科研产出
口蹄疫病毒链特异性荧光定量RT-PCR检测方法的建立
《黑龙江畜牧兽医 》 2015 北大核心
摘要：为了定量检测口蹄疫病毒(FMDV)的正链和负链RNA,揭示FMDV复制的分子机制,试验采用链特异性荧光定量RT-PCR(ssqRT-PCR)方法提取了FMDV的RNA,在FMDV链特异性反转录引物的5'端引入非病毒基因序列标签进行反转录,再经链特异性ssqRT-PCR扩增进行灵敏性、特异性、重复性检测。结果表明:FMDV基因组正链、负链RNA的链特异性ssqRT-PCR方法构建成功,该方法对FMDV正链和负链RNA检测的灵敏度达到1×101拷贝,具有较好的重复性和特异性。
关键词： 口蹄疫病毒(FMDV) 链特异性 非病毒基因序列标签 荧光定量RT-PCR(ssqRT-PCR) 基因组RNA 检测方法
盐酸林可霉素制剂中对乙酰氨基酚检测方法的研究
《山东农业科学 》 2015
摘要：采用Waters AtlantisT3(4.6 mm×250 mm,5μm)C18色谱柱,以磷酸盐缓冲液-甲醇(70∶30)作为流动相进行等度洗脱(流速1.0 m L/min);采用二极管阵列检测器,检测波长244 nm;进样量20μL,建立盐酸林可霉素制剂中非法添加对乙酰氨基酚检测的高效液相色谱方法。结果表明:对乙酰氨基酚在进样浓度0.02014~0.4028 mg/m L范围内均呈良好线性关系(R2=1.0000),平均回收率分别为100.15%(盐酸林可霉素注射液)和99.90%(盐酸林可霉素可溶性粉),检出限为0.01 mg/m L。该方法简便、准确、可行,适用于盐酸林可霉素制剂中非法添加对乙酰氨基酚的检测。
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冬季半开放式樱桃谷种鸭舍内环境参数监测与分析
《山东农业科学 》 2015
摘要：为了研究鸭舍内冬季环境参数的变化情况,本试验利用物联网环境智能检测仪测定了半开放式种鸭舍内温度、湿度、NH3和粉尘浓度的连续变化情况。结果表明:寒冷季节半开放式鸭舍内温度变化较为平稳,舍内平均气温8.82℃,日平均温差3.404℃。鸭舍内的平均湿度为69.64%,日平均湿度差为33.31个百分点;舍内湿度在凌晨和夜晚值较高,白天值较低。鸭舍内NH3浓度呈波浪式变化,表现为白天NH3浓度低,晚上高;而舍内粉尘浓度的变化则无规律可循。相关性分析表明,氨气浓度和粉尘浓度与舍内温度变化的相关性均不显著。
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山东泰安甜樱桃“花叶病”树体症状观察及病毒检测
《植物保护 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为了探明山东泰安患有"花叶病"的甜樱桃树体内感染病毒的种类,本研究以嫁接在3种不同砧木上的甜樱桃品种‘红灯’叶片为试验材料,提取植物样本总RNA,采用随机六聚体引物反转录,选取10种甜樱桃病毒作为检测对象,根据各病毒基因组序列设计特异引物,进行RT-PCR检测。结果显示,10种甜樱桃待检病毒中,5种病毒检测结果呈阳性,分别为PNRSV(Prunus necrotic ringspot virus,PNRSV)、PDV(Prune dwarf virus,PDV)、CVA(Cherry virus A,CVA)、CGRMV(Cherry green ring mottle virus,CGRMV)、LChV-2(Little cherry virus-2,LChV-2),各病毒检出率较高。各"花叶病"甜樱桃样品均至少同时感染2种病毒,多病毒复合感染比例较高。
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热重分析法测定氟唑活化酯的饱和蒸气压
《世界农药 》 2014
摘要：基于自由蒸发过程的Langmuir关系,利用梅特勒-托利多TGA/DSC1/1100LF型热重分析仪,建立采用热失重法快速测定化合物氟唑活化酯的低温饱和蒸气压的方法。采取阶梯升温方式,先在测定温度范围内较低的温度点恒温一定时间,获得满足测定精度所需要的质量损失,升温到下一温度进行测定,直至所需的最高温度。氟唑活化酯25℃时的饱和蒸气压为3.31×10~(-4)Pa。结果表明,利用热重法测定化合物的较低蒸气压,是传统蒸气压测定方法的很好补充,其结果与文献数据符合较好。测定方法系统误差低于1%。
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甜樱桃病毒病分子检测技术的研究
《果树学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：【目的】建立简便、快速、高效、准确的甜樱桃病毒分子检测方法。【方法】根据我国甜樱桃病毒病害的发生特点,先后建立和完善了几种主要病毒的单重RT-PCR、多重RT-PCR、纳米磁珠技术结合多重RT-PCR的检测方法,并对各检测方法的适用范围、检测效率进行比较分析。【结果】改进后的单重RT-PCR方法利用随机引物反转录得到的c DNA模板可同时用于多种病毒的特异性检测。多重RT-PCR方法可在同一管PCR反应中同时检测多种病毒。运用纳米磁珠技术结合多重RT-PCR的检测方法在植物病毒核酸提取环节简化了操作程序。【结论】该检测技术体系已应用于山东地区甜樱桃及中国樱桃等大批量植物样本的病毒检测工作之中,检测结果稳定、可靠。
关键词： 甜樱桃 病毒 检测 RT-PCR 多重RT-PCR 纳米磁珠
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