科研产出
偏凸-柱穗山羊草双二倍体与普通小麦杂种F_1的细胞遗传学分析
《安徽农业科学 》 2011 北大核心
摘要：[目的]研究偏凸-柱穗山羊草双二倍体与普通小麦杂种F1的染色体配对特点。[方法]利用压片法对普通小麦烟农15、SDAU18及其杂种F1的小孢子发生和花粉发育过程进行了细胞学观察。[结果]两亲本(烟农15和SDAU18)的小孢子发生和花粉发育基本正常,二者结实率也基本正常。F1小孢子发生过程紊乱,花粉母细胞减数分裂中期I出现较高频率的单价体和二价体,分别为10.11和18.29个,而多价体出现的频率非常低;减数分裂后期I,每个细胞落后染色体平均为5条;四分体期,每个四分体微核数平均为4.43个。在杂种F1花粉发育的每个时期都产生了不同频率的败育花粉,但败育主要发生在第1次孢子有丝分裂以后。在三细胞成熟花粉期,杂种F1可育花粉仅有31%。[结论]为深入分析和利用该双二倍体提供了细胞遗传学依据。
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嗜麦芽窄食单胞菌角蛋白酶基因(KerF)的克隆及其在大肠杆菌中的表达
《农业生物技术学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为研究嗜麦芽窄食单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)降解羽毛的机理,本研究克隆了嗜麦芽窄食单胞菌角蛋白酶基因(KerF),并获得其全长基因序列1981bp,含有1个1743bp的开放阅读框,编码580个氨基酸(GeneBank登陆号HM590650),将角蛋白酶KerF基因连入表达载体pET28a(+)中,构建重组表达质粒pET28-KerF并转化大肠杆菌(Escherichiacoli)BL21(DE3),获得重组工程菌。采用金属Ni+螯和层析柱对所表达的角蛋白酶进行纯化,获得分子量为50kD的重组角蛋白酶KerF。该酶的最适温度为50℃,最适pH值为9.0。金属离子Mn2+、Co2+、Mg2+、Ni+、Ba2+、Zn2+、Ca2+、Fe3+及蛋白酶抑制剂二苯基甲基磺酰氟(PFSM)能强烈抑制该酶活性,乙二胺四乙酸(EDTA)对该酶活具有促进作用。本研究结果表明,嗜麦芽窄单胞菌角蛋白酶基因在大肠杆菌中获得成功表达,重组角蛋白酶KerF为碱性丝氨酸蛋白酶。
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花生种子中凝集素的凝集活性及性质研究
《食品工业科技 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：利用血凝实验及糖抑制实验测定花生种子中凝集素的凝血活性及糖抑制专一性,同时进行热稳定性及pH影响实验。结果显示:花生种子的凝集素粗提液不能凝集人的A、B、O型血细胞,但是可以凝聚唾液酸酶处理后的A、B、O型血细胞。凝集素对红细胞的凝集可被乳糖、蜜二糖、棉籽糖和D-半乳糖四种糖所抑制,在pH为5.0～11.0范围内较稳定,经55℃保温10min后,活性完全消失。在检测的6个不同品种的花生中,河北高油的种子中凝集素活性最强。在花生的生长初期,这种凝集素的存在部位是子叶和根。
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大白菜的类胡萝卜素种类鉴定
《中国农学通报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为建立大白菜类胡萝卜素鉴定方法,利用反相高效液相色谱(RP-HPLC),根据标样和二极管阵列检测器的检测结果,对不同类型大白菜材料的类胡萝卜素种类进行鉴定。结果表明:利用C30柱从大白菜中共分离出48种类胡萝卜素,根据保留时间和吸收谱特征鉴定出其中的30种成分,链孢红素、玉米黄质、八氢番茄红素、六氢番茄红素、ζ-胡萝卜素、γ-胡萝卜素和紫黄质均为首次在大白菜中报道。橙色大白菜中的类胡萝卜素种类最多,与其他大白菜存在很大差异。说明该鉴定方法适用于大白菜的类胡萝卜素种类研究。
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鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的制备及鉴定
《山东农业科学 》 2011
摘要：用纯化的鸡传染性支气管炎病毒免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞Ag8.653融合。对杂交瘤细胞及时筛选,阳性孔经3次有限稀释法克隆,成功获得3株能稳定传代并分泌抗鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株1F4F7D9、3E9G3D4、4B8B3F8。通过间接ELISA、血凝抑制以及琼脂糖扩散等方法检测,3株单克隆抗体的腹水间接ELISA效价达106以上并且具有良好的特异性。
关键词： 鸡传染性支气管炎病毒 单克隆抗体 制备 鉴定
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秋水仙素诱导大葱多倍体的研究
《园艺学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：以章丘大葱种子为材料,研究了秋水仙素处理浓度和时间对大葱体细胞染色体加倍的效果,并利用形态观察,根尖细胞染色体计数及流式细胞仪等方法进行倍性鉴定。结果表明,0.8%秋水仙素处理48 h的诱变效果最佳。诱变植株存在明显"玻璃化"现象,生根困难,移栽后不能成活。通过组织培养去"玻璃化",获得正常生长的四倍体植株。四倍体植株的细胞染色体数2n=4x=32,植株多倍体形态特征明显,植株生长健壮,叶色浓绿,叶面气孔变大,气孔密度减少;株高、葱白长度等与二倍体植株相比极显著增加。
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一株韩国新型DHV的分离及RT-PCR鉴定
《浙江农业学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：从山东省某疑似鸭肝炎发病区分离到1株病毒JFX08,血清中和试验结果表明该分离毒与传统的Ⅰ型鸭肝炎病毒无交叉保护,分离毒回归3日龄雏鸭,可复制出鸭肝炎的典型症状和病理变化。根据已公布的韩国新型(基因C型)DHV的序列设计合成一对引物,进行RT-PCR扩增,得到大小约414 bp的目的条带;测序分析发现,分离毒与传统Ⅰ型DHV之间的相似性较低,而与韩国新型DHV之间的相似性高达93.2%~94.0%;进化分析结果表明,该分离毒与韩国新型DHV的遗传距离最近,属基因C型DHV。
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