您好，欢迎访问山东省农业科学院文献资源数据库平台

牛Mx1基因重组慢病毒载体的构建及沉默Mx1细胞的获得

文献类型： 中文期刊

作者： 王洪梅 1 ; 刘文浩 2 ; 夏咸柱 1 ; 胡桂学 1 ; 何洪彬 2 ;

作者机构： 1.吉林农业大学动物科技学院

2.山东省农业科学院奶牛研究中心

关键词： 牛Mx1基因;胎儿原代气管上皮细胞;RNA干扰

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2016 年 36 卷 12 期

页码： 2030-2034

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用RT-PCR技术从牛肾细胞中扩增出Mx1基因,构建牛Mx1基因过表达重组载体;针对牛Mx1mRNA序列设计shRNA引物对,构建针对牛Mx1的RNAi载体。将牛Mx1的过表达载体和RNAi载体共转染293T细胞,利用Western blot方法检测牛Mx1蛋白的表达情况,筛选有效沉默牛Mx1的shRNA;将有效沉默Mx1的RNAi载体转染牛胎儿气管原代上皮细胞,经流式细胞分选,Western blot检测,获得沉默牛Mx1的稳定细胞系。结果表明,成功构建了牛Mx1过表达重组载体pcDNA3.1-Mx1和RNAi载体RNAi-Mx1A、RNAi-Mx1B、RNAi-Mx1C,筛选到RNAi-Mx1A沉默牛Mx1效果最好;经流式细胞分选和Western blot检测,获得有效沉默牛Mx1的牛胎儿气管原代上皮细胞,为进一步探讨牛Mx1抗病毒作用及机制的研究奠定试验基础。

  • 相关文献

[1]根结线虫16D10基因与花生FAD2基因RNAi载体构建. 于洪涛,唐月异,王秀贞,李贵杰,王传堂. 2011

[2]RNAi介导抗水稻条纹病毒转基因水稻的培育. 姜明松,周起先,朱文银,徐建第,姚方印. 2013

[3]农杆菌介导的花生Δ~(12)脂肪酸脱氢酶基因AhFAD2 RNAi抑制表达遗传转化研究. 张小茜,单雷,唐桂英,滕娜,毕玉平. 2007

[4]基于RNAi技术抗黑条矮缩病水稻新品系的培育. 朱文银,徐建第,杨连群,姜明松. 2018

[5]RNA干扰的机制及在兽医上的应用进展. 何叶峰. 2006

[6]花生AhFAD2基因抑制表达的转基因后代分析. 徐平丽,唐桂英,毕玉平,柳展基,单雷. 2018

[7]利用RNAi技术抑制马铃薯类受体激酶基因(StRLK)表达的研究. 朱云,樊娜娜,于耀华,张柏顺,杨煜,晁祥建,郭宝太,金黎平,郭晓,李广存. 2012

[8]鸭梨α-法尼烯合成酶基因双链RNAi表达载体的构建. 陈新,刘庆忠,李杨昕,吕慧贞,梁雅芹,张士刚,邵建萍,张元湖. 2007

[9]水稻普通矮缩病研究进展. 李臻,王庆国,姚方印,刘炜. 2011

[10]凋亡抑制蛋白基因dsRNA转基因烟草表达载体的构建. 郭强,褚栋,范仲学. 2013

[11]基于RNAi技术抗黑条矮缩病水稻新品系的培育. 朱文银,徐建第,杨连群,姜明松. 2018

[12]RNA干扰技术在农作物害虫防治中的应用. 郭强,范仲学,褚栋,李晓晴. 2012

作者其他论文 更多>>
置顶
购物车
反馈

© 京ICP备09089781号-29 主办单位：山东省农业科学院文献资源数据库平台

学术资源： 中国农业科学院 农业专业知识服务系统 农科联盟资源共建共享平台 中国农业科技文献与信息服务平台 中国农业期刊集成服务平台