科研产出
猪繁殖与呼吸综合征病毒山东株的分离鉴定
《莱阳农学院学报 》 2006 CSCD
摘要:在对山东省某规模化养猪场进行的繁殖障碍病血清学调查中检测到猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体阳性猪,从中分离到1株猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),并进行了初步鉴定。结果表明分离毒株能在HS.2H细胞上增殖产生细胞病变,经美洲型标准株PRRSV VR-2332阳性血清进行间接免疫荧光试验结果呈阳性反应,透射电镜可观察到直径60~70nm的病毒粒子,有囊膜。用针对PRRSV VR-2332的PCR引物对分离病毒进行RT-PCR扩增,检测结果阳性。将病毒接种血清阴性仔猪,检测到血清中出现病毒特异性抗体,但未见临床症状及明显的病理变化,将分离株命名为PRRSV SD株。
关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 SD株 分离鉴定
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鸡α-干扰素在毕赤酵母中的分泌表达、纯化及其抗病毒活性测定
《山东农业科学 》 2006
摘要:本试验将已构建的鸡α-干扰素重组酵母表达质粒pPIC-ChIFNα克隆至Pichia pastorisGS115基因组中,从阳性转化子中筛选出2株能高效表达鸡α-干扰素的重组酵母菌株,并对表达产物进行了纯化和抗病毒活性的测定。结果表明,Pichia pastoris表达的重组ChIFNα具有较高的抗病毒活性,其活性单位为570×104U/ml,结合蛋白定量计算其比活性为2 980×104U/mg。
关键词: 鸡α-干扰素成熟蛋白 Pichiapastoris 基因表达 分离纯化 抗病毒活性
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应用RT-PCR和病毒学方法检测低致病力禽流感感染的研究
《山东农业科学 》 2006
摘要:分别应用病毒分离和鉴定试验以及禽流感病毒(AIV)型特异性RT-PCR技术,对疑似H9亚型AIV感染的10份病死鸡组织病料进行了实验室诊断。结果有7份病例用上述两种方法检测均为阳性;2份病料仅分离到H9亚型AIV;1份病例仅H9亚型RT-PCR阳性。研究表明,对于H9亚型AIV临床组织样品的检测,病毒分离试验的敏感度高于RT-PCR。当检测因运输或消毒药物作用而导致病料中病毒死亡的H9亚型AI临床病例时,RT-PCR有明显的优势。将RT-PCR和病毒分离鉴定两种方法相结合,可提高临床样本的H9亚型AIV的检出率。
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美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位基因表达及其产物的纯化
《动物医学进展 》 2006
摘要:对原核中以包涵体形式高效表达的美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位区段进行了变性、复性与纯化研究。将美洲型PRRSV重组质粒pGEX-6P-1-N转化入E.coliBL21(DE3)细胞中,成功表达了重组蛋白GST-N,超声裂解复性后目的蛋白经GSTrap FF纯化试剂盒纯化后,纯度可达90%以上。将欧洲型PRRSV重组质粒PQE30-N转化入E.coliM15细胞中表达了重组蛋白His-N。超声裂解后目的蛋白经HisTrapHP蛋白纯化试剂盒纯化后,纯度可达95%以上。Western blot结果表明,两种蛋白分别被美洲型和欧洲型PRRSV阳性血清识别。纯化出的大量美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位区段,为PRRSV的鉴别诊断提供了抗原基础。
关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 美洲型 欧洲型 N蛋白抗原多肽 原核表达 纯化
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抗烟粉虱大豆种质资源筛选和抗性机制初探
《植物遗传资源学报 》 2005
摘要:烟粉虱(Bemisia tabaci Gennadius)近年来发生日益猖獗、危害日趋严重,防治比较困难,却未被列为主要经济害虫。筛选抗性种质和选育抗性品种是防治烟粉虱的有效措施。本研究对223份大豆种质资源进行了抗烟粉虱鉴定,筛选出滑皮豆等6份抗性较强的种质资源。调查了这223份种质资源的茸毛性状,测定了部分抗感烟粉虱品种的籽粒蛋白质和脂肪含量。结果表明,大豆品种对烟粉虱的抗性与叶片的茸毛性状有密切关系,无茸毛型抗性最强,茸毛紧贴型次之,茸毛直立型较差,茸毛斜立型抗性最差。大豆受烟粉虱危害程度与籽粒蛋白质和脂肪含量有密切关系,蛋白质含量越高受害越严重,脂肪含量越高受害越轻。根据鉴定结果,本研究提出了单叶平均感染烟粉虱0头为免疫,0.1-3.0头为高抗,3.1-10.0头为中抗,10.1-20.0头为中感,20头以上为高感的抗性鉴定标准。
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