科研产出
甜瓜品系萌发期耐盐性鉴定及筛选
《中国瓜菜 》 2024
摘要：为了解不同甜瓜品系的耐盐程度，明确萌发期耐盐性评价指标，采用0、50、100、150、200、250 mmol·L-16个浓度梯度的NaCl溶液对8份甜瓜材料进行5 d萌发期盐胁迫处理，筛选出200 mmol·L-1为盐胁迫适宜浓度；用0和200 mmol·L-1NaCl溶液对213份甜瓜材料进行5 d萌发期胁迫处理，调查各甜瓜材料的发芽势、发芽率、发芽指数、根长、鲜质量、活力指数等6个指标，利用相关性分析、主成分分析、隶属函数分析、系统聚类等方法对其进行耐盐性评价。研究结果表明，主成分分析法将6个耐盐指标综合为1个主成分，可代表甜瓜耐盐性79.23%的原始数据信息量；发芽率、发芽势、发芽指数、根长为甜瓜萌发期耐盐性材料鉴定的重要指标；可将207份材料分为四个等级，分别为耐盐、较耐盐、盐敏感、盐极敏感材料各39、73、40、55份。研究结果为耐盐甜瓜材料鉴定、培育和耐盐基因挖掘提供材料和方法支撑。
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鸡呼肠孤病毒基因Ⅰ型变异株的分离鉴定和致病性分析
《中国兽医杂志 》 2024 北大核心
摘要：为探究导致山东省某肉种鸡场种鸡出现腿病的病原并进行致病性分析，本试验从该肉种鸡场收集病料，进行鸡胚分离、细胞传代、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测、序列分析、商品肉鸡的致病性试验和免疫攻毒保护试验。结果显示，分离获得1株鸡呼肠孤病毒(ARV),命名为ARV-LL-2020,该病毒对鸡胚的致死率为100%,在鸡肝癌细胞系(LMH)上具有较强的适应性。ARV-LL-2020毒株与经典的S1133疫苗株同属基因Ⅰ型，但两者的主要抗原σC基因的核苷酸同源性为73.6%,氨基酸同源性为59.1%。ARV-LL-2020毒株回归商品肉鸡能复制出与实际生产中完全一致的发病症状。S1133株商品化弱毒活疫苗对ARV-LL-2020毒株的保护率仅有50%。结果表明，导致种鸡腿病的ARV-LL-2020毒株是1株ARV基因I型变异株，目前S1133株商品化弱毒活疫苗无法对其提供完全保护。
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三株新型鸭源微RNA病毒分离毒株的全基因组序列分析
《畜牧兽医学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：分离新型鸭源微RNA病毒进行全基因组测序并进行遗传进化分析。对本实验室2021年不同来源的种鸭和肉鸭病料进行PCR检测，初步确定存在一种未知分类的新型微RNA病毒感染。取病死鸭病料组织处理后接种SPF鸡胚分离病毒，设计引物对分离到的病毒进行PCR检测，通过重叠PCR方法进行全基因组扩增测序。将分离病毒各蛋白氨基酸序列两两比对，同时选取GenBank数据库中微RNA病毒代表毒株序列绘制系统进化树，并对主要蛋白P1、2C、3D序列比对分析。结果显示：共分离到三株微RNA病毒，分别命名为21101株、21016株和21075株(GenBank登录号：OQ927377～OQ927379)。基因组长度分别为7 445、7 445和7 447 bp,均包含一个编码2 141个氨基酸的开放阅读框(ORF),可划分为P1、P2、P3三个部分，符合微RNA病毒序列特征。基于全基因组序列遗传进化分析发现，三株分离病毒与本实验室前期分离的Duck/FC22/China/2017(GenBank登录号：MN102111)毒株及上海兽医研究所分离的Duck/AH15/CHN/2015(GenBank登录号：MT681985)位于同一分支，与鸭甲型肝炎病毒(Duck hepatitis A virus, DHAV)遗传距离最近。分离的三株鸭源微RNA病毒进行全基因组测序及遗传进化分析发现，与目前已知的两株微RNA毒株为同一类新型鸭源微RNA病毒。
关键词： 新型微RNA病毒 分离鉴定 基因组测序 遗传进化分析
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一株鸭源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析
《家禽科学 》 2024
摘要：为确认山东省德州市某肉鸭场疑似为鸭多杀性巴氏杆菌感染的病原菌，本试验对于送检病死鸭进行剖检、细菌分离培养、菌落观察、生化试验、PCR鉴定、16Sr RNA基因测序分析以及药敏试验等方法鉴定该病原菌。结果显示：分离得到的病原菌在含有5%胎牛血清的营养琼脂培养基中呈现为圆形、湿润、光滑的灰白色菌落，革兰氏染色为阴性短杆菌，瑞氏染色呈现两极浓染；分离菌株的生化特性可以发酵葡萄糖、蔗糖以及甘露醇，硫化氢、氧化酶等试验阳性；细菌特异性PCR扩增片段与预期条带大小一致；16S rRNA基因序列系统进化树显示与多杀性巴氏杆菌同源性为99%；分离菌株对于新霉素、阿莫西林、氨苄西林、头孢噻肟、林可霉素具有耐药性，对于氟苯尼考、恩诺沙星、多西环素、粘杆菌素B、卡那霉素、大观霉素敏感。本研究结果为鸭源多杀性巴氏杆菌病的防治提供一定参考依据。
关键词： 鸭 多杀性巴氏杆菌 分离鉴定 16S rRNA 耐药性
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2020-2023年山东地区13株3型鸭甲型肝炎病毒的分离鉴定及VP1基因序列分析
《中国家禽 》 2024 北大核心
摘要：为研究2020—2023年山东地区3型鸭甲型肝炎病毒的流行变异情况，试验采集了山东地区13份疑似鸭肝炎病毒感染的病料，通过病毒分离、RT-PCR扩增鉴定，并进行VP1基因测序及遗传变异分析。结果显示：共分离到13株3型鸭甲型肝炎病毒，均属于GⅠa分支，且分属于GⅠa分支不同小分支，其中2020年分离株（20148、20149）与2021年商品肉鸭分离株（SP21042）核苷酸相似性在98.8%～100%;2023年商品鸭分离株（SP23012、SP23014、SP-2、SP-3、SP23009）核苷酸相似性在99.7%～100%;2021年种鸭分离株（21083）与2022年、2023年种鸭分离株（22443、22468、BL23028）、2023年商品鸭分离株（SP23010）核苷酸相似性在98.8%～99.4%，小分支内相似性均高于98.8%，不同小分支间相似性在96.9%～98.2%;2023年部分3型DHAV分离株VP1基因出现了个别氨基酸位点的突变。研究表明，山东地区分离的13株GⅠa分支鸭甲型肝炎病毒VP1基因出现了变异，需要加以关注。
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一株肉种鸡源鸭疫里默氏杆菌分离鉴定及致病性研究
《中国家禽 》 2024 北大核心
摘要：为探究鸭疫里默氏杆菌对鸡的致病力,试验采集疑似感染鸭疫里默氏杆菌的病死肉种鸡肝脏进行病原的分离培养与纯化、革兰氏染色、生化试验、血清型鉴定、16S rRNA基因测序分析及药敏试验,并将分离菌株在SPF鸡、樱桃谷鸭上进行致病性试验.结果显示:分离到1株血清1型鸭疫里默氏杆菌,该菌株与鸭源、鸡源、鹅源鸭疫里默氏杆菌的相似性分别为99.24%~99.47%、99.16%~99.31%、99.04%~99.20%;该分离株对恩诺沙星、卡那霉素、头孢噻肟、多黏菌素B和多西环素较为敏感,对SPF鸡致病性较弱,可引起一过性精神沉郁和泡沫粪,对樱桃谷鸭有较强的致病性,可引起死亡和严重的纤维素性心包炎、肝周炎和气囊炎.研究表明分离的肉种鸡源RA对鸡致病力相对较弱,结果为临床鸡群感染RA的诊断与防控提供参考.
关键词： 肉种鸡 血清1型鸭疫里默氏杆菌 分离鉴定 致病性
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基于形态和分子数据的山东梨园新成灾害螨柑橘全爪螨的鉴定
《昆虫学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】本研究旨在准确鉴定山东梨园一种新成灾害螨，为其进一步研究和有效防控奠定基础。【方法】采用体视显微镜直接观察雌成螨的形态特征，制作雄成螨的侧面观玻片标本，观察其阳茎形态特征，进行形态鉴定。从单头雌成螨中提取基因组总DNA,以螨类特异性引物扩增线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ（cytochrome oxidase subunitⅠ, COⅠ）基因及核糖体DNA第一内转录间隔区（internal transcribed spacer 1, ITS1）和第二内转录间隔区（internal transcribed spacer 2, ITS2）基因并测序，所得序列在NCBI网站上进行Blastn比对，下载与其一致性高的相关基因序列构建系统发育树和计算遗传距离，进行分子鉴定。【结果】结果表明，梨树上害螨的雌成螨背部有粗大突起，可确定为全爪螨属Panonychus害螨。雄螨阳茎特征与柑橘全爪螨Panonychus citri的很相似，其COⅠ, ITS1和ITS2基因序列均与柑橘全爪螨的相应序列具有很高的同源性（核苷酸序列一致性在99%以上）,基于COⅠ, ITS1和ITS2基因序列计算的其与柑橘全爪螨间的遗传距离均远低于其与全爪螨属其他种间的遗传距离；在基于COⅠ, ITS1和ITS2基因序列构建的系统发育树上，梨树上害螨均分别与柑橘全爪螨以很高的置信度（分别为99%, 99%和100%）聚在同一分支。【结论】形态特征结合分子数据分析可以确定山东梨园中新暴发成灾的害螨为柑橘全爪螨，说明柑橘全爪螨在中国的分布范围北移了，需引起高度重视。
关键词： 柑橘全爪螨 梨园 害螨 鉴定 阳茎 COⅠ ITS1 ITS2
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苹果主要真菌病害广谱拮抗木霉菌的筛选鉴定及田间防效
《中国生物防治学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为筛选广谱苹果病原真菌拮抗菌，采用平板对峙法、生长速率法，从山东多地果园分离筛选出对4种常见苹果病原真菌具有明显拮抗作用的两株木霉菌YTLY-13和YTLY-36，经其形态特征及翻译延伸因子（translation elongation factor 1,TEF1）序列同源性鉴定，结果表明，两菌株分别为绿木霉Trichoderma virens和哈茨木霉Trichoderma harzianum，对病原菌菌丝生长均有明显抑制作用，抑菌率均在68.45%以上，其中对苹果腐烂病菌的抑菌率相对稍高，达73.92%以上。田间药效结果表明，菌株YTLY-36对4种苹果真菌病害防效显著高于菌株YTLY-13的防效，与代森联、枯草芽胞杆菌防效相当，且生长速度快、发酵简单，具备开发成为果树专用广谱微生物杀菌剂的潜力。
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猪流行性腹泻病毒变异株分离鉴定及攻毒模型建立
《生物学杂志 》 2023 CSCD
摘要：猪流行性腹泻（PED）是由猪流行性腹泻病毒（PEDV）引起的一种急性高度接触性肠道传染病。研究成功分离到一株PEDV,命名为PEDV-20200946。对该毒株的S基因进行测序分析，遗传进化树结果显示，该分离毒株属于G2亚群。通过Reed-Muench法测定该毒株毒价为106.1 TCID50/mL。通过动物回归试验进一步探究该分离毒株对仔猪的致病情况，将12头20日龄仔猪平均分为3组，分别为口服攻毒组、口服+肌注攻毒组和对照组。攻毒后观察临床症状，72 h后采集各组的粪便及发病猪的肠道进行RT-PCR检测和免疫组化分析。结果显示，口服+肌注组仔猪发病最快，口服攻毒组次之，对照未发病。剖检攻毒组仔猪可见其肠壁变薄、肠道膨胀，内含大量黄色液体。免疫组化试验显示，攻毒组猪小肠内可检测到大量PEDV阳性信号，而对照组未检测到。研究建立了PEDV-20200946毒株仔猪攻毒模型，为深入研究PEDV流行毒株的分子特性以及弱毒疫苗的开发奠定基础。
关键词： 猪流行性腹泻病毒 流行毒株 分离鉴定 攻毒模型 遗传进化树
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