科研产出
猪流行性腹泻病毒变异毒株的分离鉴定及遗传演化分析
《生物学杂志 》 2022 CSCD
摘要：猪流行性腹泻（PED）是由猪流行性腹泻病毒（PEDV）引起猪的一种急性高度接触性肠道传染病。为了解山东地区PEDV的遗传进化趋势，对2020—2021年收集的疑似猪流行性腹泻的临床病料进行RT-PCR检测。随后将处理好的病料上清液接种于Vero细胞进行PEDV病毒分离，并利用间接免疫荧光（IFA）进行验证，成功分离到一株PEDV毒株，命名为QH-202105。将分离株传代培养至第10代，提取RNA后进行扩增并全基因组测序，结合NCBI下载的参考序列对分离株的全基因组和S基因进行核苷酸同源性比对、系统发育树构建分析，结果显示，分离株与美国分离株USA/Colorado/2013核苷酸同源性最高，为99.1%,与CHM2013株同源性最低，为96.5%。经S基因氨基酸序列分析显示，分离株QH-202105在S基因的N端有60多处突变，两处氨基酸插入（包括第59～62位氨基酸的QGVN 4个氨基酸插入，第145位氨基酸N的插入）和两处氨基酸缺失（第115～118氨基酸的缺失，第167～168氨基酸的缺失）。进化树分析结果显示，分离毒株QH-202105为G2基因群，与CH/HNAY/2015和CH/ZJCX-1/2012亲缘关系最近，属同一进化分支。在此基础上，应用PROVEAN对QH-202105的S蛋白突变氨基酸进行功能预测，结果显示，在1 361处（G→C）被判定为“Deleterious”,可以推测此处的突变对病毒的侵袭力可能存在间接影响。研究结果可为我国PEDV变异株的流行情况及防控提供参考。
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防治长柔毛野豌豆生草果园杂草茎叶处理剂筛选
《果树学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]筛选出有效防治果园长柔毛野豌豆生草田杂草的茎叶处理剂,为果园长柔毛野豌豆生草田杂草的化学防治提供参考.[方法]室内盆栽比较了 8种除草剂对长柔毛野豌豆的安全性和常见杂草的生物活性,筛选药剂进行复配,进一步研究复配制剂的联合除草类型,测定其对长柔毛野豌豆的安全性及其在长柔毛野豌豆与杂草之间的选择性指数,并对复配制剂进行田间药效试验.[结果]灭草松、咪唑乙烟酸与精喹禾灵茎叶喷雾处理在2×田间推荐剂量下对长柔毛野豌豆安全.咪唑乙烟酸在长柔毛野豌豆与碎米莎草、马唐、牛筋草、狗尾草、播娘蒿、牛繁缕之间的选择性指数大于2.0;灭草松在长柔毛野豌豆与荠菜、播娘蒿、牛繁缕之间的选择性指数小于0.7,安全性差;精喹禾灵在长柔毛野豌豆与牛筋草、狗尾草、马唐之间的选择性指数大于8.8.联合作用测定结果表明咪u乙烟酸与精喹禾灵按不同质量比复配后对马唐、牛筋草、看麦娘、牛繁缕、播娘蒿、荠菜的联合作用类型均为加成作用,其中以质量比2∶1复配后,选择性指数在2.4~8.9之间.田间试验结果显示:咪唑乙烟酸和精喹禾灵复配后在有效成分125~150 g·hm-2剂量下,于杂草2~3叶期、长柔毛野豌豆3~5复叶期茎叶喷雾处理,药后30 d对荠菜、播娘蒿和看麦娘的总体鲜质量防效在86%以上,同时对长柔毛野豌豆安全.[结论]咪唑乙烟酸和精喹禾灵复配可以作为果园长柔毛野豌豆生草田防除杂草候选药剂.
关键词： 果园生草 长柔毛野豌豆 咪唑乙烟酸 精喹禾灵 除草活性 安全性
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防治东亚飞蝗的杀虫剂筛选及不同组织酶活分析
《农药 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]探究不同杀虫剂对东亚飞蝗Locusta migratoria manilensis(Meyen)的生物活性及对解毒酶活性的影响,为研究东亚飞蝗的抗药性管理提供依据.[方法]采用浸叶法测定6种杀虫剂对东亚飞蝗的生物活动,并测定LC50浓度下东亚飞蝗不同组织解毒酶活性的差异.[结果]6种杀虫剂对东亚飞蝗的生物活性从高到低依次为溴氰虫酰胺、高效氯氟氰菊酯、啶虫脒、阿维菌素、吡虫啉及乙基多杀菌素.溴氰虫酰胺处理后,CarE活性在马氏管、中肠及脂肪体中显著提高,马氏管和中肠GST活性明显提高,马氏管和脂肪体P450活性显著高于对照.啶虫脒处理后,马氏管、中肠、脂肪体CarE活性显著增高,马氏管和中肠P450活性显著提高,马氏管GST活性显著提高.乙基多杀菌素处理后,脂肪体和中肠P450活性显著提高,CarE活性在3个组织中均显著提高.高效氯氟氰菊酯处理后,中肠CarE活性显著提高.[结论]6种杀虫剂对东亚飞蝗杀虫活性均较好,其中溴氰虫酰胺生物活性最高.GST、CarE和P450在东亚飞蝗对溴氰虫酰胺、啶虫脒的敏感性中发挥一定作用,CarE和P450可能参与了东亚飞蝗对乙基多杀菌素的解毒代谢,CarE可能是东亚飞蝗对高效氯氟氰菊酯产生耐受力的主要原因.
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二斑叶螨为害对草莓叶片H2O2、MDA含量以及部分防御酶活性的影响
《环境昆虫学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：本文旨在探究二斑叶螨Tetranychus urticae为害对草莓Fragaria×ananassa Duch.叶片内过氧化氢(H2 O2)、丙二醛(MDA)含量以及部分防御酶活性的影响.在草莓苗上接种不同数量(5~25头)的二斑叶螨,分别在接种后的24 h、48 h和72 h取样,分析草莓叶片内H2 O2、MDA的含量以及部分防御酶的活性.结果显示,二斑叶螨为害的草莓叶片内H2 O2和MDA的含量以及超氧化物歧化酶(SOD)的活性随着时间的延长而呈现先升后降的趋势,在二斑叶螨持续为害草莓叶片24 h、48 h和72 h时,受损草莓叶片中H2 O2的含量均显著高于对照(P<0.05),不同密度二斑叶螨为害的草莓叶片中H2O2的含量均显著高于对照(P<0.05),但与取食时间关系不大.当为害时间达到48 h时,MDA的含量和SOD的活性均达到最高峰,此时它们均与二斑叶螨的密度密切相关.当二斑叶螨为25头/叶时,MDA的含量和SOD的活性分别约是对照的3.6倍和10倍.过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)的活性随时间延长不断升高,均在二斑叶螨为害72 h时达到最高峰.同时,二斑叶螨的为害时间和为害密度之间存在一定的交互作用.以上结果表明草莓叶片主要通过调节其体内H2 O2和MDA的含量以及各种防御酶活性的变化,对二斑叶螨的为害产生应激反应.
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花生高亲和硝酸盐转运蛋白基因AhNRT2.7a响应低氮胁迫的功能研究
《中国农业科学 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]氮素在作物生产中对生物量和产量起关键作用.高亲和硝酸盐转运蛋白基因NRT2在植物响应低氮胁迫时被激活并具有维持氮吸收和转运的作用.通过筛选花生低氮耐受相关的NRT2基因并解析其生物学功能,为培育高氮素利用率的花生新品种提供理论参考,最终有助于实现节氮、高效的绿色生产目标.[方法]检测正常氮浓度及1/20正常氮浓度(15 mmol·L-1)条件下5个具有典型跨膜结构的花生NRT2基因(AhNRT2.4、AhNRT2.5b、AhNRT2.5c、AhNRT2.7a和AhNRT2.7b)的时空表达情况.以花育6309的cDNA为模板,对AhNRT2.7a进行克隆和生物信息学分析,并通过亚细胞定位确定AhNRT2.7a的表达部位.进一步构建异源过表达AhNRT2.7a的拟南芥株系,分别在正常以及低氮胁迫条件下测定其叶绿素含量、氮积累量以及谷氨酰胺合成酶(GS)、谷氨酸合成酶(GOGAT)、硝酸还原酶(NR)、亚硝酸还原酶(NiR)、谷氨酸脱氢酶(GDH)5个氮代谢关键酶的活性.[结果]5个NRT2基因中有4个NRT2基因在花生响应低氮胁迫条件下大量表达.其中,AhNRT2.7a能够响应低氮胁迫,并在花生茎和叶中高表达.获得AhNRT2.7a的cDNA序列,全长为1380 bp,编码459个氨基酸.蛋白结构分析显示其为具有12个典型跨膜结构域的膜蛋白.该氨基酸序列与栽培种花生(Arachis hypogaea L.)相似性高达99.56%,其次是野生亲本AA和BB基因组花生.亚细胞定位显示其主要定位于细胞质膜上.构建异源过表达AhNRT2.7a的转基因拟南芥植株,在不同供氮条件下,成熟叶和幼叶叶片的叶绿素相对含量均显著高于野生型拟南芥.同时,对上述5个氮代谢相关酶活性以及氮、磷、钾积累量测定显示,转基因植株中2个氮代谢相关酶(GS和NR)的酶活性以及氮积累量均比野生型拟南芥有显著升高.[结论]花生中4个NRT2基因响应低氮胁迫,其中AhNRT2.7a能够提高植物氮代谢过程的氮素利用率.AhNRT2.7a的表达在促进氮代谢过程的同时,促使碳代谢作用的进一步加强.因此,AhNRT2.7a适合作为花生氮素高效利用为目的的候选基因.
关键词： 花生 NRT2 AhNRT2.7a 氮素效率 氮代谢相关酶
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枣园生草处理对土壤养分和细菌群落的影响
《核农学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为了明确枣园种植长柔毛野豌豆(Vicia villosa Roth.)对土壤养分和细菌群落的影响,本试验以5年生金丝4号(Zizyphus jujuba Mill.)为试材,研究了枣园不同生草处理(清耕、自然生草、长柔毛野豌豆)对土壤基本理化指标和土壤细菌群落的影响。结果表明,与清耕(对照)相比,枣园生草提高了土壤含水量、全氮、有效磷、有效钾和有机质含量,降低了土壤pH值、含盐量和容重;同时也显著提高了土壤脲酶、蔗糖酶、过氧化氢酶、碱性磷酸酶和蛋白酶活性,均以长柔毛野豌豆处理最高。高通量测序结果表明,变形菌门、放线菌门和酸杆菌门为优势种群,相对丰度之和占42.4%～76.0%;γ变形菌纲、放线菌纲、α变形菌纲和芽孢杆菌纲为优势菌纲,其相对丰度占31.2%～68.0%。α多样性分析表明,长柔毛野豌豆处理较自然生草和清耕处理能够提高土壤细菌群落的丰度、种群丰度和多样性指数;β多样性分析表明,生草处理与清耕处理的细菌群落系统发育组成存在显著差异。冗余分析(RDA)表明,不同生草处理下土壤细菌群落相对丰度与土壤养分及酶活性存在一定相关关系。综上所述,枣园种植长柔毛野豌豆可提高土壤营养水平和果实品质、改善土壤细菌群落结构和多样性。本研究为推广应用枣园种植长柔毛野豌豆提供了理论依据。
关键词： 枣园 长柔毛野豌豆 高通量测序 土壤养分 土壤细菌
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50%氟啶虫酰胺·螺虫乙酯悬浮剂的高效液相色谱分析方法
《农药 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]采用高效液相色谱法测定氟啶虫酰胺和螺虫乙酯复配制剂的含量。[方法]采用甲醇和水为流动相,流速为1.0 mL/min,使用C18不锈钢柱和紫外可变波长检测器,在254 nm波长下测定氟啶虫酰胺和螺虫乙酯的含量。[结果]氟啶虫酰胺的方法标准偏差、变异系数、平均回收率和线性相关系数分别为0.083、0.54%、99.66%和1.0000。螺虫乙酯的方法标准偏差、变异系数、平均回收率和线性相关系数分别为0.094、0.27%、99.74%和1.0000。[结论]方法具有定量准确、重复性好、操作简便等特点。
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不同碳素纳米材料对黄曲霉毒素B1的吸附
《江苏农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：黄曲霉毒素B1（AFB1）对人体有较强的毒性，因此脱除食品中的AFB1具有重要意义。为了探究碳素纳米材料对AFB1的吸附机理，研究石墨、石墨烯、氧化石墨烯对AFB1的吸附，建立等温吸附曲线，进行吸附动力学、热力学分析，结合结构表征，探究其吸附过程，并用这3种碳素纳米材料脱除食品（食用醋、花生奶、花生油）中的AFB1。结果表明，3种碳素纳米材料对AFB1的吸附过程均符合Freundlich模型（R~2为0.944 1～0.988 5）、准二级动力学模型（R~2为0.973 5～0.997 2）,吸附以多分子层化学吸附为主。吸附过程均为自发放热过程，温度会影响碳素纳米材料的吸附能力，在25～45℃条件下，温度升高不利于吸附进行。3种碳素纳米材料对AFB1均具有较强的吸附能力，综合考虑，石墨烯的吸附能力最强，可有效脱除食品（食用醋、花生奶、花生油）中的AFB1。本研究系统探究碳素纳米材料对AFB1的吸附过程和吸附机理，可为碳素纳米材料用于脱除食品中的AFB1提供理论、技术支持。
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全株青贮玉米径向局部压缩特性试验
《吉林大学学报(工学版) 》 2022 EI 北大核心 CSCD
摘要：为深入研究青贮收获机喂入装置对全株青贮玉米的压缩作用,以粮饲兼用品种郑单958为研究对象,利用 自制的施压装置模拟喂入辊辊齿,通过单因素试验,研究了加载方向和加载速率对秸秆节间、节部和带苞叶果穗径向局部压缩载荷、功耗的影响,并从复合材料接触力学角度对破坏特征进行了分析.结果表明:施压过程中,30°~90°方向,秸秆节间、节部两侧出现平行于轴线的裂纹,弹性、屈服和压实强化阶段,载荷以不同速率递增;带苞叶果穗在破坏阶段,出现断裂现象,受苞叶抑制载荷没有明显减小;0°方向时,秸秆节间、节部和带苞叶果穗均出现劈裂现象并伴随载荷骤减,各部位抵抗变形的能力弱于其他方向.加载速率影响各部位进入不同变形阶段的速率,但发生形变时的压下位移相近;弹性和屈服阶段,秸秆节部的载荷较节间平均高2.5倍,相同位移下,100 mm·min-1时,节间、节部的平均载荷最大,75 mm·min-1时,平均载荷最小;强化压实阶段,加载速率对秸秆节部的影响比节间更明显;加载速率对带苞叶果穗压缩载荷的影响区别从屈服阶段开始,50 mm·min-1加载时,带苞叶果穗抵抗变形的能力最弱.当压下率超过45%时,横向喂入可显著降低喂入功耗,而径向喂入时,秸秆节间、节部和带苞叶果穗局部压缩功耗最小时的加载速率分别为75、75、50 mm·min-1.本研究可为青贮收获喂入装备关键部件的设计与优化提供参考.
关键词： 农业工程 全株青贮玉米 压缩特性 喂入 功耗 应力-应变
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