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H9N2亚型禽流感荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

作者： 杨玲玲 1 ; 牛凯 2 ; 王涛 2 ; 常维山 2 ; 刘玉庆 3 ;

作者机构： 1.山东农业大学动物科技学院预防兽医细胞免疫实验室;山东省农业科学院畜牧兽医研究所

2.;山东农业大学动物科技学院预防兽医细胞免疫实验室;山东省农业科学院畜牧兽医研究所

3.;山东农业大学动物科技学院预防兽医细胞免疫实验室;山东省农业科学院畜牧兽医研究所;

关键词： H9N2亚型禽流感病毒;HA基因;RT-PCR;检测;病毒分布

期刊名称： 黑龙江畜牧兽医

ISSN： 1004-7034

年卷期： 2017 年 15 期

页码： 39-42+287-288

收录情况： 北大核心

摘要： 为了研究H9N2亚型禽流感病毒(AIV)在家禽体内各个器官的分布,试验针对H9N2亚型AIV的HA基因设计1对特异性引物,同时设计1对扩增内参基因β-actin的引物,以阳性重组质粒作为标准品做标准曲线,建立荧光定量RT-PCR检测方法,并对人工感染H9N2的SPF雏鸡气管、胸腺、肺脏、肝脏、脾脏、肾脏、肠等器官进行3次重复检测。结果表明:该法线性关系R值均在0.99以上,检测极限均为10拷贝质粒DNA,比RT-PCR灵敏100倍以上;特异性好,批内和批间重复性试验变异系数均小于1%。通过比较各器官HA相对表达量,得出肠和胰腺中HA相对表达量最高,腺胃次之,脾脏、肝脏、胸腺、法氏囊中含量也比较高,气管、肺脏、肾脏中含量较低,其中肾脏含量最低。说明研究建立的H9N2亚型禽流感病毒荧光定量RT-PCR方法灵敏度高,特异性强。

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