因ompA、phoA和fimW,建立并优化了同时鉴定3种病原菌的多重PCR方法。3个引物对的最佳终浓度分别为0.60、0.28、0.20μmol/L,最佳退火温度为57℃;该方法能从其他7种临床常见病原菌中特异性区分出鸭疫里默氏杆菌、大肠杆菌和沙门氏菌;在DNA水平和菌水平的最低检测限分别达到1 pg/μL和104 cfu/mL。本试验建立的多重PCR方法特异性和敏感性好,检测成本低、效率高,适用于禽类常见3种临床重要病原菌单一或混合感染的快速诊断及流行病学调查。
关键词： 鸭疫里默氏杆菌 大肠杆菌 沙门氏菌 多重PCR 快速检测
全文链接
请求原文
快速检测技术在食品安全中的应用研究进展
《食品安全导刊 》 2021
摘要：食品安全是关乎亿万民众切身利益的社会问题,尤其是近年来食品安全问题频发,但很多传统检测技术往往存在检测步骤繁琐、检测时间较长等缺点,无法实施现场快速检测,故使快速检测技术在食品安全检测中的应用得到了普遍研究。为此,本文主要对近年来在食品安全检测中常用的快速检测技术与方法进行了总结。
全文链接
请求原文
副猪嗜血杆菌环介导等温扩增检测方法的建立及应用
《山东农业科学 》 2020
摘要：本试验针对副猪嗜血杆菌的16S rRNA基因设计环介导等温扩增(LAMP)引物,建立副猪嗜血杆菌LAMP方法,并进行特异性和灵敏度试验.结果显示,建立的LAMP检测方法特异性良好,与其它5种细菌无交叉反应,灵敏度为10-4 ng/μL.分别使用LAMP和PCR方法对30份临床采集样品进行检测,阳性检出率均为40%,符合率100%.本试验建立的LAMP检测方法不需要特殊的仪器设备,可用于副猪嗜血杆菌的鉴定.
全文链接
请求原文
兔源肺炎克雷伯氏菌重组酶聚合酶扩增检测方法的建立
《中国动物检疫 》 2019
摘要：为建立一种检测兔源肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)重组酶聚合酶扩增方法(recombinase polymerase amplification,RPA),根据肺炎克雷伯氏菌的phoE基因保守序列设计引物,扩增片段大小为277 bp,并对反应条件进一步优化,最终建立了适宜于快速准确检测兔源肺炎克雷伯氏菌的重组酶聚合酶等温扩增方法.该方法可特异性检测出兔源肺炎克雷伯氏菌,最低检出细菌量为8.3×101 CFU/mL,灵敏度比传统PCR高100倍.本研究建立的肺炎克雷伯氏菌RPA检测方法特异性强、操作简单,从而为生产中的兔源肺炎克雷伯氏菌现场快速检测提供了一种新方法.
全文链接
请求原文
鹅星状病毒LAMP快速检测方法的建立与应用
《中国预防兽医学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：鹅星状病毒是一种新发的可导致雏鹅以痛风为主要特征的传染性病原。为建立鹅星状病毒(AstV)的快速检测方法,本研究根据鹅Ast V ORF1b基因的保守序列设计了一组特异性的LAMP引物,建立鹅AstV的LAMP快速检测方法,并检测其特异性和灵敏度。结果显示:建立的LAMP方法的最佳反应温度为64℃;仅能扩增鹅Ast V,而对鹅细小病毒、鹅副黏病毒、鸭坦布苏病毒及鹅源H9N2亚型禽流感病毒均不能扩增;能够检测到的最低模板(cDNA)浓度为1 ng/μL,因此该方法具有较好的特异性和敏感性。临床样品检测结果显示:建立的LAMP方法与RT-PCR方法阳性符合率为95.65%。综上,本研究建立的LAMP方法能够特异、快速地检测新发鹅Ast V,为养殖基地、科研和检验检疫部门提供了一种快速检测该病原的技术手段。
全文链接
请求原文
利用环介导等温扩增技术快速检测饮用水中的大肠杆菌
《山东农业科学 》 2017
摘要：本研究以饮用水为研究对象,利用大肠杆菌mal B保守基因设计LAMP特异引物,通过优化反应条件,建立了适用于快速检测饮用水中大肠杆菌的LAMP方法,可在60℃条件下反应60 min完成检测,检测灵敏度达到1.35 CFU/m L。利用SYBR GreenⅠ染料剂可在紫外灯下直接观察检测结果。通过检测掺入已知大肠杆菌的纯净水样品,结果表明,本研究所建立的LAMP方法具有特异性强、灵敏度高、操作简便的特点,可用于饮用水中大肠杆菌致病菌的快速检测,对预防和控制大肠杆菌的传染具有重要意义。
全文链接
请求原文
沙门氏菌胶体金免疫层析试纸条的研制与应用
《家畜生态学报 》 2016 北大核心
摘要：本试验目的为提供一种食品中国家强制检验的沙门氏菌胶体金免疫层析试纸条,并对购自超市和农贸市场的肉蛋进行检测。该试纸条由吸收垫、样品垫、偶联垫和硝酸纤维素膜等组成,包被对照线和检测线,以及喷涂于偶联垫上的金标沙门氏菌多抗组装建立。结果表明该试纸条对沙门氏菌的最低检测量为1.07×107 cfu/mL,检测时间仅需5~10min。该试纸条特异性强,重复性好,可在4℃或室温存放9个月,检测结果稳定。
关键词： 沙门氏菌 胶体金免疫层析试纸条 快速检测
全文链接
请求原文
用环介导等温扩增方法检测牛奶中致病微生物
《农产品质量与安全 》 2015
摘要：环介导等温扩增技术(LAMP)是一种新型的基因扩增方法。本试验以牛奶为研究对象,采用LAMP方法检测其中沙门氏菌、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌O157、志贺氏菌和单增李斯特菌,并与国标方法进行比较。结果表明,LAMP方法和国家标准方法检测结果一致,结果符合率为100%,重复性好,灵敏度≤2 CFU/25g,特异性高。LAMP方法可广泛应用于牛奶中致病菌的快速检测。
关键词： 牛奶 环介导等温扩增(LAMP) 致病菌 快速检测
全文链接
请求原文
