文献类型： 中文期刊
作者： 杨建乐 1 ; 赵贵民 2 ; 侯佩莉 2 ; 王洪梅 2 ; 李杰 1 ; 何洪彬 2 ;
作者机构： 1.东北农业大学生命科学学院
2.山东省农业科学院奶牛研究中心
关键词： 牛副流感病毒3型;NP-HN基因;原核表达;酶联免疫吸附试验;抗体检测
期刊名称： 动物医学进展
ISSN： 1007-5038
年卷期： 2016 年 37 卷 11 期
页码： 19-24
收录情况： 北大核心
摘要： 旨在建立牛副流感病毒3型(BPIV3)抗体间接ELISA检测方法。克隆NP-HN截短串联基因并构建原核表达载体pET28a(+)-NP-HN,诱导纯化NP-HN重组蛋白作为包被抗原,优化ELISA反应条件,建立BPIV3抗体间接ELISA检测方法,进一步与病毒中和试验和进口ELISA试剂盒进行比较,应用本方法对270份临床血清样本进行了检测。结果表明,表达的NP-HN重组蛋白大小为44ku,具有良好的反应原性,建立的ELISA检测方法特异性强,与牛的主要呼吸道病原如牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎病毒等均无交叉反应,批内和批间重复性试验的变异系数小于8%,与病毒中和试验和进口商品化ELISA试剂盒的总符合率分别为96.67%和98.89%。对采自山东、辽宁和天津的270份临床血清样本检测后总的阳性率为82.59%(223/270)。建立的BPIV3抗体间接ELISA方法具有较好的特异性和敏感性,可应用于BPIV3的流行病学调查和抗体检测研究。
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