科研产出
基因芯片技术在植物基因克隆中的应用研究进展
《基因组学与应用生物学 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：基因芯片是以预先设计的方式将大量的生物讯息密码(寡核苷酸、cDNA、基因组DNA等)固定在玻片、硅片等固相载体上组成的密集分子阵列。基因芯片技术本质是生物信号的平行分析,它利用核酸分子杂交原理,通过荧光标记技术检测杂交亲和与否,再经过计算机分析处理可迅速获得所需信息。由于其具有高通量、微型化、连续化、自动化、快速和准确等特点,已引起国际国内广泛的关注和重视,在许多领域得到了广泛的应用。本文简述了基因芯片的概念,技术特点及主要分类,着重对其在基因表达水平检测,基因突变和多态性的分析,基因组DNA分析,后基因组学研究以及转基因农作物检测等方面进行阐述,并说明其存在的问题及展望。
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中国部分地区2008年Ⅰ类新城疫病毒F基因遗传变异分析
《病毒学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：本研究采用RT-PCR方法对2008年13株Ⅰ类(Class Ⅰ)新城疫病毒国内分离株F基因主要功能区片段进行了扩增和分子流行病学分析.通过分析13株Ⅰ类新城疫病毒国内分离株的F蛋白裂解位点的氨基酸组成,从分子水平上证明全部分离株均为低致病性分离株.分子流行病学分析表明这13个病毒株分属于两个不同的基因型,其中有11个病毒株在分类地位上属于基因2型,2个病毒株属于基因3型.本研究证实至少有两种不同基因型的Ⅰ类低致病性新城疫病毒在我国商业禽群中广泛存在.
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利用ELISA方法鉴定大白菜TuMV抗性
《科技导报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：为了准确鉴定大白菜分离群体中各个单株的TuMV抗/感特性,采用美国Agdia公司的TuMV检测试剂盒,利用ELISA方法,对接种后的抗、感材料和F2代单株进行检测。结果表明,对抗病材料和感病材料,ELISA检测结果与其抗性表现基本一致,能明显区分出抗病和感病。但对发病较为严重的高感病毒病材料,ELISA检测结果却为阴性。绝大多数F2代的ELISA检测结果能够说明各个单株的抗/感特性。利用ELISA方法还能对某些单株的抗/感特性进行提前预测。因此,ELISA方法可作为大白菜TuMV抗病性鉴定的有利辅助手段。
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牛A组轮状病毒VP4全基因的克隆与原核表达
《贵州农业科学 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：以G6型牛轮状病毒总RNA为模板,应用RT-PCR技术扩增牛轮状病毒VP4开放性阅读框,通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至pEASY-T3载体中,成功构建出克隆质粒pEASY-T3-VP4。经双酶切后再将该基因重组于原核表达载体pET32a(+)中,构建出原核表达质粒pET32a-VP4。将pET32a-VP4转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约108 KD的融合蛋白带,成功构建了能够稳定表达VP4蛋白的基因工程菌株,为进一步研制牛轮状病毒基因工程疫苗奠定了基础。
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大豆抗烟粉虱的遗传分析
《大豆科学 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：利用高抗烟粉虱种质滑皮豆和高感种质齐黄26,组配滑皮豆×齐黄26杂交组合,分别在山东济南、冠县构建了F1、F2∶3遗传群体,调查亲本、F1群体和F2∶3群体各个家系单叶感染烟粉虱的平均数,采用植物数量性状主基因+多基因混合遗传分离分析方法,分析各遗传群体抗烟粉虱的遗传模式。结果表明:大豆对烟粉虱抗性的遗传符合一对主基因+多基因的混合遗传模式,主基因的遗传率较高,分别为61.86%和97.43%;多基因的遗传率较低,分别为23.76%和0.88%;而且不同地点的主基因和多基因遗传率差异较大。说明大豆抗烟粉虱既受主基因控制,又存在多基因效应,同时受环境因素影响。改良大豆品种对烟粉虱的抗性应重点利用主基因,同时兼顾多基因的积累。
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丹参种子航天搭载的生物学效应
《核农学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：为探讨丹参种子航天搭载的生物学效应,利用"实践八号"育种卫星搭载丹参种子,返回地面后进行田间种植观测,分别从生育时期、种子活力、地上部形态特征、根部性状、结实性状分析丹参航天诱变的生物学效应,利用SRAP标记技术分析了材料在DNA水平上的变化。结果表明:航天搭载造成了DNA水平上的变异;提高了种子的发芽率和出苗率,促进了幼苗的发育,开花期提前;促进了花苔长度和花蕾数的增加,抑制了叶片生长。总体上促进了根部性状和种子性状的变异,除冠幅、花轴长度外,增大了各性状的变异系数。丹参种子航天诱变的生物学效应可为丹参种质改良和品种选育提供参考。
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中国苹果枝干轮纹病发生和防治情况
《植物保护 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：2008年5~6月,对我国山东等7个苹果主产省市的88个果园苹果枝干轮纹病发生和防治情况进行了调查。结果显示,苹果枝干轮纹病的总体发病率达77.6%。随着树龄的增大,枝干轮纹病危害加重,发病率和病情指数均提高。4~10年生果树发病率为56.7%,病情指数为37.0;11~17年树龄的果树发病率为78.7%,病情指数为53.8;18~24年树龄的果树发病率为91.5%,病情指数为70.8;25年以上树龄的果树发病率为100.0%,病情指数为95.3。不同省份之间苹果枝干轮纹病的发生程度存在一定差异:该病在山东、河南和北京的危害相对较重,而在山西和陕西的危害相对较轻;几个主栽品种之间无明显差异。在枝干轮纹病的化学防治中,石硫合剂是最常用的药剂,其次是多菌灵。已被禁用于无公害果园生产中的福美胂仍然在不少果园中使用。
关键词： 苹果轮纹病 病害发生 化学防治 病害调查 苹果干腐病菌梨专化型
猪圆环病毒2型双拷贝感染性DNA的构建及体外拯救
《生物工程学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：感染性分子克隆是研究病毒复制和致病机制的有力工具。本研究应用PCR诱变技术解决了外源片段易于自连的难题,成功将2个PCV2SD1株全基因组(DQ346683)头尾相接插入到真核生物表达载体pSK的多克隆位点中,构建重组质粒pSK-2PCV2;另外课题组成功构建含单个PCV2全基因组的pSK-PCV2和自身环化质粒ds-PCV2。将所得3种质粒分别转染无PCV污染的PK-15细胞系,经10次连续传代后,间接免疫荧光试验检测显示三者均在细胞核中聚集大量的病毒抗原;经RT-PCR检测都有PCV2特异性基因转录;透射电镜下可观察到直径约为17～20nm的典型PCV2病毒粒子;经测序鉴定所拯救出的病毒与亲本病毒核苷酸同源性为100%。拯救出的PCV2与亲本病毒具有相同的病毒学及分子生物学特性。本研究应用PCR诱变技术成功构建PCV2双拷贝感染性克隆,并经体外拯救证实其具有感染性,为进行PCV2分子特性及致病机理研究打下了基础。
关键词： 猪圆环病毒2型 单拷贝 双拷贝 自身环化 感染性克隆 体外拯救
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莱芜猪和杜洛克猪心脏脂肪酸结合蛋白基因(H-FABP)表达差异和肉质性状的关系
《农业生物技术学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：肌内脂肪(Intramuscular fat,IMF)含量是猪肉品质的一个主要的决定因子,心脏脂肪酸结合蛋白基因(heart fat-ty-acid-binding protein,H-FABP)是影响肌内脂肪含量的候选
关键词： 莱芜猪 荧光定量RT-PCR H-FABP 基因表达 肉质性状
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大豆抗烟粉虱(Bemisia tabaci Gennadius)与农艺品质性状的关系
《中国农业科学 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：【目的】烟粉虱(Bemisia tabaci Gennadius)是一种严重的灾害性害虫,对大豆的危害十分严重。了解大豆的农艺、品质性状与抗烟粉虱的关系,为大豆抗烟粉虱遗传和育种研究提供参考。【方法】以213个国内外大豆品种作为试验材料,鉴定其单叶、单株感染的烟粉虱2～4龄若虫的数量,同时调查各品种的结荚习性、种皮色、子叶色、株高、底荚高、主茎节数、主茎粗、分枝数、总荚数、总粒数、单株粒重、百粒重、荚长、荚宽、籽粒的蛋白质和脂肪含量等。用SPSS16.0统计分析软件分析烟粉虱数量与各种农艺性状的关系。【结果】大豆单叶感染烟粉虱的平均数能够代表大豆品种对烟粉虱的抗性。大豆感染烟粉虱的数量受结荚习性、株型、产量、籽粒品质等多种因素影响。不同结荚习性大豆品种单叶感染烟粉虱的平均数存在显著差异,有限结荚习性>亚有限结荚习性>无限结荚习性。单叶感染烟粉虱的平均数与茎粗呈极显著的正相关,相关系数为0.282**;与单株粒重、籽粒蛋白质含量呈显著的正相关,相关系数为0.165*、0.166*;与种皮色、子叶色、株高、主茎节数、分枝数、籽粒脂肪含量的相关不显著。【结论】大豆对烟粉虱的抗性受结荚习性、茎粗、单株生产力、籽粒蛋白质含量等综合性状影响。
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