科研产出
葡萄炭疽病病原菌的分离鉴定及防控药剂筛选
《中外葡萄与葡萄酒 》 2023
摘要：从发病的'红地球'葡萄果实上分离得到36株真菌,确定葡萄炭疽菌为优势种,且编号PTTJ033被鉴定为炭疽菌属葡萄炭疽菌(Colletotrichum viniferum).选择生产上常用的6种杀菌剂对葡萄炭疽菌株进行室内药剂筛选和田间防治试验,结果表明,采用生长速率法测定6种杀菌剂的抑菌效果排序为:戊唑醇>苯醚甲环唑>咪鲜胺>吡唑醚菌酯>二氰蒽醌>代森锰锌;田间试验的防效排序为:10%苯醚甲环唑水分散粒剂600倍>430 g·L-1戊唑醇悬浮剂3000倍>25%吡唑醚菌酯悬浮剂1500倍>450g·L-1咪鲜胺水乳剂1500倍>22.7%二氰蒽醌悬浮剂800倍>80%代森锰锌可湿性粉剂600倍.由此可见,本研究中三唑类药剂的杀菌效果显著优于其他药剂,将为葡萄炭疽病的有效防治提供参考.
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鹅源番鸭呼肠孤病毒的分离鉴定
《中国动物传染病学报 》 2023 北大核心
摘要：近几年，鹅“白点病”频发。本研究从江苏沛县地区肝脏有坏死点的发病鹅中收集肝脏病料，进行病毒分离，通过RT-PCR检测、序列分析进行病毒鉴定，并回归雏鹅进行致病性试验。结果发现：该毒株在鹅胚上生长良好；回归鹅能完全复制出临床中肝脏出现坏死点的病变，并能从实验鹅中重新分离到该病毒；对其主要抗原基因σC进行测序比对和进化树分析发现，其与番鸭呼肠孤病毒基因序列的进化关系较近，同源性为89.6～98.9%。本研究证实了鹅“白点病”的病原为番鸭呼肠孤病毒，为该病的防控奠定了基础。
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贝莱斯芽孢杆菌ZHX-7的分离鉴定及抑菌促生效果
《生物技术通报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为获得高效拮抗花生病害的生防微生物，以花生冠腐病菌为指示菌，采用稀释涂布平板法和平板对峙法，从山东莱西采集的花生连作田的病、健株根际土壤样品中筛选到1株高效生防菌株，编号为ZHX-7。结合形态学特征和16S rDNA、gyrB序列分析，确定ZHX-7为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）。ZHX-7的菌悬液、无菌发酵液和挥发性气体对花生白绢病菌、基腐病菌、网斑病菌和轮斑病菌菌丝生长的抑制均达到极显著的水平，平板对峙试验表明ZHX-7的菌悬液对花生白绢病菌、基腐病菌、网斑病菌和轮斑病菌的抑菌率分别为64.40%、70.37%、77.43%和65.32%。在以ZHX-7无菌发酵液稀释10倍的PDA培养基上，花生白绢病菌、基腐病菌、网斑病菌和轮斑病菌菌丝的生长抑制率分别为67.81%、52.16%、23.52%和69.93%。双皿对扣试验表明ZHX-7的挥发性气体对花生白绢病菌、基腐病菌、网斑病菌和轮斑病菌的抑菌率分别为86.82%、35.40%、81.70%和44.19%。ZHX-7可产生蛋白酶、纤维素酶和淀粉酶等次级代谢产物；此外，在温室盆栽条件下，ZHX-7有菌发酵液明显促进了花生的生长，同对照相比，鲜质量、干质量分别增加31.24%和26.47%，并且ZHX-7有菌发酵液明显提高了花生对白绢病的抗性，防效达到51.76%。综上所述，本研究筛选获得的一株贝莱斯芽孢杆菌ZHX-7，能够抑制多种花生病原真菌，同时促进花生生长，是一株具有宽广拮抗谱的多功能菌株，具有较好的生防应用潜力。
关键词： 贝莱斯芽孢杆菌 花生病害 分离鉴定 抑菌率 生物防治 促生作用 白绢病菌
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鸭肠炎沙门氏菌致病性差异研究
《家禽科学 》 2023
摘要：沙门氏菌是一种革兰氏阴性短杆菌,血清型众多,可引起各种动物的细菌感染.为探究鸭肠炎沙门氏菌的致病性差异,本试验从山东省三个地区采集50份疑似沙门氏菌感染样品,通过细菌分离及PCR扩增目的基因进行鉴定,后通过动物回归试验研究此次分离的沙门氏菌在雏鸭中产生的影响,并通过PCR扩增及Blast比对分析对所分离到的沙门氏菌进行分型.结果显示,从山东省三个地区采集的50份样品中共分离鉴定出5株沙门氏菌;动物回归试验结果显示:5组沙门氏菌中,第5组相较其他组别致死率最高,致死率高达87.5%,其次为2组、4组、3组、1组;通过Blast比对分析,确定分离到的5株菌均为肠炎型沙门氏菌.本试验为山东地区鸭肠炎沙门氏菌流行情况及致病性差异提供了部分理论依据和数据支持.
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山东省临沂地区中草药丹参根结线虫的种类鉴定
《土壤与作物 》 2023
摘要：为了调查山东省临沂地区中草药根结线虫（Meloidogyne spp.）的种类，对临沂地区的蒙阴县和平邑县7个发病丹参田采集丹参样品，并分离线虫，利用根结线虫的通用引物（rDNA-ITS区域194/195）和常见根结线虫种的特异性引物对二龄幼虫进行分子鉴定，对PCR产物及其序列比较分析进而确定线虫种类，同时确定这些线虫能否在番茄上繁殖，然后对确定线虫种类的二龄幼虫形态学和雌虫会阴花纹的特征进行了鉴定。结果表明，rDNA-ITS区域194/195通用引物对所有7个样品都扩增出750 bp产物，证明是根结线虫，序列之间的相似度范围是99.4%～100%；序列特异性引物扩增表明蒙阴县4个样品是花生根结线虫（M. arenaria）,2个样品是南方根结线虫（M. incognita），平邑县1个样品是南方根结线虫。序列分别与已报道的花生根结线虫和南方根结线虫100%同源，通用引物扩增产物序列也分别与基因库中这两种线虫序列达到98.3%～100%相似性。所有样品线虫都能在番茄上繁殖，二龄幼虫的形态学特征和雌虫会阴花纹的特征与已鉴定的南方根结线虫和花生根结线虫的特征相同。
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枯草芽孢杆菌KC1723的鉴定及生物学特征研究
《山东农业科学 》 2023
摘要：本试验从土壤中分离筛选出芽孢杆菌菌株KC1723,并对菌株形态、生理生化特征及16S rDNA序列进行分析。结果显示：菌株KC1723呈杆状，链状排列，产生椭圆形芽孢；生理生化特征与枯草芽孢杆菌一致；16S rDNA序列与枯草芽孢杆菌的同源性为99.39%。因此确定菌株KC1723为枯草芽孢杆菌。菌株KC1723最优生长培养基为LB培养基，最适生长pH值为7.0,对暹罗炭疽菌、平头炭疽菌和链格孢菌有良好的抑制作用。本试验为生防菌的开发应用提供了重要的菌种资源。
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生防菌棘孢木霉的分离鉴定及生物学特性研究
《山东农业科学 》 2023
摘要：本试验从羊茅草根际土壤中分离筛选出生防菌株GT30,经形态学和分子生物学鉴定,确定GT30为棘孢木霉,并对其生物学特性和抑菌效果进行研究.结果显示,菌株GT30 菌丝生长较快;孢子梗对生生长,主分支呈树状;分生孢子呈球形,外璧光滑.棘孢木霉GT30 最适生长pH值为 5~6,最适温度为 25~30℃,葡萄糖和牛肉膏分别是GT30 生长所需最佳碳源和氮源,光照有利于GT30 产孢,Mg2+和Ca2+离子可促进GT30 菌丝生长及产孢.平板对峙培养试验表明,棘孢木霉GT30 对大蒜白斑病菌和葡萄炭疽病菌抑制效果较好,抑菌率分别为 63.7%和 61.4%.本研究结果可为开发优异生防木霉菌剂提供菌种资源和理论基础.
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猪流行性腹泻病毒变异毒株的分离鉴定及遗传演化分析
《生物学杂志 》 2022 CSCD
摘要：猪流行性腹泻（PED）是由猪流行性腹泻病毒（PEDV）引起猪的一种急性高度接触性肠道传染病。为了解山东地区PEDV的遗传进化趋势，对2020—2021年收集的疑似猪流行性腹泻的临床病料进行RT-PCR检测。随后将处理好的病料上清液接种于Vero细胞进行PEDV病毒分离，并利用间接免疫荧光（IFA）进行验证，成功分离到一株PEDV毒株，命名为QH-202105。将分离株传代培养至第10代，提取RNA后进行扩增并全基因组测序，结合NCBI下载的参考序列对分离株的全基因组和S基因进行核苷酸同源性比对、系统发育树构建分析，结果显示，分离株与美国分离株USA/Colorado/2013核苷酸同源性最高，为99.1%,与CHM2013株同源性最低，为96.5%。经S基因氨基酸序列分析显示，分离株QH-202105在S基因的N端有60多处突变，两处氨基酸插入（包括第59～62位氨基酸的QGVN 4个氨基酸插入，第145位氨基酸N的插入）和两处氨基酸缺失（第115～118氨基酸的缺失，第167～168氨基酸的缺失）。进化树分析结果显示，分离毒株QH-202105为G2基因群，与CH/HNAY/2015和CH/ZJCX-1/2012亲缘关系最近，属同一进化分支。在此基础上，应用PROVEAN对QH-202105的S蛋白突变氨基酸进行功能预测，结果显示，在1 361处（G→C）被判定为“Deleterious”,可以推测此处的突变对病毒的侵袭力可能存在间接影响。研究结果可为我国PEDV变异株的流行情况及防控提供参考。
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