文献类型： 中文期刊
作者： 刘文强 1 ; 胡敬东 1 ; 杨少华 2 ; 赵宏坤 1 ; 高运东 2 ; 仲跻峰 2 ;
作者机构： 1.山东农业大学动物科技学院
2.山东省农业科学院奶牛研究中心
关键词： 牛;白细胞介素18;RT-PCR
期刊名称： 畜牧兽医学报
ISSN： 0366-6964
年卷期： 2005 年 36 卷 09 期
页码： 873-876
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 应用RT-PCR技术分别从脂多糖(LPS)活化的牛脾脏细胞和肺泡巨噬细胞中克隆到编码牛白细胞介素(bIL-)18成熟蛋白的cDNA基因,其大小为480 bp。将bIL-18克隆到pET32a(+)质粒中,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导后进行SDS-PAGE分析,得到了分子量为38ku的融合蛋白,该蛋白经纯化并复性后,具有诱导MDBK分泌IFN-γ的活性,并且可以刺激ConA活化的外周血单核细胞(PBMC)增殖。使用半定量RT-PCR对其mRNA的体内表达进行了测定,发现不论是否加入刺激剂,牛巨噬细胞都可以持续的表达IL-18 mRNA,但是被LPS活化的PBMC只有微弱表达,肝和脾细胞经LPS活化后也可以检测到IL-18 mRNA的表达,其水平明显高于PBMC,在不同细胞中表达的差异可能反映了其产生成熟IL-18的能力。
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