科研产出
果树基因组DNA的提取和PCR扩增测序方法
《分子植物育种 》 2007 CSCD
摘要:为避免多年生果树组织中的多糖和酚类物质影响基因组DNA的提取质量,在CTAB提取缓冲液中加入2%PVP-40和2%β-巯基乙醇,以改进的CTAB提取方法从苹果嫩叶中提取基因组DNA。所得DNA样品D_(260nm)/D_(280nm)比值为1.98~2.05,纯度高。当用DNA样品和设计的特异引物进行PCR扩增时,其PCR产物只出现一条清晰电泳谱带,质量满足测序要求,采用DNA纯化试剂盒纯化后可直接用于测序。该方法已成功用于"国光"和"金冠"苹果的基因组DNA测序,是一个操作简便、快捷和高效的方法,非常适用于果树基因组DNA的提取和测序。
关键词: 苹果 基因组DNA DNA提取 PCR产物 DNA测序
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苹果α-法尼烯合酶基因组结构和序列的多态性分析
《园艺学报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要:通过设计引物进行PCR扩增、测序、拼接序列,以及与GenBank中的cDNA序列(登录号AY182241)进行比对,获得α-法尼烯合酶基因(AFS)的基因组序列和内含子/外显子结构。获得的AFS基因序列已在GenBank注册(登录号DQ901739),它有6个内含子和7个外显子,编码一个大小为576个氨基酸的蛋白质。间隔外显子的6个内含子相位分别是0、1、2、2、0、0,其大小分别是108、113、>1000、125、220和88bp,7个外显子的推导氨基酸序列大小分别是57、89、127、73、48、83和99。编码的蛋白质中有3个序列模式(motif),RR(X8)W模式的编码基因序列在基因5′端的外显子1上,RxR模式和DDxxD模式的编码基因序列在外显子4上。将获得的AFS基因序列与GenBank中的cDNA序列(登录号AY523409)进行比对,结果发现两序列间有6个单核苷酸多态性,其中4个引起氨基酸突变。有意义的是,1个氨基酸突变(291R→G)发生在RxR模式上,此氨基酸突变以及其它突变是否与苹果α-法尼烯合成能力和虎皮病发生能力有关,值得进一步探讨。
关键词: 苹果 α-法尼烯合酶 基因组DNA 多态性 虎皮病
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金冠苹果成熟胚离体诱导四倍体的研究
《园艺学报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要:以自然授粉的‘金冠’苹果种子为材料,研究了秋水仙素处理成熟胚离体诱导四倍体技术和嵌合体分离方法。结果表明:将完整胚在0.5%秋水仙素+1%二甲基亚砜的混合溶液中暗处理48h,然后接种在MS+TDZ 1.0 mg·L~(-1)+IBA 0.5 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂6g·L~(-1)的再生培养基中,变异率高达10.6%。与二倍体相比,四倍体试管苗生长缓慢,节间变短,叶片增大,叶形指数趋小化,气孔密度降低,保卫细胞增大。经压片法鉴定茎尖染色体数和流式细胞仪分析DNA含量,表明多数变异植株为同质四倍体。利用叶片离体再生器官技术,从诱导获得的嵌合体植株中分离出同质突变体。
关键词: 苹果 秋水仙素 离体诱导 多倍体 四倍体 嵌合体分离 多倍体育种
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哒螨灵在苹果上的残留量检测与消解动态
《农药学学报 》 2007 CSCD
摘要:研究了哒螨灵在苹果上的残留分析方法及其在苹果中的消解动态和最终残留量。哒螨灵经乙酸乙酯-丙酮(1∶1,体积比)提取后,用弗罗里硅土净化、浓缩、定容,用带ECD检测器的气相色谱仪测定。哒螨灵的最小检出量为1.0×10-11g,最低检出浓度为0.02mg/kg,回收率在83.6%~104.1%之间,变异系数为3.0%~4.3%。2006年在山东两地的田间残留试验结果表明,哒螨灵在莱州和五莲苹果中的消解半衰期分别为4.1和3.8d,最终残留量分别为0.059和0.040mg/kg。
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苹果果肉饮料生产工艺研究
《现代食品科技 》 2007
摘要:本研究以苹果原浆为主要原料,对苹果果肉饮料生产工艺及配方进行了研究,通过对各操作要点、工艺参数及对各辅料的添加量的对比实验,得出了制作色香味俱佳的苹果果肉饮料的配方。其配方为:苹果原浆45%,白砂糖7.5%,果葡糖浆2.5%,酒石酸0.011%,苹果酸0.020%,抗坏血酸0.05%,黄原胶0.06%,CMC0.05%,乙基麦芽酚5~10mg/L,香精18088#0.003%,香精10057#0.006%,适量的天然β-胡萝卜素,另还可添加适量其它果汁来强化口味。
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果实套袋对‘皇家嘎拉’苹果树净光合速率的影响
《园艺学报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要:以‘皇家嘎拉’(Royal Gala)苹果为试材,研究了果实套袋对树体光合特性的影响,测定了套袋树外围和内膛叶片的光响应曲线、CO2响应曲线以及光合的日变化规律。试验结果表明,套袋对树体外围叶片的光合性能无显著影响,但使内膛光强变弱,光合时间变短,内膛叶片最大净光合速率(Pn)16·5μmol·m-2·s-1,仅为对照的68%,其日平均光合速率仅为5·25μmol·m-2·s-1,明显低于对照,羧化效率(CE)也明显降低。
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