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一种新的植物泛素结合酶体外泛素化检测方法

文献类型: 中文期刊

作者: 刘译阳 1 ; 韩燕 2 ; 李国卫 2 ; 崔凤 3 ;

作者机构: 1.山东省农业科学院生物技术研究中心/山东省作物栽培生态生理重点实验室

2.;山东省农业科学院生物技术研究中心/山东省作物栽培生态生理重点实验室

3.;山东省农业科学院生物技术研究中心/山东省作物栽培生态生理重点实验室;

关键词: 泛素结合酶;体外泛素化检测;检测方法;花生;盐芥

期刊名称: 山东农业科学

ISSN: 1001-4942

年卷期: 2018 年 03 期

页码: 120-124

摘要: 泛素结合酶是一类在泛素化修饰过程中起重要生物化学功能的蛋白。对于被预测为泛素结合酶的蛋白进行体外泛素化活性检测,是确定其泛素结合酶功能必不可少的试验步骤,试验结果可以为后续研究提供重要的线索。目前体外泛素化反应存在体外表达纯化蛋白工作量大、反应复杂、假阴性率高等问题。本研究针对以上问题进行了改良,开发出一种新的植物泛素结合酶活性体外检测方法,该方法无需裂解细胞提取、纯化蛋白,也不需要做体外反应,简便易行,结果更稳定可靠。应用该方法对花生泛素结合酶Ah UBC34和盐芥泛素结合酶Ts UBC33进行了检测,结果证明这两个蛋白都具有泛素结合酶活性。

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