科研产出
一种新的植物泛素结合酶体外泛素化检测方法
《山东农业科学 》 2018
摘要：泛素结合酶是一类在泛素化修饰过程中起重要生物化学功能的蛋白。对于被预测为泛素结合酶的蛋白进行体外泛素化活性检测,是确定其泛素结合酶功能必不可少的试验步骤,试验结果可以为后续研究提供重要的线索。目前体外泛素化反应存在体外表达纯化蛋白工作量大、反应复杂、假阴性率高等问题。本研究针对以上问题进行了改良,开发出一种新的植物泛素结合酶活性体外检测方法,该方法无需裂解细胞提取、纯化蛋白,也不需要做体外反应,简便易行,结果更稳定可靠。应用该方法对花生泛素结合酶Ah UBC34和盐芥泛素结合酶Ts UBC33进行了检测,结果证明这两个蛋白都具有泛素结合酶活性。
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花生幼苗对重复干旱胁迫的生理响应
《生态学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：防雨棚内设盆栽试验,设置对照(Control,75%田间持水量)、干旱胁迫(D,35%)、重复干旱胁迫(D_D,35%)3个处理,探讨花生幼苗对预干旱胁迫的适应和记忆响应,分析预干旱对缓解重复干旱胁迫危害的生理作用。结果表明,与干旱胁迫处理相比,重复干旱胁迫提高了叶片的相对含水量,减少脯氨酸的积累,降低MDA和O·_2~-含量;抗氧化酶SOD、CAT活性降低,其中POD活性降低最为明显,并在复水后恢复到与对照相同水平或低于对照。与正常水分的对照相比,干旱胁迫显著降低叶片光合速率(P_N)、最大光合势能(P_C)、最大光量子产量(Y_Q),但重复干旱处理在重复干旱胁迫时期和复水后P_N、P_C和Y_Q均高于干旱处理。预干旱胁迫导致光合和气孔导度滞后面积、滞后率(H_P和H_g)增加,经过预干旱胁迫后,重复干旱显著降低光合和气孔导度滞后面积和滞后率。预干旱胁迫提高植株在重复干旱胁迫下叶片含水量,减轻重复干旱对植株造成的生理伤害,在光合作用上提高对重复干旱的抵御能力,并在复水后快速恢复到正常水分条件下植株生长水平,减少干旱对植株的不利影响。因此,预干旱胁迫促使花生幼苗具备适应或可记忆初始胁迫的能力,重复干旱胁迫时表现更为迅速和强烈的生理防御和快速的生理恢复机制。
关键词： 重复干旱胁迫 光合滞后 花生 抗氧化酶 气孔导度滞后 胁迫记忆
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利用近红外技术和转座子标记鉴定花生杂交F_1真杂种
《分子植物育种 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为探讨花生耐低温的遗传机理,实现耐低温分子标记辅助选择育种的长远目标,并培育耐低温的高油酸品种,搭配了2个普通油酸×高油酸杂交组合。首先通过近红外技术初筛,选择油酸含量预测值高于40%的F1单粒种子,进一步经转座子标记鉴定,分别获得了32粒和24粒真杂种。两对转座子标记引物Ah TE0398和Ah TE0167鉴定结果完全一致,也与FAD2等位基因特异PCR(AS-PCR)结果一致,证实了转座子标记鉴定技术的可靠性。
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一个与花生含油量相关的InDel标记的开发
《花生学报 》 2017 北大核心
摘要：为了开发与含油量紧密相关、能用于分子辅助高油育种的分子标记,本研究根据与花生含油量相关的位点设计了29对引物,并在7份品种中进行初步筛选。结果显示,有一对引物ID14-3表现出多态性,可以分别扩增出278bp(ID14-3a)和272bp(ID14-3b)的片段。进一步用该引物对171份品种组成的自然群体进行扩增,含ID14-3b的品种平均含油量为48%,含ID14-3a的品种平均含油量为46%。ID14-3b与花生品种的高含油量相关,可以用于花生含油量的分子标记辅助选择育种和高油种质鉴定。
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花生CAX相互作用蛋白4(CXIP4)基因克隆表达分析及载体构建
《花生学报 》 2017 北大核心
摘要：钙离子是细胞信号传导中重要的第二信使。CAX interacting protein(CXIP)是一类能够激活Cation exchanger(CAX)的钙离子转运活性蛋白,在离子转运体系中起重要作用。本研究利用RACE方法获得花生CAX相互作用蛋白4(CXIP4)基因的cDNA和DNA全长序列。该基因cDNA序列的全长包括966bp的开放阅读框,编码321个氨基酸。DNA全长为966bp,不含有内含子序列。推测的蛋白质分子量为36706.24Da,等电点为9.62。使用荧光定量技术(qRT-PCR)分析了该基因在花生品种日花1号植株中的组织表达和青枯菌胁迫条件下的表达变化规律,并构建了该基因的过表达载体、反义表达载体以及原核表达载体,为进一步研究花生中该基因的功能及其在花生抗青枯病中的作用奠定基础。
关键词： 花生 CAX相互作用蛋白4 青枯菌 载体构建
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花生AhNCED1基因的克隆、序列分析与载体构建
《江苏农业科学 》 2017 北大核心
摘要：脱落酸(ABA)在植物生长发育中起着重要的作用,9-顺式环氧类胡萝卜素双加氧酶基因(NCED)是其合成途径中的关键基因。采用逆转录PCR(RT-PCR)技术在花生种子中克隆到其同源基因AhNCED1,预测该基因开放阅读框为1 806 bp,编码601个氨基酸,蛋白质的分子质量为66.8 ku,等电点为8.49。通过生物信息学分析表明,该基因含有2种跨膜区,但均不明显;由17个丝氨酸、8个苏氨酸、5个酪氨酸参与磷酸化过程;同源比较发现,该基因与来自拟南芥、柱花草等的NCED具有较高的同源性,进化分析表明该基因与柱花草NCED的亲缘关系最近。笔者成功构建了该基因的亚细胞定位载体AhNCED1-GFP和超表达载体p Cambia2300EC-AhNCED1,为进一步研究花生中AhNCED1基因的功能奠定了基础。
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