科研产出
新城疫基因工程疫苗的研究与应用进展
《动物医学进展 》 2008 北大核心
摘要：新城疫是当今世界上最严重的家禽传染病之一,特别是对养鸡业可造成重大经济损失,被世界动物卫生组织(OIE)列为必须报告的传染病。新城疫的主要防控手段仍是免疫接种,虽然传统的灭活疫苗和弱毒疫苗在疫病的控制中发挥了巨大作用,但存在着毒力返强、散毒和免疫期短等问题,不利于疫病的控制和消灭。论文论述了国内外应用现代分子生物技术对新城疫亚单位疫苗、重组活载体疫苗、DNA疫苗、新城疫病毒载体疫苗的研究和应用情况,展示了基因工程疫苗良好的应用前景。
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表达新城疫HN和F基因重组禽痘病毒的免疫效力测定
《家禽科学 》 2008
摘要：将8日龄SPF鸡随机分组,分别接种rFPVHN、rFPVF、rFPVNHF重组禽痘病毒,接种量为每只鸡105PFU,另一组群用LaSota活苗经点眼、滴鼻接种106EID50。于免疫后6d、12d和18d测定HI和微量中和抗体。结果发现,3种重组病毒均能刺激鸡群产生抗新城疫病毒特异抗体,但抗体产生时间比LaSota活苗缓慢,且抗体滴度亦低,然而共表达HN和F的rFPVNHF免疫鸡群的中和抗体水平明显比rFPVHN和rFPVF组群高,表明rFPVNHF的保护性免疫更优于HN或F单基因重组禽痘病毒。
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新城疫分离毒HN基因的分子特性和片段同源相关性
《病毒学报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要：选取国内1997-2005年分离的新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)24株,经蚀斑纯化克隆其血凝素-神经氨酸酶(HN)基因,与在GenBank发表的36株国内外不同时期的NDV毒株,进行氨基酸遗传变异分析,并利用SPSS8.0软件对其不同片段的氨基酸进行同源相关比较。结果显示:国内所有NDV分离毒株氨基酸高度同源,同源性为94.4%-99.4%;与LaSota、Clone30疫苗株等的氨基酸同源性为86.9%-89%;与强毒株F48E9的氨基酸同源性为87.9%-89.9%;与国外NDV的氨基酸同源性为87.2%-96.2%。系统发育分析表明:国内NDV分离毒HN遗传距离较近,而与LaSota、Clone30和F48E9遗传距离较远。国内NDV分离毒均缺乏538-540位糖基化位点。不同片段与全长的氨基酸同源性高度相关,且与前80个氨基酸相关最密切。
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高抗体水平种鸡NDV的分离鉴定和分子特性
《微生物学通报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要：从抗体水平较高、产蛋下降的种鸡群分离到一株新城疫病毒(Newcastle Disease virus,NDV)SGM01,经动物回归可产生NDV典型病变,其MDT、ICPI和IVPI等分别为50．5h、1．76和2．41,表明为强毒。对其F和HN基因进行克隆测序,F基因氨基酸多肽裂解位点的基序为~(111)GRRQKRF~(117),与强毒基序一致。基因分型表明SGMO1属Ⅶ型。氨基酸同源比较显示:SGM01与LaSota、SQZ04等基因Ⅱ型的同源性为:87．7%～88．3%;(?) Taiwan95、Yunnan03等基因Ⅶ型的同源性为:95．7%～98．2%;与F_(48)E_9等基因Ⅸ型的同源率为:90．8%～91．7%。HN基因与F基因不同,具有明显的时空性。SGM01、Taiwan95、SQZ04等新近分离毒氨基酸高度同源,同源性为:95．3%～97．2%,显著高于与LaSota(经典弱毒疫苗株)和F_(48)E_9(经典强毒株)的同源性87．4%～89．0%。
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一株新城疫重组强毒的分离鉴定与分子特性分析
《畜牧兽医学报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要：从患病蛋鸡中分离出1株新城疫病毒(NDV)SRZ/03,经蚀斑纯化后接种40日龄SPF鸡可诱发典型ND病变。蚀斑纯化前、后,MDT分别为55.2和51 h,ICPI为1.7和2.0,IVPI为1.91和2.79,表明属强毒。对其F和HN基因分别克隆测序,进行F基因分型。结果表明SRZ/03属基因Ⅱ型,F蛋白氨基酸裂解位点的序列为112R-R-Q-K-R-F117,与强毒基序完全相同。结合GenBank中发表的其他NDV参考株序列,对F和HN基因推导氨基酸序列进行比较。SRZ/03株与基因Ⅱ型LaSota/46、B1/47、Bingham/87和Texas/48的同源性分别为93.1%、93.0%、94.4%和94.4%;与基因Ⅶ型Taiwan/95、SGM/01和SKY/03的同源性分别为92.2%、92.8%和92.8%;与基因Ⅲ型F48E9/48的同源性为91.2%。然而,SRZ/03株F蛋白前210个氨基酸与基因Ⅱ型LaSota/46和Texas/48的同源性较高,达96.7%和98.1%,后343个氨基酸则与Taiwan/95、SGM/01等毒株的同源性较高,达95.7%~97.4%,推测该株为重组株。此外,SRZ/03株与Taiwan/95、SGM/01等毒株的HN氨基酸同源性高达95.8%~97.6%,显著高于与LaSota/46、B1/47、Bingham/87、Texas/48和F48E9/48的87.2%~89.2%。
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一株信鸽新城疫强毒的分离鉴定和分子特性分析
《农业生物技术学报 》 2007 CSCD
摘要：从发病信鸽的体内分离到1株新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)PB9601,经病毒蚀斑纯化后动物回归试验可产生典型的NDV病变,其鸡胚平均死亡时间(MDT)、一日龄雏鸡脑内接种的致病指数(ICPI)、六周龄鸡静脉接种的致病指数(IVPI)分别为50.5h、1.65和2.36,表明NDV为强毒。对其融合蛋白(F)和血凝素神经氨酸酶(HN)基因分别进行克隆测序,发现F蛋白多肽裂解位点的氨基酸基序为112 KRQKRF 117,符合鸽源NDV强毒序列。F基因分型及同源性比较显示:PB9601与YN-03、TW-98等鸽源毒株属于Ⅵ型,其F基因与疫苗株基因Ⅱ型LaSota的氨基酸同源性为88.6%,与疫苗株基因Ⅰ型V4的氨基酸同源性为91.0%,与传统强毒基因Ⅸ型F48E9的氨基酸同源性为90.6%;与国内鸽分离株GX-05、YN-03和TW-98的氨基酸同源性分别为92.1%、95.5%和98.6%;与国外鸽分离株Capital3-97、Tigre6-99、1166-00、IT-227-82和2736-00的同源性分别为93.3%、91.9%、94.6%、95.1%和93.6%。HN基因氨基酸同源比较显示:PB9601与LaSota、F48E9和V4的氨基酸同源性分别为87.2%、89.2%和87.6%;与国外鸽分离株1166-00、IT-227-82和2736-00的同源性为93.7%、95.5%和92.3%。PB9601与国内外鸽分离株、LaSota、F48E9和V4相比,具有明显的地域性和种属性。
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新城疫病毒HN基因的遗传变异与HI相关性的研究
《病毒学报 》 2006 北大核心 CSCD
摘要：选取国内1999~2004年分离的新城疫野毒10株,经CEF蚀斑纯化和SPF鸡胚增殖,对其血凝素-神经氨酸酶(HN)基因分别进行克隆和测序,结合在GenBank中发表的LaSota、F48E9和Clone30等参考序列,对其氨基酸序列进行遗传变异分析,绘制系统发育树。利用SPF鸡在隔离器中分别制备上述NDV毒株的单因子阳性血清,进行血凝抑制(HI)交叉试验,计算NDV不同株之间的HI相关系数(r)。利用统计学软件SPSS8.0对NDV不同株之间的HN氨基酸同源率和HI相关系数(r)进行相关比较。结果表明:NDV野毒间氨基酸高度同源,同源性为96.5%~99.8%,而与LaSota、F48E9和Clone30同源率仅为87.4%~89.9%;所有野毒均缺乏1个潜在的糖基化位点;HN基因的氨基酸同源性与HI相关系数显著相关(P<0.01,r=0.55)。
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