科研产出
蛋鸡肠道有益菌的分离与初步鉴定
《黑龙江畜牧兽医 》 2017 北大核心
摘要：为了分离蛋鸡肠道中存在的有益菌,试验采用常规分离方法对产蛋高峰期蛋鸡肠道中有益菌进行分离鉴定,测定了目标菌株的理化性质、体外抑菌效果,并进行了雏鸡安全性试验。结果表明:从蛋鸡空肠中分离出乳酸菌4株,分别为K1、K2、K3、K4;从盲肠中分离出乳酸菌1株,为M1;从盲肠中分离芽孢杆菌3株,分别为Y1、Y2、Y3。通过系列生理生化鉴定,初步确定以上乳酸菌依次为植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、德氏乳杆菌德氏亚种、德氏乳杆菌乳亚种和短乳杆菌,芽孢杆菌依次为枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌。乳酸菌对大肠杆菌O2有较强的抑菌作用,K1、K2、K3、K4、M1的抑菌圈直径分别为18.30,16.07,11.45,17.26,10.26 mm;而芽孢杆菌抑菌作用相对较弱,Y1、Y2、Y3的抑菌圈直径分别为9.25,8.46,8.37 mm。雏鸡日饮活菌20亿个为安全剂量。
关键词： 蛋鸡 肠道 有益菌 分离 鉴定 理化性质 抑菌 安全性试验
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H9N2亚型禽流感荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用
《黑龙江畜牧兽医 》 2017 北大核心
摘要：为了研究H9N2亚型禽流感病毒(AIV)在家禽体内各个器官的分布,试验针对H9N2亚型AIV的HA基因设计1对特异性引物,同时设计1对扩增内参基因β-actin的引物,以阳性重组质粒作为标准品做标准曲线,建立荧光定量RT-PCR检测方法,并对人工感染H9N2的SPF雏鸡气管、胸腺、肺脏、肝脏、脾脏、肾脏、肠等器官进行3次重复检测。结果表明:该法线性关系R值均在0.99以上,检测极限均为10拷贝质粒DNA,比RT-PCR灵敏100倍以上;特异性好,批内和批间重复性试验变异系数均小于1%。通过比较各器官HA相对表达量,得出肠和胰腺中HA相对表达量最高,腺胃次之,脾脏、肝脏、胸腺、法氏囊中含量也比较高,气管、肺脏、肾脏中含量较低,其中肾脏含量最低。说明研究建立的H9N2亚型禽流感病毒荧光定量RT-PCR方法灵敏度高,特异性强。
关键词： H9N2亚型禽流感病毒 HA基因 RT-PCR 检测 病毒分布
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山东地区樱桃褐斑病病原鉴定及rDNA-ITS序列分析
《中国农业科技导报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为明确引起樱桃褐斑病的病原菌种类,采集泰安、潍坊、烟台3个地区典型发病叶片,用单孢分离法分离、纯化,共获得16个菌株,采用病原菌形态学与分子生物学相结合的方法,鉴定樱桃褐斑病的病原菌。对该病原菌的ITS序列分析显示,其与Gen Bank中登录的Passalora sp.属的Passalora arctostaphyli相似性达97%;与另一种在甜樱桃叶片中分离的病原菌Pseudocercospora pruni-persicicola相似度仅为85.6%,证明两者并非为同一属真菌。构建系统进化树表明,樱桃褐斑病病原与Passalora sp.属真菌处在同一分支,而与其它Prunus sp.属分离的病原菌处在两个分支,进而通过形态学鉴定和ITS序列分析认为,病原菌为Passalora circumscissa,并将其ITS基因序列提交至Gen Bank数据库(基因登陆号:KT428056)。
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鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白截短表达及间接ELISA抗体检测方法的建立与应用
《中国兽医学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：参照IBV S1基因序列,RT-PCR扩增长约867bp的S1基因主要抗原区域,将目的片段定向克隆到pET30α原核表达载体,转化Rossetta表达菌,经IPTG诱导后获得了以包涵体形式表达的重组S1蛋白。重组蛋白纯化后,经免疫印迹检测证明具有良好的免疫活性。以该蛋白作为包被抗原,经间接ELISA反应条件的优化,建立了检测鸡传染性支气管炎病毒(IBV)抗体的间接ELISA检测方法。该方法与其他6种常见禽病病毒(H5亚型禽流感病毒(H5-AIV)、H9亚型禽流感病毒(H9-AIV)、新城疫病毒(NDV)、减蛋综合征病毒(EDSV)、鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)、鸡法氏囊病毒(IBDV))阳性血清不发生交叉反应;批内和批间重复性试验的变异系数分别小于5%和10%;相对于HI试验的符合率、敏感性、特异性分别为91.58%、91.24%和92.31%;相对于IDEXX ELISA的符合率、敏感性、特异性分别为94.55%、95.42%和92.96%;应用该方法检测山东及周边地区2 685份免疫鸡和168份未免疫鸡血清样品,免疫合格率和阳性感染率分别为85.25%和17.26%。本试验截短表达的S1蛋白具有良好的免疫活性,建立的间接ELISA抗体检测方法具有良好的敏感性、特异性、重复性和临床适用性,将为IBV的免疫抗体监测、临床野毒感染快速诊断和流行病学调查提供了一种新的血清学诊断技术,具有良好的推广应用前景。
关键词： 鸡传染性支气管炎病毒 S1蛋白 截短表达 活性鉴定 间接ELISA 检测
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黄化曲叶病毒分子标记在番茄育苗中的应用
《分子植物育种 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：用DNA分子标记技术,对21份番茄种苗进行黄化曲叶病毒病(TYLCV,TY)抗病基因及病毒病感染检测。结果表明:9份材料携带ty-1/ty-1、ty-2/ty-2和Ty-3a/ty-3a抗性基因,1份材料携带ty-2/ty-2和Ty-3a/ty-3a抗性基因;自根苗欧迪斯、嫁接苗金棚/11-8、金棚/荣威和金棚/双飞8号已经感染TY。种苗进行田间种植,其中携带抗性基因的番茄品种没有发生TY,抗性较强;在已感染TY的4份材料中,欧迪斯田间表现感染TY,其余3份未发生TY。试验表明,TY分子标记技术检测可靠,可以在番茄育苗生产中推广应用。
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不同蓖麻品种蓖麻碱含量的测定与分类
《农业科技通讯 》 2017
摘要：实验测定了16份蓖麻种质资源,蓖麻籽中蓖麻碱含量为1.337~2.572 mg/g,根据不同种质资源蓖麻碱的含量,将样本分为低含量、中低含量、中等含量、中高含量和高含量五种种质资源,可分别用于定向选育高、低蓖麻碱含量的蓖麻品种,有利于延长蓖麻产业链,同时也会有巨大的社会效益和经济效益。
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常见蔬菜中抗坏血酸含量的测定与分析
《安徽农业科学 》 2017
摘要：[目的]测定并分析常见蔬菜中的抗坏血酸含量。[方法]采用2,6-二氯酚靛酚滴定法对济南市14种不同种类的336个老百姓餐桌上常见蔬菜抗坏血酸(以下简称维生素C)含量进行测定与分析。[结果]不同种类蔬菜中维生素C含量有较大差别。其中,尖椒中维生素C含量最高,平均值为1 200.00 mg/kg;茄子中维生素C含量相对较低,平均值为63.80 mg/kg。[结论]了解这些常见蔬菜中维生素C含量,对人们合理补充维生素C具有重要意义。
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氟铃脲悬浮剂流变模型的判断研究
《山东化工 》 2016
摘要：目的:建立悬浮剂流变模型的判定方法。方法:测定了氟铃脲悬浮剂粘度与剪切速率后,采用五种流体的模式进行模拟。结果:Sisko、Power-law、Casson模型对"剪切变稀"氟铃脲悬浮剂流变曲线的拟合相关系数R~2偏低,分别为0.8667、0.9821、0.9873,Sisko误差很大,不适合用该模型进行拟合;Casson、Binghamplastic流变模型对"剪切变稠"氟铃脲悬浮剂流变曲线的拟合相关系数R~2都偏低,分别为0.9714、0.9830,误差较大。只有Herschel-Bulkley模型对氟铃脲悬浮剂两种流变曲线的拟合相关系数较高,分别为0.9922、0.9966,均在0.99以上。结论:综合考虑,可以采用拟合精确度较高的Herschel-Bulkley三参数模型来研究试验中制备的农药悬浮剂流变曲线。
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