科研产出
气相色谱测定沼气成分的优化方法研究
《山东农业科学 》 2011
摘要：厌氧发酵过程中,沼气组成成分及其含量不仅是判断厌氧发酵所处阶段的重要指标,也能直观地反映厌氧发酵罐的运行情况。本试验用气相色谱优化方法对沼气三种主要成分CH4、CO2、H2S及其含量进行检测,结果表明,沼气各成分出峰时间间隔清晰,容易识别;精密度较好,甲烷、二氧化碳、硫化氢的标准偏差分别为0.0109%、0.0966%、0.1217%,变异系数分别为0.016%、0.314%、0.816%。该优化方法操作简单、方便,定性、定量准确可靠,是一种检测沼气成分的实用方法。
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大白菜EST-SSR反应体系优化及引物筛选
《科技导报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：探讨了大白菜EST-SSR反应体系的优化,利用优化的体系筛选部分引物。采用L16(44)正交设计,研究各主要参数的适宜浓度,建立适合大白菜EST-SSR反应的最佳体系。结果表明,各因素不同水平浓度对扩增结果均有一定影响,其中以引物浓度影响最大,其次是dNTP和Taq DNA聚合酶,最小是模板DNA用量。优化后的最佳体系(20μL)为:引物浓度1.0μmol/L,dNTPs0.25mmol/L,Taq酶0.5U,模板DNA70ng。利用优化的体系,根据大白菜EST序列设计引物126对,分别以2对抗、感病毒病的大白菜材料的基因组DNA为模板进行扩增,筛选出至少在一份材料中扩出多态性的引物19对。该优化体系可用于大白菜EST-SSR扩增,初步筛选的引物可用于大白菜病毒病分子标记的进一步研究。
关键词： 大白菜 EST-SSR 正交设计 体系优化 引物筛选
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花生RGA-SSCP实验条件的优化
《山东农业科学 》 2010
摘要：单链构象多态性(SSCP)技术是一种简便、灵敏的多态性检测方法,近年在植物研究中得到了较多应用。为了检测花生品种间抗病基因同源序列(RGA)的单核苷酸差异,对影响花生RGA-SSCP的电泳温度、电压、胶浓度、交联度、变性剂等因素进行了优化。结果表明,碱变性后的PCR产物(PCR产物与碱变性剂比例1∶2)在不加甘油的8%非变性聚丙烯酰胺凝胶(交联度为29∶1)、1×TBE电泳缓冲液、恒温4℃和600V条件下电泳5 h为最佳优化组合。用上述优化方法分析了抗、感北方根结线虫病的亲本及F2群体部分单株,获得了电泳条带细而清晰的SSCP图。该体系的建立对RGA-SSCP标记用于花生基因定位、遗传图谱构建、标记辅助选择等具有重要意义。
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樱桃SRAP-PCR体系优化及其遗传多样性分析
《果树学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：选取亲缘关系较远的3个不同基因型樱桃资源为试材,对影响SRAP标记PCR反应的模板、Mg2+、dNTPs、Taq酶及引物浓度进行了优化,建立了适合于樱桃SRAP标记的扩增体系。反应体系具体为:模板DNA75ng,dNTPs0.2mmol·L-1,Mg2+2.5mmol·L-1,引物0.3μmol·L-1,Taq酶1.0U,反应总体积20μL。采用优化的扩增体系,对45个樱桃种质材料进行了遗传多样性分析,筛选8对扩增清晰且多态性高的引物组合,检测位点共227个,其中多态性位点192个,占84.6%。应用NTSYS-pc软件进行聚类分析(UPGMA),结果表明45个樱桃品种可分为欧洲甜樱桃和中国樱桃2大类,品种间遗传相似系数在0.52～0.98;其中中国樱桃与甜樱桃种间的相似系数最小,表明2类种质具有不同的遗传背景;而组群内的不同品种资源表现了较高的遗传相似性。SRAP分子标记的聚类分析揭示了樱桃品种间亲缘关系与地理分布以及来源相关。
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以纤维素酯膜作为基底材料进行生物芯片杂交条件的优化
《中国生物制品学杂志 》 2009 CSCD
摘要：目的优化以纤维素酯膜作为基底材料进行生物芯片杂交的条件。方法分别用不同厂家、不同孔径的基底膜进行杂交,筛选最佳基底膜;以不同长度探针片段、不同核酸标记方式进行杂交,筛选最佳探针长度和靶基因标记方法;分别在30、40和50℃杂交0.5、1.0和1.5h,比较芯片杂交效果。结果美国Millipore公司的0.45μm混合纤维素酯膜为最佳基底膜;Biotin-16-dUTP探针标记方法和在40℃杂交1.0h为最佳杂交条件。结论优化了以纤维素酯膜作为基底材料进行生物芯片杂交的条件。
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杂交棉新品种W8225配套栽培技术研究
《中国种业 》 2009
摘要：2004-2007年开展了W8225配套栽培技术研究。结果表明:W8225地膜覆盖栽培技术措施的优化组合为:每hm2密度为42000株,追施尿素300kg、磷酸二铵375kg、硫酸钾225kg,单株摘早蕾8个。密度和摘早蕾对棉花产量、品质影响最大,在棉花栽培中应高度重视合理密植问题,早发棉花应适度摘早蕾。
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