文献类型： 中文期刊

作者： 焦寒伟 ¹ ; 王洪梅 ² ; 刘晓 ² ; 杜丽 ¹ ; 雷明 ¹ ; 张冬琳 ¹ ; 郝永昌 ¹ ; 成鹰 ¹ ; 何洪彬 ² ; 王凤阳 ¹ ;

作者机构： 1.海南大学农学院

2.山东省农业科学院奶牛中心

关键词： 中国荷斯坦奶牛;髓样分化蛋白-2;克隆;原核表达

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2012 年 39 卷 02 期

页码： 20-24

收录情况： 北大核心

摘要： 本试验旨在克隆并表达中国荷斯坦奶牛髓样分化蛋白-2(myeloid differentiation protein-2,MD-2)基因,并用West-ern blotting进行鉴定。采用RT-PCR技术从中国荷斯坦奶牛外周血白细胞中扩增MD-2cDNA,并将扩增产物与pMD20-T载体连接,重组质粒经测序鉴定后,构建pET28a-MD-2重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE和Western blotting分析。结果表明,目的基因含有1个483bp的开放阅读框,编码161个氨基酸;与黄牛、黑猩猩和小鼠MD-2的cDNA序列同源性分别为99.38%、77.02%、68.12%,氨基酸同源性分别为98.75%、65.00%和58.13%。融合蛋白以包涵体的形式存在,分子质量约为25ku。说明本研究成功克隆并表达了中国荷斯坦奶牛MD-2cDNA,为其进一步的功能研究提供了理论依据。