科研产出
畜禽血液中血红素的提取、检测及应用
《黑龙江畜牧兽医 》 2023 北大核心
摘要：畜禽屠宰生产中的主要副产物——畜禽血液具有很高的营养价值，其所含的血红素是血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素、过氧化物酶、过氧化氢酶等众多蛋白质的辅基，具有重要的生理功能，广泛应用于食品、药品、化妆品和生物化学分析方面。笔者对制备血红素的原料(血粉、血红蛋白粉、新鲜动物血液)及处理方式，以及血红素的提取方法(酶解法、羧甲基纤维素法、冰醋酸法等)和定量测定方法(光谱法、色谱法、质谱等)及在食品、医药等方面的应用进行了综述，旨在为畜禽血液中血红素的提取方法研究及产品研发提供参考。
关键词： 血红素 新鲜血液 提取方法 酶解法 检测方法 光谱法 色谱法 应用 食品
全文链接
请求原文
食品中甜蜜素的应用及检测方法的比较
《食品安全质量检测学报 》 2019
摘要：近年来食品中甜蜜素的添加情况,成为食品安全检测的重点。我国已经明确规定了甜蜜素的使用范围和最大使用量,但超范围、超限量的使用情况却屡见不鲜。甜蜜素的分析方法包括样品前处理方法和甜蜜素的检测方法。根据不同的食品种类,需要选择合适的样品前处理方法,具体方法包括:透析法、除油脂蛋白沉淀法、挥发法、超声离心法和固相萃取法。甜蜜素的检测方法包括:常规理化法、色谱法、质谱法。本文从甜蜜素在国内食品行业的应用现状、样品前处理技术、检测方法及不确定度等方面进行综述,旨在找到最合适且快速准确的测定甜蜜素的方法,为食品安全监督检测提供参考。
全文链接
请求原文
一种新的植物泛素结合酶体外泛素化检测方法
《山东农业科学 》 2018
摘要：泛素结合酶是一类在泛素化修饰过程中起重要生物化学功能的蛋白。对于被预测为泛素结合酶的蛋白进行体外泛素化活性检测,是确定其泛素结合酶功能必不可少的试验步骤,试验结果可以为后续研究提供重要的线索。目前体外泛素化反应存在体外表达纯化蛋白工作量大、反应复杂、假阴性率高等问题。本研究针对以上问题进行了改良,开发出一种新的植物泛素结合酶活性体外检测方法,该方法无需裂解细胞提取、纯化蛋白,也不需要做体外反应,简便易行,结果更稳定可靠。应用该方法对花生泛素结合酶Ah UBC34和盐芥泛素结合酶Ts UBC33进行了检测,结果证明这两个蛋白都具有泛素结合酶活性。
全文链接
请求原文
三种血清学布鲁氏菌检测方法在不同疫苗免疫奶牛中的比较
《山东农业科学 》 2017
摘要：布鲁氏菌病是一种世界范围内广泛分布的严重人畜共患病。疫苗免疫和血清学诊断是有效控制和净化该病的两种重要措施,但疫苗免疫对血清学诊断存在较大影响。因此,弄清楚不同疫苗免疫在不同检测方法下的抗体消减规律显得尤为重要。本研究选取15头6月龄健康母牛,随机分为5个试验组,每组3头,分别为600亿单位A19疫苗注射组、600亿单位A19疫苗口服组、500亿单位S2疫苗口服组、500亿单位S2疫苗注射组和对照组。对不同组试验牛进行隔离饲养,免疫完成后进行一次带牛环境消毒。免疫完成后每月采集牛血制备血清保存,连续采集6个月,分别使用RBPT(虎红平板凝集实验)、iELISA、cELISA进行检测。结果表明,相比口服免疫方式,注射免疫方式的疫苗抗体峰值水平更高,抗体持续时间更长;注射免疫方式下,S2疫苗的抗体峰值水平高于A19苗,但抗体持续时间较短;口服免疫A19疫苗,6个月内三种方法均未检测到抗体。可见,疫苗免疫对布鲁氏菌病血清学诊断有明显的干扰作用,但对cELISA检测的影响时间较短,采用cELISA可有效区分疫苗免疫和野毒感染。针对不同免疫方式的不同疫苗,应选择合适的时间节点。
全文链接
请求原文
高通量检测花生油酸含量相关基因AhFAD2等位变异的方法
《农业生物技术学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：花生(Arachis hypogaea)Δ12脂肪酸去饱和酶基因(Δ12fatty acid desaturase,Ah FAD2A和Ah FAD2B)是决定花生籽粒油酸含量和高油酸亚油酸比值(oleic acid/linoleic acid,O/L)的关键基因,高油酸花生品种中这2个基因均发生突变。针对普通油酸花生和高油酸花生Ah FAD2A 448位G/A差异和Ah FAD2B 442位A碱基的插入/缺失(insertion-deletion,In Dels)等位差异,已开发了包括酶切扩增多态性序列法(cleaved amplified polymorphic sequence,CAPS)和等位基因特异PCR(allele-specific PCR,AS-PCR)等多种检测的标记和检测方法。本研究针对上述2个SNP位点,开发了可进行高通量检测的实时定量PCR引物、Taq Man探针和检测技术,该方法检测效率和准确率均很高。本研究还开发了更为经济和高效的竞争性等位基因特异性PCR(kompetitive allele specific PCR,KASP)引物和检测方法。利用开发的Taq Man探针检测方法和KASP方法检测了14个花生品种和高油酸选育回交组合BC2F1和BC1F2群体部分种子的基因型,并比较了两种方法检测结果的一致率,发现这两种方法检测Ah FAD2B 442 nt A/-In Del差异结果的一致率高达96.7%;而针对Ah FAD2A 448位G/A差异位点检测一致率仅为71.7%。本研究还比较了目前常用的CAPS、AS-PCR、测序法、Taq Man探针法及KASP方法的优缺点,对相关方法的应用前景进行了讨论。本研究涉及的高通量检测方法可有效地辅助高油酸品种的选育,极大地提高了目标性状选择的准确性和效率。
关键词： 花生12脂肪酸去饱和酶基因(AhFAD2) 等位变异 油酸 检测方法 花生
全文链接
请求原文
口蹄疫病毒链特异性荧光定量RT-PCR检测方法的建立
《黑龙江畜牧兽医 》 2015 北大核心
摘要：为了定量检测口蹄疫病毒(FMDV)的正链和负链RNA,揭示FMDV复制的分子机制,试验采用链特异性荧光定量RT-PCR(ssqRT-PCR)方法提取了FMDV的RNA,在FMDV链特异性反转录引物的5'端引入非病毒基因序列标签进行反转录,再经链特异性ssqRT-PCR扩增进行灵敏性、特异性、重复性检测。结果表明:FMDV基因组正链、负链RNA的链特异性ssqRT-PCR方法构建成功,该方法对FMDV正链和负链RNA检测的灵敏度达到1×101拷贝,具有较好的重复性和特异性。
关键词： 口蹄疫病毒(FMDV) 链特异性 非病毒基因序列标签 荧光定量RT-PCR(ssqRT-PCR) 基因组RNA 检测方法
