科研产出
葡萄根癌病研究进展及防治措施
《中外葡萄与葡萄酒 》 2022 北大核心
摘要:葡萄根癌病由葡萄土壤杆菌(Allorhizobium vitis)引起,主要通过伤口侵染,促使植物细胞产生过量的生长激素,从而形成瘤状物,影响植株的营养吸收,进而降低葡萄产量和品质.本文综述了葡萄根癌病的发病症状、病原菌种类、病原菌的基因组信息及分类地位,比较分析了基于特异性引物建立的葡萄土壤杆菌的PCR、荧光定量PCR、数字微滴PCR、环介导等温扩增技术等分子生物学检测技术的优缺点,阐述了病原菌的发病机制及对该病的综合防治方法,为葡萄根癌病的后期研究及生产防治提供参考.
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丹参根腐病病原菌的分离、鉴定及防控药剂筛选
《山东农业科学 》 2022 北大核心
摘要:本试验对分离自山东省蒙阴县连城镇对山庄村的丹参根腐病病原菌进行形态学、分子生物学鉴定和致病性测定,确定其病原菌为木贼镰刀菌(Fusarium equiseti)和尖孢镰刀菌(F.oxysporum).对生产上常用的5种药剂(吡唑醚菌酯、嘧菌酯、丙环唑、苯醚甲环唑、枯草原粉)进行室内药剂筛选和盆栽药效筛选试验,结果表明,浓度为600 mg/L的10%苯醚甲环唑药剂防治效果为88.99%,3000 mg/L的40%丙环唑药剂防治效果为91.96%,对丹参根腐病的防治效果良好.本研究可为丹参根腐病的防治提供理论依据,可考虑在田间生产中进行推广.
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2018~2021年传染性喉气管炎在山东商品肉鸡中的发生和防控
《家禽科学 》 2022
摘要:2018~2021年间,山东部分地区的商品肉鸡等陆续发生了278例传染性喉气管炎(InfectiousLaryngotracheitis,ILT)疑似病例。经实验室PCR检测和病原分离鉴定,初步确诊为传染性喉气管炎病毒(InfectiousLaryngotracheitisvirus,ILTV)。利用SPF鸡胚,进行绒毛尿囊膜接种,结果分离到23株ILTV。选取10株ILTV毒株,对其结构蛋白gB基因进行了测序,比较了其核苷酸同源性,绘制了系统发育树,揭示了ILTV分离株及其与疫苗株的关系。此外,本文还分析了疫苗免疫在防控过程中所起的关键作用,对于如何预防和控制ILT具有重要的指导意义。
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金银花炭疽病病原菌的分离鉴定和qPCR检测
《中药材 》 2022 北大核心 CSCD
摘要:目的:分离鉴定金银花炭疽病病原菌,并建立该病原菌的实时荧光定量PCR(qPCR)检测体系.方法:采集金银花炭疽病病叶标本,对病原菌进行分离和纯化,利用柯赫氏法则检测病原菌的致病性,通过形态学观察结合分子生物学分析鉴定病原菌;基于病原菌的ITS序列设计特异引物和TaqMan荧光探针,并基于该病原菌特异引物的扩增产物制备重组质粒标准品,利用标准品DNA构建qPCR的标准曲线;并对建立的qPCR方法进行特异性、灵敏度和实际样本验证.结果:明确从金银花炭疽病病叶片中分离纯化的菌株为胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeos-porioides.建立的qPCR快速检测方法能够特异性检测该病原菌,灵敏度高,最低检测限为2.94×102 copies/μL,比常规PCR检测灵敏度提高100倍.实际样本验证结果显示,在20例金银花病叶中,4例为炭疽病阳性,与DNA测序结果相符.结论:本研究明确胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides为金银花炭疽病的病原菌,所建立的qPCR方法能对金银花炭疽病进行快速、准确的检测,可以为该病害的早期防治提供技术支持.
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鸭源致病性大肠杆菌的分离鉴定及辣木叶水提物抑菌效果分析
《家禽科学 》 2021
摘要:大肠杆菌病是严重危害养鸭业的一类细菌性疾病,临床上多使用抗生素治疗,但耐药菌株的增多使抗生素的治疗效果大大下降,同时带来食品安全隐患。因此,筛选安全、天然抑菌药物成为研究热点。本试验从疑患大肠杆菌病死鸭无菌采集病料,分离出1株细菌,并对分离的细菌进行形态特征、生化试验、药敏试验、16S rDNA遗传分析,最终判定该分离菌为大肠杆菌。随后,选用本实验室提取的辣木叶水提物(MLHE)进行体外试验验证抑菌活性,利用微量肉汤稀释法检测MLHE最小抑菌浓度(MIC)、分光光度计测定OD630细菌生长曲线以及半固体培养基测定MLHE对分离大肠杆菌丛动能力的影响。结果表明,0.25g/mL的MLHE可显著抑制大肠杆菌的增殖及丛动能力。该研究结果为指导鸭大肠杆菌临床用药及防控提供了理论依据。
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绍兴一株牛传染性鼻气管炎病毒的分离与鉴定
《畜牧产业 》 2021
摘要:本研究对绍兴某疑似发生流行病牛场的送检样品进行实验室检测,将检测信息反馈给该牛场作为疫病防控依据。样品经接种MDBK细胞、PCR鉴定、序列分析试验。样品接种MDBK细胞出现细胞病变,PCR扩增出Bo HV-1目的条带,序列分析与Bo HV-1参考株相似性为99%,分离株毒价为1×106.187 TCID50/0.1 mL。证明分离获得的毒株为牛传染性鼻气管炎病毒是此次该牛场引发流行病的病原之一,为牛场疫病防控提供科学依据,同时为后续研制IBR相关疫苗提供了毒种准备。
关键词: 牛传染性鼻气管炎病毒 分离 鉴定
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新型鸭呼肠孤病毒山东株的分离鉴定及致病性分析
《中国兽医杂志 》 2021 北大核心
摘要:本试验采用病毒分离培养、RT-PCR扩增、测序分析、致病性试验等方法,以探索山东菏泽地区商品肉鸭养殖场内樱桃谷鸭脾脏坏死、瘸腿症状的病因。结果显示,鸡胚培养发病鸭的肝脏和脾脏组织悬液分离出1株病毒;该病毒株S1基因与新型鸭呼肠孤病毒的同源性为94%~96%,与鹅呼肠孤病毒的同源性为95%,与番鸭呼肠孤病毒的同源性为49%~50%,与禽呼肠孤病毒同源性为44%~48%,从而确定该病毒株为新型鸭呼肠孤病毒;该病毒株经尿囊腔接种于7日龄SPF鸡胚后,胚体在72~96h内集中死亡,出现水肿、出血症状;该病毒株在Vero细胞上可产生明显的空泡化病变;该病毒株在1日龄雏鸭可回归出与临床一致的脾脏坏死,攻毒后第8周,可观察到50%的鸭发生瘸腿,同时肌肉和关节处可剖检到干酪样物。由此判断,新型鸭呼肠孤病毒感染是导致该养殖场鸭脾脏坏死和瘸腿的主要原因。
关键词: 新型鸭呼肠孤病毒 脾脏坏死 瘸腿 分离鉴定 RT-PCR
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