科研产出
小麦胚乳14-3-3蛋白的表达及其淀粉体淀粉合成酶的互作
《作物学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：从小麦胚乳中克隆了14-3-3基因,并将其分别插入pET29c和pET41c质粒,用热激法转化大肠杆菌BL21-CodonPlus (DE3)-RP,得到高效表达的蛋白,但融合蛋白主要以包涵体的形式存在.可溶性的融合蛋白可直接通过S-蛋白琼脂糖树脂纯化.包涵体经8 mol L-1尿素溶解变性,稀释复性后,结合到S-蛋白琼脂糖树脂上,也得到纯化的融合蛋白.复性后的融合蛋白对蔗糖合成酶活性表现抑制作用,说明包涵体14-3-3融合蛋白恢复活性.将结合14-3-3融合蛋白的S-蛋白琼脂糖树脂作为诱饵与小麦胚乳淀粉体提取液进行亲和杂交,与14-3-3蛋白特异互作的淀粉合成酶结合到S-蛋白琼脂糖树脂上,Western 检测结果表明, 淀粉体淀粉合酶I(SSI)、淀粉合酶II(SSII)、淀粉分支酶IIa(SBEIIa)、淀粉分支酶IIb(SBEIIb)和ADP焦磷酸化酶大亚基(SH2)与14-3-3蛋白存在互作,而淀粉分支酶I(SBEI)、淀粉磷酸化酶(SP)、D-酶(DE)和ADP焦磷酸化酶小亚基(BT2)不能与14-3-3蛋白结合,说明小麦胚乳14-3-3蛋白对淀粉体淀粉合成具有一定的调控作用.
关键词： 小麦14-3-3蛋白 表达 淀粉合成酶 蛋白互作
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3种铜制剂对作物种子的生态毒性效应
《农业环境科学学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：采用生物培养试验,测定了棕壤条件下,美国铜基杀菌剂Kocide2000(KCD)、波尔多液营养保护剂(BNPP)和硫酸铜(CS)3种铜制剂对作物(小麦、番茄、油菜)种子发芽、根茎伸长和发芽种子质量抑制的生态毒性效应。结果表明,铜制剂对3种作物种子根的伸长抑制率均明显大于对种子发芽、茎伸长和发芽种子质量的抑制率。统计分析表明,铜制剂施用浓度与植物发芽指数的相关系数最高,其次是根伸长抑制率。可以植物发芽指数、根伸长为指标研究铜制剂污染毒性与植物响应的剂量及效应关系。不同植物对铜制剂污染物的毒性响应具有明显差异,3种植物对铜制剂的敏感顺序为油菜>番茄>小麦,油菜可用作铜制剂污染土壤毒理诊断的指示植物。此外,由于铜制剂自身性质的不同,作物对其毒性响应不同,尤以对CS最敏感,BNPP和KCD次之。因此,在评价粉剂型铜制剂对环境的影响时,应充分考虑其自身的特点。
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云南省洱海周边地带大绒鼠体表寄生虫的多样性调查
《中国媒介生物学及控制杂志 》 2009 CSCD
摘要：目的了解洱海周边地带大绒鼠体表的寄生虫群落,并对其医学和兽医学的重要性进行描述。方法选取云南省洱海周边的不同地理方位作为野外抽样调查地点,用鼠笼加食饵诱捕小兽,每天早上检查捕获情况并更换诱饵。根据捕获小兽的体型、大小、颜色及体长、耳长和后足长等测量指标鉴定小兽并捡获其体表寄生虫。体表寄生虫经封片、透明、干燥后,在显微镜下鉴定寄生虫的种类。用染虫率和虫指数反映体表寄生虫的流行和密度状况,用统计分析中的非参数检验(Non-parametric Mann-Whitney U)分析雌雄小兽宿主间寄生虫数量差异,用Spearman相关分析(Spearman correlation analysis)分析体表寄生虫数量与宿主身体参数的关系。结果共捕获大绒鼠916只,其中756只体表有寄生虫,侵染率为83%。采集到的体表寄生虫有86种,包括51种恙螨,23种革螨,7种蚤和5种吸虱。其中17种以前已经被证明是人类疾病的主要媒介。结论大绒鼠的体表寄生虫多样性高,其中有17种曾经报道与人类疾病有关。大绒鼠很可能成为鼠疫、肾综合征出血热和灌丛斑疹伤寒等病原体的贮存宿主。
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体外培养时间和培养系统对山羊卵母细胞孤雌激活及发育的影响
《西南农业学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：探讨了体外培养时间和培养系统对山羊卵母细胞孤雌激活和体外发育的影响。结果表明:卵母细胞体外培养36、33、30和27 h活化率极显著高于18、21、24 h(P<0.01),体外培养24和21 h活化率显著高于18h(P<0.05)。2-4-细胞卵裂率,27、30和33 h极显著高于18 h(P<0.01),显著高于21 h(P<0.05)。大于4-细胞发育率24、27和30 h极显著高于21、33和36 h(P<0.01)。大于8-cell的发育率,24、27和30 h极显著高于21h(P<0.01)。24和27 h大于16-细胞的发育率极显著高于30h(P<0.01)。孤雌胚在TCM199和SOF中大于4-细胞发育率显著(P<0.05)低于颗粒细胞共培养系统,极显著低于(P<0.01)输卵管上皮细胞共培养系统。孤雌胚在颗粒细胞共培养系统中大于8-细胞和大于16-细胞发育率显著低于(P<0.05)输卵管上皮细胞共培养系统。
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莱芜猪和杜洛克猪不同部位肌肉H-FABP基因差异表达
《华北农学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：为研究不同品种猪不同部位肌肉H-FABP基因表达差异,探讨莱芜猪肌内脂肪沉积的分子机理,本试验选择体重100 kg莱芜猪10头、杜洛克5头,采用荧光定量RT-PCR法测定H-FABP基因在莱芜猪和杜洛克猪背最长肌和半膜肌中的表达量。品种间背最长肌和半膜肌H-FABP基因mRMA的表达差异虽未达到显著水平,但莱芜猪背最长肌和半膜肌H-FABP基因的表达水平均高于杜洛克猪。莱芜猪和杜洛克猪背最长肌与半膜肌间H-FABP基因表达量差异显著(P<0.05)。莱芜猪和杜洛克猪H-FABP基因mRNA表达量与肌内脂肪含量显著相关。
关键词： 莱芜猪 荧光定量RT-PCR H-FABP基因 肌肉
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油体蛋白与人成骨蛋白-1基因融合植物表达载体的构建及融合蛋白性质预测
《西南农业学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：克隆大豆油体蛋白特异启动子及油体蛋白基因的全长序列,利用连接PCR的方法,通过一个肠肽酶位点将人成骨蛋白成熟肽编码序列连接到油体蛋白基因3’端并克隆到表达载体pCAMB IA1302中,构建"油体蛋白-肠肽酶-人成骨蛋白"植物表达载体。通过酶切、PCR和测序鉴定,证明表达载体构建成功,将其命名为pCAM-oleo-Bmp7。通过蛋白分析软件DNAstar、S ignalP3.0和ProtComp v8.0等软件对重组蛋白的理化性质、二级结构、信号肽和细胞定位进行了分析和预测,证明融合蛋白很好的保留了原来两个蛋白的二级结构和理化性质。
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中国部分地区2008年I类新城疫病毒F基因遗传变异分析
《病毒学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：本研究采用RT-PCR方法对2008年13株I类(Class I)新城疫病毒国内分离株F基因主要功能区片段进行了扩增和分子流行病学分析。通过分析13株I类新城疫病毒国内分离株的F蛋白裂解位点的氨基酸组成,从分子水平上证明全部分离株均为低致病性分离株。分子流行病学分析表明这13个病毒株分属于两个不同的基因型,其中有11个病毒株在分类地位上属于基因2型,2个病毒株属于基因3型。本研究证实至少有两种不同基因型的I类低致病性新城疫病毒在我国商业禽群中广泛存在。
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