文献类型： 中文期刊

作者： 南晓伟 ¹ ; 杨少华 ² ; 高运东 ² ; 王长法 ² ; 杨宏军 ² ; 刘晓 ² ; 仲跻峰 ² ; 申之义 ¹ ; 何洪彬 ² ;

作者机构： 1.内蒙古农业大学

2.山东省农业科学院奶牛研究中心

关键词： 牛轮状病毒;VP4蛋白;基因克隆;原核表达

期刊名称： 贵州农业科学

ISSN： 1001-3601

年卷期： 2009 年 37 卷 07 期

页码： 105-108

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以G6型牛轮状病毒总RNA为模板,应用RT-PCR技术扩增牛轮状病毒VP4开放性阅读框,通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至pEASY-T3载体中,成功构建出克隆质粒pEASY-T3-VP4。经双酶切后再将该基因重组于原核表达载体pET32a(+)中,构建出原核表达质粒pET32a-VP4。将pET32a-VP4转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约108 KD的融合蛋白带,成功构建了能够稳定表达VP4蛋白的基因工程菌株,为进一步研制牛轮状病毒基因工程疫苗奠定了基础。