荷斯坦奶牛中性粒细胞β-防御素cDNA的克隆与序列分析

刘双龙; 王长法; 杨宏军; 杨少华; 阿合买提·买买提; 高运东; 仲跻峰; 《动物学杂志 》 2007 北大核心 CSCD

摘要：为研发牛β-防御素生物制剂,防治奶牛乳腺炎。根据已发表的牛β-防御素基因序列设计一对引物。收集患乳腺炎奶牛乳静脉血液中性粒细胞,用试剂盒提取总RNA。经RT-PCR扩增牛β-防御素cDNA片段,回收纯化PCR产物,连接pMD18-T载体,转化感受态细胞JM109。在含X-Gal、Amp及IPTG的LB平板上筛选阳性克隆,经菌落PCR及双酶切鉴定后,对目的片段进行测序。结果表明RT-PCR扩增出的cDNA片段碱基数为189bp,含有一个完整的ORF,能编码63个氨基酸的多肽,多肽中含6个保守半胱氨酸残基。用Blast程序进行检索比较,表明扩增序列与GenBank中发表的BNBD-7编码区序列96.3%相同。结果成功克隆出奶牛β-防御素家族的成员BNBD-7基因,为重组牛β-防御素的开发奠定了基础。

关键词： β-防御素 克隆 牛

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奶牛隐性乳腺炎病原菌的分离鉴定和体细胞数及酶的相关性研究

马保臣; 秦卓明; 李建基; 王春璈; 柴同杰; 《家畜生态学报 》 2006

摘要：对330个乳样分别用加州乳腺炎检验(California Mastitis Test,CMT),体细胞计数(Somatic Cell Count,SCC)和细菌的分离培养(Isolation of bacteria)法进行隐性乳腺炎的检测,结果表明3种方法检测的结果差异不显著(P>0.05);对检测患有隐性乳腺炎的241乳区进行了细菌的分离培养,结果表明引起隐性乳腺炎的最主要致病菌为金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、链球菌、酵母菌、假单胞菌和棒状杆菌、其它细菌的检出率差异根显著(P<0.05)。对分离出优势细菌的部分乳样进行了SCC与LDH,NAGase,ALP和ACP几种酶的测定和相关性分析,结果表明:LDH与SCC有显著的相关性(r=0.7936),并且LDH与NA-Gase,ALP,ACP都有明显的相关性;NAGase与ACP,LDH有明显的相关性,但与ALP没有相关性;ALP只与ACP和LDH有显著的相关性外,与SCC,NAGase没有相关性;ACP与SCC,LDH,NAGase,ALP都有极显著的相关性。

关键词： 奶牛 乳腺炎 病原菌 体细胞数 酶

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利用TSPY基因鉴定奶牛早期胚胎性别的研究

黄金明; 张俊功; 游伟; 朱荣生; 崔绪奎; 《家畜生态学报 》 2006

摘要：TSPY(testis-specific protein)是Y染色体上特异的基因。公牛Y染色体上的TSPY基因的拷贝数达200个。本研究主要探讨利用TPSY基因鉴定胚胎性别的可能性。利用TSPY特异引物,通过PCR技术扩增牛血样DNA的结果为公牛血样均为阳性,母牛为阴性。结果表明,TSPY基因是一个很好的雄性特异标记。PCR扩增TSPY特异序列鉴定牛性别的灵敏度试验表明,DNA的最低需要量为20 pg/μL,提示,TSPY特异基因具有鉴定牛早期胚胎性别的可能。

关键词： 牛 胚胎 PCR 性别鉴定 TSPY基因

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离子载体对泌乳奶牛影响的应用研究进展

王友令; 《广东畜牧兽医科技 》 2006

摘要：研究表明应用离子载体(IOP)有助于提高奶牛泌乳量和刺激免疫应答反应。目前IOP对奶牛泌乳影响的一些研究成果已经被广泛应用于奶牛生产中。IOP能抑制瘤胃中的革兰氏阳性菌,改变瘤胃内环境,从而提高饲料中的氮和能量的利用率。资料显示,泌乳奶牛服用IOP后有助于体内能量平衡、提高自身对疾病的抵抗力和增加产奶量。因而,IOP对分娩前后的奶牛,特别是那些泌乳能力强的奶牛的作用更加显著。

关键词： 奶牛 IOP 莫能菌素 生产性能

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中药黄芪多糖的免疫佐剂作用

林树乾; 张燕; 杨少华; 马广强; 高运东; 李国升; 赵宏坤; 仲跻蜂; 《中国畜牧兽医 》 2006

摘要：分别将黄芪多糖提取物、白油-吐温、氢氧化铝作为佐剂制备金黄色葡萄球菌灭活苗混合免疫家兔和奶牛,观察家兔免疫前后血清抗体滴度变化以及攻毒后白细胞数目变化和淋巴细胞百分比变化。对奶牛免疫后测其血清抗体和乳汁中体细胞数变化,结果注射疫苗后乳汁中体细胞数都有所下降,黄芪多糖组较其它组下降较快,幅度较大。黄芪多糖和抗原混合物免疫动物后未见不良反应,且抗原免疫血清抗体比氢氧化铝和白油-吐温佐剂组的抗体滴度增加快,幅度显著增高且抗体维持一个较高水平,而攻毒后家兔白细胞数和淋巴细胞数也较氢氧化铝和白油-吐温佐剂组增加较多。因此黄芪多糖是一种有效的佐剂。

关键词： 黄芪多糖 佐剂 奶牛 金黄色葡萄球菌

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性控精液在奶牛生产中的应用策略

黄金明; 游伟; 张俊功; 柳尧波; 马世援; 《动物医学进展 》 2006

摘要：X精子的分选技术将增强生产者获得廉价后备母牛的能力,加快牛群扩繁进度,提高繁殖效益。但该技术依然受到分选的速度(可用性和价格)和受精率两种限制因素的制约。文章主要从商业应用的角度,探讨了目前应用性控精液的4种策略:①先用性控精液,然后用常规精液给青年母牛授种;②给超排母牛采用性控精液人工授精,生产体内胚可获得与常规精液相似的超排效果;③用有系谱母牛供体生产体外胚并给青年母牛移植;④用匿名供体生产体外胚并给黄牛或低产奶牛移植。

关键词： 性控精液 应用 奶牛

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利用微生物提高作物秸秆饲用价值的研究(英文)

岳寿松; 王翠萍; 尤升波; 游银伟; 《山东科学 》 2006

摘要：研究了微生物(乳酸菌和酵母菌混合发酵物)发酵玉米秸秆对饲用价值和奶牛饲喂效果的影响。实验处理为用筛选的微生物制剂发酵纯秸秆粉、纯秸秆粉补充氮源(豆粕粉)和碳源(玉米粉),对照为清水发酵上述原料。结果表明,作物秸秆粉经微生物发酵后有机酸(以乳酸计)含量接种后24h内大幅度提高,之后持续缓慢增加,而清水发酵的对照则没有酸积累现象;与清水发酵对照和不发酵原料相比,微生物发酵处理纯秸秆粉的粗蛋白、粗脂肪和粗纤维变化无明显差异;但发酵原料中补充碳、氮源后,微生物发酵处理的粗脂肪、维生素B含量大幅度提高,粗纤维含量显著降低,粗蛋白含量变化不明显。奶牛试验表明,与清水发酵玉米秸秆相比,微生物发酵秸秆处理产奶量增加了17.0%,乳脂率增加了1.01%。

关键词： 作物秸秆 微生物 奶牛 产量

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奶牛乳腺炎的细菌学研究

马保臣; 牛家华; 高玉君; 秦卓明; 柴同杰; 李建基; 王春璈; 《家畜生态学报 》 2005

摘要：在对山东7个地区14个奶牛场临床型和隐性乳腺炎调查的基础上采集234头临床乳腺炎病牛乳样、241个隐性乳腺炎乳样并分别做了细菌学检查,结果表明:泌乳期临床型乳腺炎病原菌以凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、酵母菌和棒状杆菌为主;干奶期临床型乳腺炎病原菌以大肠杆菌、链球菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌和酵母菌为主;隐性乳腺炎病原菌以凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌链球菌、酵母菌、假单胞菌和棒状杆菌为主;厌氧菌在隐性乳腺炎、干奶期乳腺炎和干奶期乳腺炎乳样的捡出率分别为 5．82％,4．17%,10．16％;隐性乳腺炎、干奶期乳腺炎细菌的共感染率较高,与泌乳期乳腺炎病原菌的差异极显著(P<0．01),隐性乳腺炎与干奶期乳腺炎病原菌共感染率差异不显著(P >0．05)。

关键词： 奶牛 乳腺炎 细菌学

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奶牛胎衣不下的防治

成海建; 孙海涛; 张印; 《农业知识 》 2005

关键词： 子宫颈炎 胎衣不下 胎衣滞留 奶牛 剥离 干奶期 维生素

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牛白细胞介素18成熟蛋白cDNA基因的克隆和表达

刘文强; 胡敬东; 杨少华; 赵宏坤; 高运东; 仲跻峰; 《畜牧兽医学报 》 2005 北大核心 CSCD

摘要：应用RT-PCR技术分别从脂多糖(LPS)活化的牛脾脏细胞和肺泡巨噬细胞中克隆到编码牛白细胞介素(bIL-)18成熟蛋白的cDNA基因,其大小为480 bp。将bIL-18克隆到pET32a(+)质粒中,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导后进行SDS-PAGE分析,得到了分子量为38ku的融合蛋白,该蛋白经纯化并复性后,具有诱导MDBK分泌IFN-γ的活性,并且可以刺激ConA活化的外周血单核细胞(PBMC)增殖。使用半定量RT-PCR对其mRNA的体内表达进行了测定,发现不论是否加入刺激剂,牛巨噬细胞都可以持续的表达IL-18 mRNA,但是被LPS活化的PBMC只有微弱表达,肝和脾细胞经LPS活化后也可以检测到IL-18 mRNA的表达,其水平明显高于PBMC,在不同细胞中表达的差异可能反映了其产生成熟IL-18的能力。

关键词： 牛 白细胞介素18 RT-PCR

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