科研产出
鸭冠状病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
《病毒学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为建立一种鸭冠状病毒(Duck coronaviruses,DuCoV)的临床快速诊断方法,根据鸭冠状病毒1b基因保守区域设计特异性引物,成功建立了用于检测鸭冠状病毒的特异性SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法.该方法特异性强、敏感性高、重复性好,对鸭冠状病毒有特异性扩增,最低检测限为8.04×100拷贝/μL,比普通PCR方法敏感10倍,批内变异系数与批间变异系数分别为0.28%~0.34%、0.25%~0.36%,均小于1%.对临床可疑鸭泄殖腔拭子进行检测,本方法与常规PCR方法的检测结果阳性符合率为100%,阴性符合率为96.43%,样本总符合率为97.62%.本研究建立的鸭冠状病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法,可用于鸭冠状病毒的临床快速诊断及流行病学监测.
关键词： 鸭冠状病毒 检测 SYBR Green Ⅰ 荧光定量PCR
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基于干种子DNA的洋葱杂交种纯度分子标记快速鉴定
《山东农业科学 》 2023 北大核心
摘要：为了寻找一种从洋葱种子中快速提取高质量DNA的方法,并能满足大量准确鉴定洋葱杂交种纯度的要求,本研究首先对全式金PlantZol试剂盒、天根快捷型植物基因组DNA提取系统、TPS法和CTAB法提取的洋葱种子DNA质量进行比较,筛选出最佳提取方法,并对不同发芽天数的种子及提取有效DNA的种子数量进行优化筛选,然后利用SCAR分子标记对洋葱杂交种的纯度进行鉴定,进一步验证洋葱种子DNA的提取质量.结果表明,天根快捷型植物基因组DNA提取系统未能成功得到洋葱干种子基因组总DNA;CTAB法提取的基因组总DNA带型整齐一致、单一明亮,条带无拖尾和降解现象,也没有明显的RNA和蛋白污染;洋葱干种子以 1粒和发芽3d提取的DNA更加完整,纯度更高.以CTAB法提取的1粒洋葱干种子基因组总DNA为模板,对杂交种Ms位点的基因型进行SCAR标记鉴定,PCR扩增条带清晰明亮,根据条带的迁移位置可以清楚区分洋葱不同细胞核基因型之间的差异.综上,本研究确定了CTAB法为洋葱干种子基因组总DNA提取的最佳方法,1 粒洋葱干种子获得的有效DNA完全可以满足杂交种分子标记鉴定的要求,实现洋葱杂交种纯度的早期鉴定.
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非洲猪瘟新型诊断方法研究进展
《中国生物工程杂志 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：非洲猪瘟（African swine fever, ASF）是由非洲猪瘟病毒（African swine fever virus, ASFV）感染猪而引起的一种急性、烈性传染病。2018年，我国发生的ASF疫情对养猪业造成了严重经济损失。目前尚无有效药物和疫苗用于治疗和预防ASF,主要通过临床诊断和扑杀感染动物来控制疫情传播。建立快速、精准和高效的诊断方法对于疫病防控至关重要。综述当前国内外ASF诊断方法的研究进展，重点阐述诊断靶标的选择以及病原学、血清学检测方法的研究现状，为ASF新型诊断方法的研发提供参考。
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基于中红外光谱监测奶牛酮病的研究进展
《中国畜牧杂志 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：奶牛是重要的经济动物,牛奶被誉为人类最完美的食物.酮病是奶牛泌乳初期的高发性疾病,是影响牧场盈利和奶牛福利的主要原因之一.一般来说,奶牛在出现酮病临床症状之前,往往会经历一段亚临床状态,而这段时间很容易被牧场主忽视,给牧场造成损失.目前主要通过检测血液或奶中的代谢物浓度对酮病进行诊断,然而受人工和成本限制,化学检测法不适用于大规模牛群,中红外光谱(Mid Infrared Spectrometry,MIRS)分析技术因其低成本、高通量的特点已经被逐步应用到酮病监测中.本文介绍酮病的发病机理、MIRS分析技术和当前研究者对于酮病相关指标的模型建立情况,为后续相关模型的建立及优化和酮病抗性性状的遗传选择提供参考.
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金黄色葡萄球菌噬菌体生物学特性研究
《山东农业科学 》 2023 北大核心
摘要：本研究利用分离自生鲜牛乳样品中的金黄色葡萄球菌作为宿主菌，从污水中分离得到一株噬菌体，命名为RPCSa20091。对其生物学特性研究结果显示，该噬菌体属于微球形有尾目噬菌体；宿主谱较宽，裂解率为81.8%;在40℃条件下噬菌体相对稳定，45℃条件下不生长；pH值在3～10时较稳定，pH值在1～2和11～12时噬菌体完全失活；其最佳感染复数为0.1;潜伏期为15 min,裂解周期为75 min。本研究结果为金黄色葡萄球菌噬菌体用于奶牛乳腺炎的治疗提供了理论基础。
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硫代硫酸铵对红富士苹果的疏花效应
《果树学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：[目的]探究硫代硫酸铵(ATS)对天红2号苹果疏花的适宜浓度与时期,以及对果实品质的影响,为苹果化学疏花提供参考.[方法]以天红2号苹果为材料,设不同浓度(w,后同)ATS处理(0、0.5%、1.0%、1.5%、2.0%),不同喷施时期处理(25%中心花开放、75%中心花开放、25%花瓣脱落1次喷施,以及它们各自复配2次喷施),生理落果后调查坐果率和坐果比例等指标,成熟期测定果实品质指标,以确定ATS在富士苹果上的疏花效应.[结果]ATS适宜浓度为1.5%,在中心花开放25%和75%时喷2次,可显著降低坐果率,花序坐果率和花朵坐果率分别为87.70%和33.56%,单果率高达42.54%;保留的中心果发育更好,纵横径较对照分别提高了10.18%和19.06%,其全氮含量比对照增高了近一倍;ATS处理显著提高了单果质量,果皮红色度、可溶性固形物含量和维生素C含量稍有升高,对果形指数、果肉硬度和可滴定酸含量无明显影响.[结论]ATS可以作为有效疏花剂在红富士苹果上应用,适宜浓度为1.5%,在中心花开放25%和75%时连喷2次效果最好.
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贮藏方式对萝卜抽薹开花的影响
《山东农业科学 》 2023 北大核心
摘要：为提高当前冷库贮藏萝卜种株的温度管理技术水平,本试验以'潍县青'萝卜为材料,研究冷库贮藏、埋藏、仓库贮藏三种冬贮方式贮藏期间的温度变化趋势及对萝卜抽薹开花、叶片理化指标的影响.结果表明,贮藏期间埋藏和仓库贮藏方式的温度变化可分为 3 个阶段,其中收获后和定植前 1 个月左右均有一个明显的变温过程;冷库贮藏的萝卜比仓库贮藏、埋藏方式分别延迟抽薹 11d和7d,延迟开花12d和7d;冷库贮藏的萝卜株高显著低于其他两种贮藏方式,花茎直径显著小于仓库贮藏,也小于埋藏;抽薹开花过程中,叶片可溶性糖、可溶性蛋白、激素含量以及酶活性,冷库贮藏均低于仓库贮藏和埋藏.根据本试验结果推测,冷库贮藏条件下,于春季萝卜定植前 1 个月左右逐步升高冷库温度,给种株一个与传统贮藏方式相似的升温信号刺激继而启动花芽分化程序,定植后就能加快抽薹开花进程,还可以有效节约能源.该结论可为科学高效利用冷库、提高萝卜繁种量提供理论参考.
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猕猴桃MYB家族成员鉴定及其低温表达分析
《园艺学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：通过对‘红阳’猕猴桃基因组鉴定得到277个MYB家族成员并将其分为12个亚家族（S1～S12），其中多数序列属于R2R3-MYB，其次是MYB相关蛋白，仅鉴定到1个4R-MYB。S11和S12亚家族在进化上处于较早的位置，结构较为多样化，而S1和S2在进化上出现较晚。顺式作用元件分析显示，该家族主要含水杨酸、赤霉素和茉莉酸甲酯等相关植物激素元件，还有部分参与昼夜节律、低温、细胞周期等相关元件。密码子偏好性分析显示，猕猴桃MYB家族有3个高频密码子（UUG、AGA和AGG），基因的密码子偏好使用A/T，第3位碱基偏好更强。通过顺式作用元件分析和4个猕猴桃品种越冬期转录组数据分析筛选了9个可能参与低温胁迫响应MYB基因，对其在低温胁迫下的软枣猕猴桃‘龙成2号’中进行检测验证，确认这些基因参与猕猴桃对低温的响应。
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山东平邑地区金银花田蛴螬的种类调查
《山东农业科学 》 2023 北大核心
摘要：为明确山东平邑地区金银花田蛴螬种类、发生及为害情况，本研究于2021年通过灯光诱集及土壤取样方式对金银花田金龟子、蛴螬种类、发生动态进行系统调查，并统计蛴螬对金银花的为害率。结果表明，平邑地区金银花田金龟子种类主要为铜绿丽金龟（Anomala corpulenta）和暗黑鳃金龟（Holotrichia parallela）,蛴螬主要种类为东方绢金龟（Serica orientalis）、福婆鳃金龟（Brahmina faldermanni）和华北大黑鳃金龟（H.oblita）。在金银花田中，蛴螬发生量达到1～3头/m~2的中度发生指标，高峰期集中在7—9月，对金银花植株的为害率为48.33%～81.67%。
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点蜂缘蝽在山东小麦、玉米、大豆上的季节性发生规律研究
《山东农业科学 》 2023 北大核心
摘要：点蜂缘蝽是引起大豆“症青”的重要原因。为探究该虫在山东地区小麦、玉米、大豆上的季节性发生规律，本研究利用信息素诱捕的方式对桶型诱捕器和船型诱捕器的诱捕效果进行了评价，并监测了点蜂缘蝽在不同作物上的田间发生动态。结果表明，船型诱捕器的诱捕效果优于桶型诱捕器；小麦是点蜂缘蝽重要的春季寄主，4月中旬为高发期；大豆和玉米田高发期集中在7—8月。小麦、玉米、大豆上点蜂缘蝽的发生规律均与其生活史保持一致。山东不同区域点蜂缘蝽动态差异不显著，同一区域不同年份间也无较大差异。研究结果可为及时有效防治点蜂缘蝽提供参考。
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