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果树基因组DNA的提取和PCR扩增测序方法

文献类型： 中文期刊

作者： 苑克俊 1 ; 刘庆忠 1 ; 艾呈祥 1 ; 王绛辉 2 ;

作者机构： 1.山东省果树研究所

2.山东省农业科学院

关键词： 苹果;基因组DNA;DNA提取;PCR产物;DNA测序

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2007 年 5 卷 S1 期

页码： 173-176

收录情况： CSCD

摘要： 为避免多年生果树组织中的多糖和酚类物质影响基因组DNA的提取质量,在CTAB提取缓冲液中加入2%PVP-40和2%β-巯基乙醇,以改进的CTAB提取方法从苹果嫩叶中提取基因组DNA。所得DNA样品D_(260nm)/D_(280nm)比值为1.98～2.05,纯度高。当用DNA样品和设计的特异引物进行PCR扩增时,其PCR产物只出现一条清晰电泳谱带,质量满足测序要求,采用DNA纯化试剂盒纯化后可直接用于测序。该方法已成功用于"国光"和"金冠"苹果的基因组DNA测序,是一个操作简便、快捷和高效的方法,非常适用于果树基因组DNA的提取和测序。

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