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PRRS流行毒株与减毒活疫苗TJM-F92株qPCR区分方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

作者： 刘月月 1 ; 陶海英 1 ; 杜以军 1 ; 王兴东 2 ; 于江 1 ; 赵鹏伟 1 ; 刘思当 3 ; 王金宝 1 ; 吴家强 1 ;

作者机构： 1.山东省农业科学院畜牧兽医研究所

2.山东省寿光圣城街道畜牧兽医管理站

3.山东农业大学动物科技学院

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征;qPCR;体外转录;Nsp2基因

期刊名称： 家畜生态学报

ISSN： 1673-1182

年卷期： 2013 年 34 卷 04 期

页码： 57-61

摘要： 为快速准确区分PRRS流行毒株与减毒活疫苗TJM-F92株以及对流行毒株进行定量检测,按GenBank中发表的美洲型PRRSV SX-1分离株、弱毒疫苗株NSP2基因缺失部位的不同设计了一对特异性引物,通过RT-PCR和体外转录的方法,构建了体外转录RNA作为标准品,并对反应条件和反应体系进行优化,旨在建立一种敏感性高、特异性强、重复性和稳定性良好的qPCR鉴别方法。结果表明,该方法最低能检测出1.0×101拷贝/μL的模板,敏感性比常规PCR高100倍;应用该方法对218份临床样本进行鉴别与定量,qPCR检出率较常规RT-PCR高12.9个百分点。研究表明,qPCR鉴别方法的建立实现了对PRRS流行毒株与疫苗毒株的快速区分以及对流行毒株的定量检测,为PRRS的快速诊断提供了依据。

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