科研产出
基于变距光电传感器的小麦精播施肥一体机监测系统设计
《农业工程学报 》 2018 EI 北大核心 CSCD
摘要：为实现小麦精播施肥过程的实时监测,确保播种作业质量,该文设计了一种基于变距光电传感器的小麦精播施肥一体机监测系统。该监测系统以STM32单片机硬件系统为下位机,通过反射式光电传感器和旋转编码器分别获取种肥流动与种肥轴转动信息,判断精播机运行状态,并通过Modbus通讯协议将信息传输至MCGS触摸屏上位机人机交互界面实时显示。下位机排种监测电路仿真测试结果表明,放大电路对种管光电传感器检测距离的改变值为4~7 mm;上下位机通讯测试结果表明,数据传输内容准确率为100%;监测系统样机试验测试结果表明,故障报警准确率≥92.5%,种肥缺失、堵塞、泄漏响应时间分别≤0.2、≤0.3、≤0.3 s。该监测系统实现了对小麦精播施肥机作业的实时高精度监测,有助于提高小麦精播机作业质量。
关键词： 监测 设计 传感器 精播施肥机 变距 MCGS触摸屏
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乳粉中黄曲霉毒素M_1的检测能力验证
《乳业科学与技术 》 2018
摘要：设计并实施乳粉中黄曲霉毒素M_1(aflatoxin M_1,AFM_1)的检测能力验证计划,了解和评价实验室检测乳粉中AFM_1的检测能力和水平,识别实验室间存在的差异,促进实验室提高检测水平。参照CNAS—CL002《能力验证结果的统计处理和能力评价指南》制备分割水平对的样品,采用单因素方差分析和t检验对样品均匀性和稳定性进行分析。对能力验证结果进行稳健统计分析,通过Z值比分数评价实验室能力。结果表明:样品通过均匀性和稳定性的检验要求,满足能力验证计划要求;参加实验室49家,满意结果数为45家,满意率为91.8%;多数参加实验室的检测能力评价为满意,表明乳粉中AFM_1的检测水平总体良好。实验操作误差和数据处理不当是个别实验室结果离群的主要原因。
关键词： 黄曲霉毒素M1 检测 乳粉 实验室能力验证 稳健统计
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甘薯羽状斑驳病毒RT-LAMP快速检测方法的建立
《中国农业科学 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：【目的】甘薯羽状斑驳病毒(Sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)侵染甘薯造成重要危害,本研究旨在利用反转录环介导等温扩增技术(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)建立一种快速、高效检测SPFMV的方法。【方法】从Gen Bank上获得SPFMV外壳蛋白(coat protein,CP)基因的核苷酸序列,利用Primer Explorer V4设计4条RT-LAMP特异性引物SPFMV-FIP(5′-TAAGCGCGGCTGCC TTCATC-CATTCAACCACCCCTGCA-3′)、SPFMV-BIP(5′-TCGGTTGTTTGGTTTGGACGGA-ATCAGTTGTCGTGTGCCTC-3′)、SPFMV-F3(5′-GAGTCTTGCGCGATATGCA-3′)和SPFMV-B3(5′-ACCCCTCATTCCTAAGAGGT-3′),同时设计2条反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)的特异性引物SPFMV-F(5′-TCTAATGAGAACACTGAA TT-3′)和SPFMV-R(5′-TTGCACACCCCTCATTCCTAAG-3′)。分别设置F3/B3﹕FIP/BIP引物浓度比(1﹕1、1﹕2、1﹕4、1﹕6、1﹕8和1﹕10),d NTPs浓度梯度(0.025、0.125、0.225、0.325、0.425、0.525、0.625、0.725和0.825mmol·L-1),Betaine浓度梯度(0.4、0.7、1.0、1.3和1.6 mol·L-1),反应温度(59、61、63、65、67和69℃)和反应时间(20、30、40、50、60、70、80和90 min),对RT-LAMP反应体系各条件进行优化,确定最佳反应体系。通过测序及酶切对RT-LAMP产物进行鉴定。以携带SPFMV、甘薯C病毒(Sweet potato virus C,SPVC)、甘薯褪绿矮化病毒(Sweet potato chlorotic stunt virus,SPCSV)、甘薯病毒2(Sweet potato virus 2,SPV2)、甘薯潜隐病毒(Sweet potato latent virus,SPLV)、甘薯G病毒(Sweet potato virus G,SPVG)、甘薯褪绿斑病毒(Sweet potato chlorotic fleck virus,SPCFV)和健康甘薯叶片的总RNA为模板,分别进行RT-LAMP和RT-PCR特异性检测;带有SPFMV的甘薯总RNA进行10倍梯度稀释,以RNA原液、10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6和10-7稀释液为模板进行RT-LAMP和RT-PCR灵敏度测定。最后利用优化的RT-LAMP体系对山东省多地采集的SPFMV疑似病样进行检测,加入SYBR green I进行可视化检测。【结果】建立了SPFMV的RT-LAMP快速特异性检测方法,优化的反应体系:引物SPFMV-FIP/SPFMV-BIP为0.8μmol·L-1,SPFMV-F3/SPFMV-B3为0.2μmol·L-1,d NTPs为0.325mmol·L-1,Betaine为1 mol·L-1;65℃反应70 min。特异性试验显示本研究建立的RT-LAMP只对携带SPFMV的RNA能够扩增出典型的梯状条带。RT-LAMP最低可检测的RNA浓度为121.6×10-4 ng·μL-1,而RT-PCR最低能检测的RNA浓度为121.6×10-3 ng·μL-1,表明RT-LAMP的灵敏度比RT-PCR高10倍。田间样品检测,RT-LAMP扩增结果与可视化检测结果一致,表明本研究建立的RT-LAMP快速检测方法可有效应用到SPFMV的田间检测。【结论】建立的RT-LAMP快速检测方法灵敏度高、特异性好,适用于SPFMV的田间快速检测。
关键词： 甘薯 甘薯羽状斑驳病毒 反转录环介导等温扩增技术 检测
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谷物及饲料中青霉酸的污染和防控
《中国粮油学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：青霉酸是由不同株系的青霉菌和曲霉菌产生的次生代谢产物,具有致突变和致癌作用。圆弧青霉和软毛青霉是主要产青霉酸真菌,主要存在于谷类和饲料中。青霉酸的生物合成途径约由6步构成,1分子乙酰辅酶A同3分子丙二酸单酰辅酶A经缩合反应生成苔色酸,苔色酸经环裂解和脱羧作用而生成青霉酸。青霉酸具有细胞毒性、器官毒性、混合毒性。控制谷物和饲料原料质量、储藏及其加工运输过程,特别是控制好饲料水分和温度是控制青霉酸污染的关键。传统的检测方法包括生物学方法、免疫学方法、色谱法、质谱法等,目前单一种类真菌毒素的检测技术逐渐被多组分同时检测的方法代替。
关键词： 谷物 饲料 青霉酸 生物合成 毒性活性 检测 风险防控
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冬季肉鸡不同饲养模式下环境指标的监测与生产性能分析
《山东农业科学 》 2018
摘要：为了解山东省内具有代表性的三种肉鸡饲养模式(厚垫料饲养、网上平养和三层阶梯笼养)下环境指标与生产性能的差异,本试验对三种鸡舍分别进行10、25、35 d舍内二氧化碳、氨气、风速、光照、湿度和温度的监测,比较分析各种饲养条件中主要环境指标的差异;同时对比三种饲养模式对生产性能的影响。环境监测结果表明:三种饲养模式的温湿度、二氧化碳、氨气等环境指标有所差异,但从10 d到35 d大都表现为有害气体浓度逐渐增加,温度逐渐降低的规律;相同日龄的三种饲养模式比较结果表明:二氧化碳和氨气等有害气体浓度没有规律可循,氨气是25 d和35 d时,网上平养浓度最高,而笼养的浓度最低;生产性能试验结果表明,料肉比、成活率与出栏体重均是笼养最好。总之,不同饲养模式、不同日龄有害气体浓度以笼养相对较低,同时,笼养模式下生产性能表现最好。
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小麦植株中叶菌唑残留测定方法
《现代农药 》 2018
摘要：采用高效液相色谱建立小麦植株中叶菌唑残留测定方法。分别以乙腈、二氯甲烷为提取溶剂,通过Bond Elut Carbon固相萃取柱净化,SB-C_(18)色谱柱分离,Agilent 1260高效液相色谱仪测定。结果表明,当叶菌唑质量浓度为0.1～10.0 mg/L时,其质量浓度与色谱峰面积呈线性关系,相关系数为0.999 9。乙腈超声离心法的平均回收率为90.40%～98.39%,相对标准偏差为1.62%～5.10%;二氯甲烷萃取法的平均回收率为91.34%～95.00%,相对标准偏差为0.86%～3.89%。2种试验方法均容易操作,且灵敏度高。
关键词： 叶菌唑 残留 小麦植株 提取方法 高效液相色谱 测定
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层叠式笼养蛋鸡舍内环境参数的监测与分析
《黑龙江畜牧兽医 》 2018 北大核心
摘要：为了研究层叠式笼养蛋鸡舍内不同位置的温度、湿度、二氧化碳、粉尘等环境参数变化规律,试验通过对层叠式笼养蛋鸡舍前端和后端环境指标的持续监测,分析不同位置、不同季节有害气体、粉尘浓度差异及分布规律。结果表明:层叠式笼养蛋鸡舍内后端的温度、氨气和二氧化碳浓度极显著高于前端(P<0.01),湿度前端极显著高于后端(P<0.01);鸡舍内粉尘浓度07:00最高,PM2.5为(23.84±3.42)μg/m~3,PM10.0为(49.53±10.67)μg/m~3。说明鸡舍内空气质量在07:00时最差。从夏季、秋季到冬季温度、湿度逐渐降低,而氨气和二氧化碳浓度逐渐升高。
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鸡传染性支气管炎病毒N蛋白的表达及ELISA诊断试剂盒的研制与应用
《浙江农业科学 》 2018
摘要：为了建立一种鸡传染性支气管炎抗体检测的ELISA方法,本研究根据GenB ank中的传染性支气管炎病毒(IBV)山东分离株LC2的N基因序列,设计一对引物,扩增N基因,将目的基因与载体pE T-32a(+)连接,构建重组表达质粒pE T-32a-N,转化E.coli BL21(DE3),诱导表达融合蛋白pE T-32a-N,纯化目的蛋白,以纯化的重组蛋白为抗原建立鸡传染性支气管炎抗体检测的间接ELISA方法,并利用所建立的ELISA方法对临床血清样本进行检测。结果表明,IBV N基因可在大肠杆菌中稳定、高效地表达。Western-blot检测表明,表达的重组蛋白能与鸡传染性支气管炎阳性血清发生特异性反应。确定间接ELISA方法的抗原最佳包被浓度为2μg·孔~(-1),血清最佳稀释度为1:200,临界值为D450值≥0.297,建立的ELISA方法具有较好的敏感性、特异性和重复性。该方法与进口IDEXX试剂盒的符合率为96.25%,初步临床应用结果表明该方法可用于雏鸡传染性支气管炎母源抗体和免疫后抗体的消长变化的检测。综上所述,本研究所建立的N-ELISA方法是一种有效的鸡传染性支气管炎病血清学诊断的方法,并为进一步研究IBV N蛋白的免疫原性和抗感染保护作用奠定了基础。
关键词： 鸡传染性支气管炎病毒 N基因 表达 ELISA 抗体 检测
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