科研产出
核桃JrCBF基因的克隆与表达和单核苷酸多态性分析
《植物遗传资源学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：根据CBF基因氨基酸保守序列设计简并引物,运用cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆核桃JrCBF基因cDNA全长序列。用实时荧光定量PCR分析JrCBF基因在低温胁迫下的表达模式,并分析JrCBF基因的单核苷酸多态性。结果获得长度为879 bp的CBF基因cDNA全长序列,编码214个氨基酸,命名为JrCBF;低温能诱导JrCBF基因的表达,4℃处理2 h后表达量开始增加,8 h后达到最大值;自然越冬条件下,JrCBF基因在花芽中表达量呈现先上升后下降的趋势,在寒冬时期(1月份)表达量最高;单核苷酸多态性分析JrCBF基因序列中有28个SNPs位点和7个Indels标记,存在2个突变热点区;单倍型分析显示15份材料可分为9个单倍型,单倍型多样性为0.9238。本研究为通过基因工程手段培育抗寒核桃品种和分子标记辅助育种提供了帮助。
关键词： 核桃 基因克隆 实时荧光定量PCR 单核苷酸多态性
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低温胁迫对核桃枝条活性氧代谢的影响
《江西农业学报 》 2014
摘要：以抗寒性不同的香玲和鲁果12号核桃品种为试材,在-15、-20、-25、-30、-35℃低温梯度胁迫下,分别测定了离体枝条的质膜相对透性、MDA和H2O2含量、O2-·产生速率、SOD和CAT保护酶活性等指标,分析了低温胁迫对核桃枝条活性氧代谢的影响,结果表明:低温胁迫显著增加了核桃枝条的膜透性、O2-·产生速率、MDA和H2O2含量,但耐寒品种鲁果12号的增幅低于香玲品种;2个品种的SOD酶活性均呈现"升—降—升—降"的趋势,CAT酶活性则先升高后降低,但不同品种之间的变化幅度较大;由此可知,鲁果12号在低温胁迫期间可有效地增加保护酶活性,抑制H2O2的积累,从而降低活性氧对核桃的伤害,这可能是其抗寒性较强的重要原因之一。
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核桃Y_2SK_2型脱水素基因JrDHN的克隆、表达和单核苷酸多态性分析
《园艺学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：采用RT-PCR和RACE技术从‘香玲’核桃(Juglans regia L.‘Xiangling’)叶片中克隆了1个脱水素基因JrDHN(GenBank登录号KC503061.1),其全长1 056 bp,具有528 bp的开放阅读框,编码175个氨基酸组成的多肽,具有LEA家族成员的特征多肽序列,属于典型的Y2SK2型脱水素。以核桃18S基因为内参,对‘香玲’核桃JrDHN在4℃胁迫下的表达模式进行了初步的研究,结果表明低温诱导下叶片中JrDHN的表达增加,4℃处理4 h后达到最大值;自然越冬条件下,花芽中JrDHN表达量呈先上升后下降的趋势,在12月份表达量最高,推测JrDHN在核桃对低温胁迫响应中发挥重要功能。‘香玲’JrDHN在雌花中表达量高,其次是叶片和树皮,在花芽中最低。单核苷酸多态性分析JrDHN序列中有30个SNPs位点和11个Indels;单倍型分析显示12份核桃材料可分为10个单倍型,单倍型多样性为0.9697。
关键词： 核桃 脱水素基因 定量RT-PCR 单核苷酸多态性
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低温胁迫对核桃枝条活性氧代谢及AsA-GSH循环的影响
《中国果树 》 2013 北大核心
摘要：以耐寒性不同的鲁果12号和香玲核桃品种为试材,在-15、-20、-25、-30、-35℃低温处理下,研究了离体枝条的质膜相对透性、膜脂过氧化程度、过氧化氢(H2O2)含量以及抗坏血酸-谷胱甘肽(AsA-GSH)循环中的相关物质含量及酶活性等指标,分析其耐寒机理。结果表明,低温胁迫明显增加了核桃枝条的膜透性、超氧阴离子自由基(O2-·)产生速率、丙二醛(MDA)和H2O2含量,但耐寒品种鲁果12号的增幅低于香玲;低温胁迫期间,鲁果12号枝条中抗坏血酸(AsA)、谷胱甘肽(GSH)含量以及AsA/DHA值和GSH/GSSG值的降幅低于同温度处理的香玲,脱氢抗坏血酸(DHA)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量的增幅低于同温度处理的香玲;抗坏血酸过氧化物酶(APX)、单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)、脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)、谷胱甘肽还原酶(GR)活性的增幅高于同温度处理的香玲。表明鲁果12号在低温胁迫期间能够保持较高的AsA-GSH循环效率,可有效抑制H2O2的积累,降低活性氧的伤害。
关键词： 核桃 鲁果12号 香玲 低温胁迫 活性氧代谢 AsA-GSH循环
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核桃GAI基因的克隆和序列分析
《山东农业科学 》 2013
摘要：DELLA蛋白是赤霉素信号传导通路中一类重要的负调节因子。利用RT-PCR技术以香玲核桃叶片为试材,克隆得到核桃DELLA蛋白基因JrGAI。对基因和编码蛋白序列进行分析,结果表明,JrGAI基因开放阅读框(ORF)为1 837 bp,编码612个氨基酸;生物信息学分析表明,JrGAI编码蛋白具有DELLA蛋白的典型结构域;利用BLASTx和DNAMAN软件进行相似性分析发现JrGAI编码蛋白氨基酸序列与其它植物的DELLA蛋白具有较高的同源性,其中与辽宁2号核桃同源性最高,达到99%。核桃JrGAI基因的克隆为其进一步研究应用奠定了基础。
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新疆与内地核桃品种的品质差异分析
《新疆农业科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：【目的】综合分析新疆与内地11个不同品种核桃内在营养指标,探讨不同品种核桃营养成分的差异性,评价其品质优劣性,为针对性研究开发新疆优质核桃提供必要的参考。【方法】在田间采样、室内化学分析测定的基础上采用主成分分析的方法进行分析。【结果】确定采用可以代表优良品质94.90%综合信息的7个重要主成分,以此来反映核桃的品质要求,并计算出各样品重要主成分值和每个样品的综合评价函数得分。不同品种核桃综合营养水平表现为:中林1号>泡核桃>晋龙1号>绿岭>香玲>辽宁1号>辽核3号>温185>鲁光>辽核1号>新新2号。【结论】与内地测试核桃品种相比较,新疆新新2号、温185两个核桃品种蛋白质、氨基酸、单宁等指标含量相对丰富,但在综合指标评定上不占有优势。
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