科研产出
玉米黄色素对人卵巢透明癌细胞ES-2侵袭、迁移、凋亡及周期的影响
《现代食品科技 》 2014
摘要：从玉米蛋白粉中提取、纯化得到玉米黄色素,研究其对人卵巢透明癌细胞ES-2的侵袭、迁移、凋亡及周期的影响。MTT法检测玉米黄色素作用于MDA-MB-231、PC-3、ES-2和A549细胞后的细胞活性;分别通过transwell体外侵袭试验、transwell体外迁移试验、流式细胞术检测玉米黄色素干扰对人卵巢透明癌细胞ES-2的侵袭能力、迁移能力、细胞凋亡和细胞周期的影响。结果显示,玉米黄色素对上述几种肿瘤细胞的生长均有抑制作用,其中对ES-2影响最为显著。当给药浓度达到100μg/mL时,对细胞的侵袭和迁移抑制率分别为52.59%和55.76%;流式细胞术检测结果表明,玉米黄色素浓度增加至100μg/mL时,G1期、S期和G2期细胞分别为85.33%、11.64%、3.21%,更多的ES-2细胞被阻断在G1期,且细胞凋亡率增加到13.85%。综上所述,玉米黄色素能够诱导ES-2细胞发生凋亡,阻断细胞周期,并抑制细胞的侵袭和迁移。
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CmMLO2:一个与甜瓜白粉病感病相关的新基因
《园艺学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：通过RT-PCR方法从甜瓜中克隆得到白粉病感病相关基因CmMLO2的cDNA序列,GenBank登录号为FJ713542。该基因ORF全长1713bp,可编码由570个氨基酸组成的蛋白质,具有7个跨膜螺旋结构,属于典型的跨膜蛋白。RT-PCR结果表明,CmMLO2主要在甜瓜叶片中表达,具有组织特异性。在受到白粉病菌胁迫时CmMLO2表达显著上调,表明CmMLO2很有可能与白粉病发病有关。构建RNAi表达载体pFGC1008-CmMLO2后,利用叶盘转化法转化甜瓜,获得了PCR阳性植株,白粉病接种鉴定结果表明,转化植株对白粉病具有抗性,证明通过ihpRNAi敲除CmMLO2,可以获得对白粉病具有抗性的甜瓜材料。
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水稻丙二烯氧化物合成酶基因OsAOS1的表达研究
《山东农业科学 》 2013
摘要：茉莉酸(Jasmonate,JA)为植物病虫害抗性反应中重要的信号分子,茉莉酸类物质生物合成途径中的关键酶为丙二烯氧化物合成酶(Allene oxide synthase,AOS).已知水稻AOS基因家族包括4个成员,Os-AOS1~OsAOS4.已有研究表明,水稻OsAOS2基因的过量表达提高了内源PR1基因的表达、增强了水稻对稻瘟病的抗性.本研究分析了OsAOS1基因表达的组织和器官特异性以及外源JA处理对OsAOS1基因表达的影响,同时利用转基因技术研究了OsAOS1基因在调控内源PR1基因表达中的作用.研究结果表明:OsAOS1基因表达的组织和器官特异性不同于OsAOS2基因;外源JA处理诱导OsAOS1基因的瞬时表达,然而OsAOS2基因的诱导表达延迟;OsAOS1过量表达抑制烟草中内源PR1基因的表达.据此推测OsAOS1基因可能不参与依赖于PR1的抗病反应.
关键词： 水稻 茉莉酸 丙二烯氧化物合成酶 转基因 PR1基因
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利用RNAi技术抑制马铃薯类受体激酶基因(StRLK)表达的研究
《华北农学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：植物类受体蛋白激酶(Receptor-like protein kinase,RLK)是蛋白激酶的一个亚家族,参与植物的信号转导,在植物生长发育、抗病等过程中起重要作用。在前期研究中自二倍体马铃薯高抗青枯病基因型ED13中获得了类受体蛋白激酶基因StRLK。利用StRLK基因的特异区段,以pUCCRNAi为中间克隆载体、pCHF1为植物表达载体,构建了该基因的RNA干扰载体pCHF1-StRLK。进一步以ED13的茎段为外植体,利用农杆菌介导法将pCHF1-StRLK导入ED13中,获得了5株再生植株。用CaMV35S启动子特异引物对5株再生植株进行PCR扩增,均得到大小约500 bp的特异性条带,初步证明pCHF1-StRLK成功转入ED13。以ED13为对照,利用StRLK基因的特异引物对这5株再生植株进行半定量RT-PCR分析,结果表明,该基因的表达在5个转基因植株中均受到了不同程度的抑制,说明导入的pCHF1-StRLK发挥了干扰活性,且干扰效果与基因的插入位点有关,为进一步研究StRLK基因的功能提供依据。
位点特异整合酶φC31的作用机制及应用
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：链霉菌噬菌体φC31整合酶是一种位点特异整合酶(Site-specific recombinase,SSR),其能够精确并单向的促进attP位点与attB位点的重组,是继Cre/Loxp、FLP之后又一个倍受关注的位点特异整合酶,该整合酶已经成为基因治疗、转基因研究等领域的常用技术手段。现对φC31位点特异性整合酶的作用机制、整合位点及其在转基因和基因治疗中的应用进行了综述,并对其发展前景进行了展望。
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